多主棒孢菌(Corynespora cassiicola)是一种常见的植物病原菌,该真菌在自然界分布广泛,绝大多数为寄生菌,多存在于热带和亚热带地区的植物茎秆、枝条、叶片上或表层土壤中,主要引起黄瓜、豇豆、香蕉等植物叶斑病和落叶病,在人体中的感染比较少见,2010年至今共报道15例人类感染病例,其中皮肤和软组织感染9例、眼部感染5例、颅内感染1例.该文对C.cassiicola引起的人类感染病例进行综述分析,为相关疾病的诊断和救治提供参考.

[目的]探讨不同浓度外源茉莉酸甲酯(MeJA)诱导大麦抗叶斑病效应差异及其分子机制,为应用MeJA防治大麦叶斑病提供理论依据.[方法]以'蒙啤麦3号'大麦品种幼苗为材料,设置不接菌(无菌水处理叶片)、接菌(无菌水处理叶片接种麦根腐平脐蠕孢菌)和接菌+MeJA(0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 mmol/L MeJA喷施叶片后接菌)3组处理,于三叶期调查叶斑病发病情况,并据此筛选最适MeJA浓度,然后测定不接菌、接菌及接菌+MeJA(最适浓度)下不同处理时间叶片的抗氧化酶、抗病相关酶活性、丙二醛含量、渗透调节物质含量以及相关基因表达水平.[结果](1)叶面喷施外源MeJA提高了大麦对叶斑病的抗性,1.5 mmol/L MeJA处理叶片的病情指数较对照显著降低19.03％,诱导抗性效果最佳;(2)与单独接菌处理相比,1.5 mmol/L MeJA处理大麦叶片超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶、几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活性均显著提高,而其丙二醛、脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白含量显著降低,同时受MeJA调控转录因子及编码抗病相关酶的基因表达量显著上调.[结论]外源喷施1.5 mmol/L MeJA通过调节抗病相关酶活性和渗透调节物质含量,以及调控抗病相关酶基因及茉莉酸信号途径关键转录因子基因表达,进而提高大麦植株的叶斑病抗性.

多主棒孢引起的棒孢叶斑病为我国黄瓜生产上重要的新兴流行病害.多主棒孢寄主广泛,其 cassiicolin(Cas)毒素是多主棒孢侵染橡胶早期的关键致病因子,但在黄瓜/多主棒孢病害系统中的毒力功能目前尚不明确.本研究从来自黄瓜多主棒孢 HG3 菌株的基因组序列中鉴定到单拷贝的Cas2亚型基因,命名为CcCas2.在敲除该基因的过程中,发现CcCas2缺失突变体均为杂合,荧光染色试验进一步证实多主棒孢是多核真菌.对杂合突变体进行潮霉素筛选并单孢纯化,获得了纯合的CcCas2缺失突变体菌株(检出率≥20%).致病力测定显示,CcCas2纯合突变体和野生型菌株接种黄瓜叶片4 d后的发病程度相当.通过转录组数据、RT-PCR和qRT-PCR分析均发现CcCas2在转录水平上受到了强烈地抑制.本研究明确了多主棒孢 CcCas2 基因由于在转录水平受到抑制而对黄瓜没有毒力;所提出的多主棒孢纯合突变体高效获取方法为该菌进一步的功能基因研究奠定了基础.

为明确鉴定白及块茎腐烂病(根腐病)的病原菌,并筛选能够抑制病原菌的中药材提取物.该研究利用常规组织分离法对病原菌进行分离,通过形态学和分子生物学技术对致病菌株进行鉴定,同时观察了7种中药材提取物对病原菌的抑菌效果.结果表明:(1)从感病叶片、叶鞘及块茎中共分离得到 14 株真菌和4 株细菌,病原菌室内和室外回接表明菌株 GF-1 致病症状与田间一致,致病率均达到 100%.(2)经形态学鉴定,菌株GF-1 为附球菌属(Epicoccum)病原菌,菌落白色绒絮状,圆形;菌丝匍匐向外、向上生长,气生,无色,有隔膜,有分枝,具有分生孢子和厚垣孢子.(3)菌株GF-1 的ITS序列(全长522 bp)与GenBank中已登录的甘蔗的高粱附球菌(E.sorghinum,MN493119.1)序列一致性最高,达 99.62%,与已报道的白及叶斑病致病菌高粱附球菌(E.sorghinum,MF948994.1)的一致性为 98.88%.(4)培养基中含有 0.1～0.2 g·mL-1的青钱柳等 7 种中药材提取物,能够完全抑制GF-1 菌落的生长;当培养基中含有 0.05 g·mL-1的提取物时,肉桂和丁香提取物仍然能够完全抑制菌落的生长.综上认为,引起白及根腐病的致病菌为附球菌属高粱附球菌(E.sorghinum),培养基中分别含有 0.1～0.2 g·mL-1的青钱柳、白及、厚朴、八角、肉桂、蛇床子和丁香 7 种中药材提取物且均能完全抑制致病菌的生长.该研究结果为白及根腐病的防治提供了理论指导.

目的:对半夏主产区叶斑病进行调查,明确各地叶斑病主要病原菌种类,同时结合生物学特性测定和室内杀菌剂筛选,为半夏叶斑病的防治提供参考.方法:在 2020 年 6～9 月,对贵州、河北、甘肃半夏种植区叶斑病进行调查,对致病菌进行分离、回接验证、形态和分子鉴定、生物学特性检测,同时采用平板抑菌实验进行杀菌剂的筛选.结果:引起 3 种叶斑病的致病菌分别为高粱附球菌Epicoccum sorghinum、南瓜孢子菌Stagonosporopsis cucurbita-cearum、茄链格孢Alternaria solani.3 种病原菌在温度为25～28℃、pH为弱碱性时适应性较好;菌株E.sorghinum生长不受光照条件的影响,菌株S.cucurbitacearum有光照时生长速率较快,菌株A.solani在24 h暗培养条件下生长迅速.室内药剂筛选结果表明,枯草芽孢杆菌对 3 种叶斑病菌均有较好的抑制效果,其次为苯醚甲环唑,植物源乙蒜素抑菌效果较差.结论:半夏叶斑病可由多种病原菌引起,室内条件下枯草芽孢杆菌、苯醚甲环唑对本研究筛选到的 3 株优势致病菌有较好的防治效果,可为半夏叶斑病的田间防控提供一定的依据.

近年来,由弯孢属真菌侵染引发的病害在烟草上有上升的趋势,严重影响烟叶的产量和质量.为了更好地防治由弯孢属真菌引起的烟草叶斑病,本研究利用高通量测序技术对一株分离自烟草叶片的棒状弯孢菌 Curvularia clavata 线粒体基因组进行测序,组装得到一个环状的线粒体基因组,并对其组成特征、与典型叶斑病真菌的系统发育关系进行分析.结果表明,烟草棒状弯孢菌线粒体基因组长度为 41 763 bp,共编码 38个基因(13个蛋白编码基因、2 个rRNA基因和 23个tRNA基因),其碱基组成有显著的A-T偏好性,占比高达 70.35%.线粒体基因组中只有 3 个内含子和少量重复序列,这是造成其基因组大小收缩的主要原因.通过 6 个近缘病原真菌线粒体全基因的共线性分析,发现其线粒体基因组发生了基因重排事件.同时,物种同源区长度与对应物种的线粒体基因组大小呈正相关关系,同源区长度可能会影响物种的线粒体基因组大小.在选择压力分析中,发现烟草棒状弯孢菌线粒体为确保优势基因稳定遗传,自然选择和纯化选择起到了主导作用.系统发育分析表明烟草棒状弯孢菌与麦根腐平脐蠕孢 Bipolaris sorokiniana 和稻平脐蠕孢 Bipolaris oryzae亲缘关系最为密切,与前人基于ITS序列的进化分析结果一致.本研究首次从线粒体基因组方面对弯孢属真菌进行研究,丰富了弯孢属真菌线粒体基因组序列信息,为该属真菌的系统发育、资源保护及遗传多样性研究提供基础数据.

目的:鉴定引起薄荷叶斑病的病原菌种类及室内筛选该病害的防治药剂.方法:应用组织分离法获得疑似病原菌菌株,用柯赫氏法则确定病原菌.结合形态学与分子生物学方法进行鉴定,然后使用菌丝生长速率法测定8种杀菌剂对该病原菌的室内毒力活性.结果:从新乡市感染了叶斑病的薄荷叶片上分离出11个纯菌株,致病性试验结果表明,分离得到的真菌菌株HN-BH-3为薄荷叶斑病的致病菌.通过对致病菌rDNA-ITS序列、TUB2与TEF-1α基因序列分析,结合形态学特征,鉴定菌株HN-BH-3为球黑孢菌Nigrospora sphaerica;8种药剂的筛选结果表明,多菌灵、苯醚甲环唑和甲基硫菌灵对球黑孢菌的EC50值均小于1 mg/L,分别为0.0330、0.0415、0.7478 mg/L.结论:从染病薄荷叶分离的病原菌为球黑孢菌;多菌灵对球黑孢菌具有较好抑制效果.

为探讨黄瓜棒孢叶斑病生防细菌HK11-9 的防病能力,通过皿内试验测定HK11-9 对黄瓜棒孢叶斑病菌多主棒孢霉的抑菌活性、通过离体和活体接种试验评价其对黄瓜棒孢叶斑病的防治效果,进行盆栽试验分析HK11-9 在黄瓜叶部的定殖能力及其对黄瓜叶部防御酶活性的影响,同时,测定HK11-9 的生物学功能并对其进行鉴定.结果显示,HK11-9 显著抑制多主棒孢霉的菌丝生长和孢子萌发;在离体接种和活体接种条件下,HK11-9 均对黄瓜棒孢叶斑病具有明显的防治效果,其防治效果分别达到 62.80%和 67.73%;同时,HK11-9 在黄瓜叶部具有稳定的定殖能力,在黄瓜叶部能保持 104 CFU/g的定殖密度,能够显著提高黄瓜叶部PAL、POD和PPO活性.HK11-9 菌株具有分解蛋白、分解纤维素、分解淀粉和产嗜铁素作用,对多种植物病原真菌具有抑菌活性;并根据形态特征、生理生化特性和 16S rRNA序列同源性分析,将HK11-9 菌株鉴定为多黏类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa).综上所述,生防细菌HK11-9 防治黄瓜棒孢叶斑病具有极大的潜力.

[目的]明确浙贝母叶斑病的致病菌种类,并筛选有效杀菌剂.[方法]采用病组织分离法,从浙贝母叶斑病病株中分离纯化真菌,以聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增基因组DNA的内源转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)、翻译延伸因子-1α(translation elongation factor-1α,TEF-1α)和微管蛋白基因(tubulin gene,TUB)并双向测序,经 DNAMAN 9.0软件拼接后利用基本局部对齐搜索工具(basic local alignment search tool,BLAST)进行分析.采用邻接法构建系统发育树以鉴定真菌种类,采用菌饼接种寄主植物和组培苗的柯赫氏法检测致病性,以生长速率法和抑菌圈法室内筛选病原真菌的有效杀菌剂.[结果]从浙贝母叶斑病病株中分离纯化获得1种间座壳属(Diaporthe)真菌.分离物的ITS、TEF-1α和TUB扩增片段与GenBank 中 Diaporthe eres(无性型为 Phomopsis oblonga,P.oblonga)相应片段的同源性分别为 100％、99.73％和 96.95％(登录号:LC342971、MW804672、MT561360).在间座壳属中,分离物与P.oblonga的亲缘关系最近.该菌株接种浙贝母植株和组培苗后诱发浙贝母叶斑病.吡唑醚菌酯、咯菌腈、异菌脲、苯醚甲环唑、腈菌唑、咪鲜胺对该真菌的半最大效应浓度(concentration for 50％of maximal effect,EC50)分别为0.174、0.084、1.092、0.041、0.619和0.004μg·mL-1;6种杀菌剂对P.obloniga孢子萌发的抑制效果为咪鲜胺＞吡唑醚菌酯＞苯醚甲环唑＞腈菌唑＞咯菌腈和异菌脲.[结论]本研究证实,P.oblonga是浙贝母叶斑病病原真菌,咪鲜胺和苯醚甲环唑是防治浙贝母叶斑病的有效杀菌剂.

丹参是多年生草本植物,根部入药,是我国大宗中药材.近年来,随着市场需求逐步增加,种植面积不断扩大,丹参病害发生日益严重,已成为丹参产量和品质的重要威胁.其中,以根部病害为害最为严重.丹参根腐病是生产中的最重要病害,其次为丹参枯萎病,叶部病害以叶斑病最为严重.目前生产上对丹参病害的防治主要以化学防治为主,辅助以生防制剂.该文对丹参根腐病、枯萎病、白绢病、根结线虫病、叶斑病、红叶病及病毒病丹参常见7种病害的为害症状、病原菌、发生规律以及防治措施等进行了总结,旨在为丹参生产中病害辨识、病原物的分离鉴定及科学用药,正确防治各病害提供指导.