外泌体是源自细胞膜系统的囊泡，起源于内体多囊泡体，释放到组织液中。外泌体作为细胞间通信的载体，含有蛋白质、脂质、源自其供体细胞质的编码或非编码RNA。卵泡是卵母细胞发育的重要微环境，在卵母细胞发育过程中，物质通过细胞外囊泡进行卵母细胞与卵泡周围卵丘和颗粒细胞之间的物质传递，从而调节卵母细胞的基因表达。在正常和病理条件下，外泌体由多种细胞释放，参与多种疾病的发生发展，可作为疾病的候选生物标志物及治疗干预的潜在目标。本文阐述了外泌体中的微小RNA、长链非编码RNA及环状RNA等成分在卵母细胞发育状态中的作用机制及其在卵巢、子宫相关生殖系统疾病如多囊卵巢综合征、卵巢癌、子宫内膜异位症中的变化。针对外泌体的检测可以深入了解卵母细胞发育状态，有助于疾病的预防、诊断和治疗。

卵巢周围腹膜腔缺乏局部屏障，来源于卵泡液和腹腔积液等体液中的外泌体是卵巢癌肿瘤微环境中重要的非细胞成分。外泌体携带的内容物与其来源细胞高度相似，成为研究卵巢癌多种组织学类型所具有的独特生物学起源的新方向。文章就外泌体在卵巢上皮性癌多起源发生过程中的研究进展进行综述。

目的:探讨多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）患者卵泡液肾上腺髓质素（adrenomedullin，ADM）的表达水平及其与卵巢功能和炎症的相关性。方法:收集2023年3~12月于山西省儿童医院（山西省妇幼保健院）生殖医学中心接受体外受精（ in vitro fertilization，IVF）/卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）拮抗剂方案来促排卵助孕的不孕夫妻的资料进行队列研究。将PCOS患者作为PCOS组（ n=20），选择同期单纯因输卵管和/或男方因素行IVF/ICSI助孕的患者作为对照组（ n=20）。检测并比较两组患者一般临床资料和卵泡液中ADM、白细胞介素1β（interleukin 1β，IL-1β）、IL-18、转化生长因子β（transforming growth factor β，TGF-β）的浓度，并以卵泡液ADM浓度为主要研究指标与其他指标进行相关性及多元线性回归分析。同时比较两组患者颗粒细胞（granulosa cells，GCs）的 ADM mRNA表达、细胞周期与凋亡情况。 结果:与对照组相比，PCOS组患者卵泡液及GCs中ADM表达明显更低（均 P<0.001），而其睾酮、黄体生成素与卵泡刺激素比值、窦卵泡计数（antral follicle count，AFC）、获卵数、卵巢敏感指数以及卵泡液IL-1β、IL-18、TGF-β更高，且均与ADM浓度呈负相关（ r=-0.37， P=0.019； r=-0.32， P=0.047； r=-0.50， P<0.001； r=-0.38， P=0.017； r=-0.38， P=0.016； r=-0.44， P=0.005； r=-0.37， P=0.018； r=-0.54， P<0.001）。多元线性回归分析表明，AFC、促性腺激素启动剂量、IL-1β和TGF-β是影响局部ADM水平的独立相关因素（ r=-0.37， P=0.008； r=-0.27， P=0.035； r=-0.28， P=0.028； r=-0.45， P<0.001）。两组患者GCs的周期情况差异无统计学意义（ P>0.05），但PCOS组GCs凋亡率（apoptosis rate，AR）高于对照组（PCOS组AR中位数=46.07%，对照组AR中位数=28.57%， n=10， P=0.036）。 结论:PCOS患者卵泡液中ADM表达的降低与卵巢内分泌紊乱、多个囊泡、高卵巢反应性及局部炎症状态有关。

卵泡发育异常是子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)合并不孕的病理机制之一.近年,环状RNA(circular RNA,circRNA)在子宫内膜相关疾病发生过程中的作用日益引起关注,但是circRNA在EMs中的研究尚处于起步阶段,尤其是circRNA在EMs卵泡发育中的作用仍不明确.目前已知circRNA能够通过影响卵泡颗粒细胞增殖与凋亡、上皮-间质转化以及卵泡液微环境和激素调节,参与EMs的发生发展过程,并进一步导致不孕.阐述circRNA可能影响卵泡颗粒细胞从而导致不良妊娠结局的研究进展,探讨circRNA作为EMs生物标志物的可能性,以期为临床提供诊治的新思路和新方法.

目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵泡液中内脂素、网膜素-1及脂代谢成分在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中对卵泡生长、胚胎发育及妊娠结局的作用.方法:选取接受IVF-ET的患者130例,其中PCOS患者68例.将患者按BMI分组:正常体重PCOS组(41例),正常体重对照组(33例),超重PCOS组(27例),超重对照组(29例).测定患者卵泡液中内脂素、网膜素-1及脂质(TC、TG、HDL、LDL)水平,分析其与IVF-ET结局的相关性.结果:PCOS患者卵泡液中内脂素浓度及TC浓度显著高于对照组;网膜素-1及HDL浓度显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).按BMI分为亚组后,正常体重PCOS组的获卵数、MII卵数、卵泡液中内脂素、TC、TG、LDL浓度明显高于正常体重对照组,卵泡液中网膜素-1及HDL浓度明显低于正常体重对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).超重PCOS组卵泡液中内脂素、TC、TG、LDL浓度明显高于超重对照组,卵泡液中网膜素-1及HDL浓度明显低于超重对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).PCOS患者卵泡液中内脂素浓度与获卵数(r=0.546,P<0.05)、优胚数(r=0.479,P<0.05)呈正相关;卵泡液中网膜素浓度与BMI(r=-0.667,P<0.05)、LDL(r=-0.498,P<0.05)呈负相关,与卵泡液中HDL(r=0.582,P<0.05)呈正相关.结论:PCOS患者卵泡液中内脂素水平升高及网膜素-1水平减低,提示内脂素及网膜素-1可能是诊断PCOS的一个潜在生物学指标.调节PCOS患者局部微环境中内脂素浓度可能会改善IVF助孕过程中部分COH结局.

目的 探讨空泡型质子泵(VHA)调节阴道微环境的机制.方法 选择月经规律期女性18例(对照组),绝经过渡期女性19例(研究组1),绝经期女性16例(研究组2).取宫颈-阴道部组织(hECE)进行VHA的免疫组化染色及实时荧光定量PCR实验,分析VHA与年龄、血清雌二醇(E2)、阴道pH值等指标之间的相关性.结果 (1)随着三组患者血清E2水平下降,其阴道pH值逐渐升高,VHA的mRNA含量逐渐减少(P＜0.01).(2)三组患者VHA蛋白含量逐渐减少,在生发层基底侧无明显表达.(3)在hECE中VHA的表达与血清E2呈正相关,与年龄、阴道pH值呈负相关(P均＜0.01).结论 雌二醇可能通过调节hECE中的VHA改变阴道微环境.

目的 探讨环磷酰胺(CTX)对卵巢结构与功能的影响及其相关机制.方法 50只SD雌鼠随机分为模型组和对照组.模型组大鼠首日以50mg/kg负荷剂量腹腔注射CTX溶液,随后以8mg/(kg·d)维持剂量连续腹腔注射CTX溶液14d建立早发性卵巢功能不全(POI)模型;对照组每日腹腔注射等量生理盐水.观察两组大鼠动情周期、性激素水平及脏器组织形态学改变等指标,判断建模效果;TUNEL法检测卵泡内颗粒细胞的凋亡情况,ELISA检测组织匀浆中相关炎症因子含量,并采用Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达水平,初步探讨POI的发生机制.结果 与对照组比较,模型组大鼠动情周期紊乱;血清抗苗勒管激素(AMH)、雌激素(E2)水平明显降低(P＜0.01),促卵泡激素(FSH)水平明显升高(P＜0.01);各级卵泡数量明显减少(P＜0.05);子宫内膜萎缩,子宫壁变薄,腺体稀少.与对照组比较,模型组大鼠卵泡内颗粒细胞凋亡增加,组织匀浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及IL-6含量明显升高(P＜0.01),血管内皮生长因子-α(VEGF-α)含量明显降低(P＜0.01),凋亡相关蛋白Bax表达水平明显升高(P＜0.01),Bcl-2表达水平明显降低(P＜0.01).结论 CTX导致大鼠卵巢结构、生殖及内分泌功能发生明显改变,其机制可能与局部微环境改变及Bax/Bcl-2表达失衡引起颗粒细胞凋亡增加有关.

[目的]比较卵巢低反应患者进行卵巢轻微刺激和控制性卵巢刺激体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期中卵泡液内激素水平、细胞因子的差异及其与获卵数、胚胎数等的关系.[方法]本研究为观察性研究.招募符合博洛尼亚标准的卵巢低反应患者,随机分为实验组(组2)和对照组(组1).实验组采用来曲唑及低剂量外源性促卵泡生成素(Gn)进行卵巢轻微刺激,对照组采用常规控制性卵巢刺激(黄体期GnRH激动剂修饰长方案)进行卵巢刺激.于取卵日收集成熟卵泡(＞16 mm)的卵泡液,其中实验组共23例,对照组共28例,测量卵泡液中促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌激素(E2)、孕激素(P)、睾酮(T)和抗苗勒管激素(AMH)水平,以及抑制素(inhibin)、生长分化因子9(GDF9)和骨形成蛋白家族(BMP)水平.统计分析卵泡液中各激素、因子水平与获卵数、可利用胚胎数及优质胚胎数的相关性.[结果]实验组和对照组患者基本情况各指标之间:年龄、不孕年限、基础FSH、和窦卵泡数(AFC)差异均无显著性意义(P＞0.05).与对照组相比,实验组Gn用量更少,但两组的获卵数,可利用胚胎数及优质胚胎数差异均无统计学意义(P＞o.05).与对照组相比,实验组卵泡液中LH水平、睾酮水平和inhibinB水平明显增高,而FSH水平、inhibinA水平、BMP8B和GDF9水平明显降低.其他几种激素水平,包括E2、P、AMH和BMP2、6、8B、15水平,两组间差异无显著性意义(P＞0.05).相关分析显示,卵泡液中各激素和细胞因子水平均与获卵数、可移植胚胎数及优质胚胎数无相关性.[结论]POR患者使用不同的轻微刺激和常规控制性卵巢刺激,卵泡微环境不同.但未发现这些变化与获卵数、可利用胚胎数、优质胚胎数存在相关性.

目的:探讨PCOS患者卵泡微环境中kisspeptin、KISS-1 mRNA及KISS-1 R mRNA表达水平的差异及kisspeptin对卵巢颗粒细胞雌激素和孕激素分泌功能的影响.方法:ELISA法检测17例PCOS患者及20例正常女性卵泡液中kisspeptin水平,RT-PCR检测颗粒细胞中KISS-1/KISS-1 R mRNA表达.ELISA法检测kisspeptin处理后对颗粒细胞分泌雌激素和孕激素的影响.结果:PCOS患者取卵日卵泡液kisspeptin水平[(28405±2170.4)ng/ml]显著高于正常女性[(206729±2450.8)ng/ml],差异有统计学意义(P<0.05).PCOS患者组颗粒细胞KISS-1 mRNA水平(7.32±1.68)高于对照组(2.25±0.36),差异有统计学意义(P<0.05).Kisspeptin处理黄素化的颗粒细胞后,颗粒细胞分泌雌激素和孕激素增加.结论:Kisspeptin可能参与了PCOS患者卵巢微环境病理改变过程.

目的:观察六味地黄颗粒对肾阴虚不孕患者体外受精(IVF)结局及卵巢颗粒细胞PI3K、pAkt和FoxO3a的影响.方法:66例接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的高龄(≥35岁)肾阴虚不孕患者,随机分为治疗组和安慰剂组,每组33例.两组患者除接受相同的促排卵方案治疗外,治疗组与安慰剂组分别在IVF前接受六味地黄颗粒或安慰剂治疗3个月经周期,评估肾阴虚证候积分的变化,并观察获卵数、2PN受精率、成胚率和临床妊娠率.在取卵日收集卵泡液,提取颗粒细胞,观察颗粒细胞凋亡率,并通过qRT-PCR和Western Blot技术检测颗粒细胞中的PI3K、pAkt和FoxO3a的mRNA及蛋白表达水平.结果:治疗组肾阴虚证候评分从(14.82±1.16)分下降至(7.87±1.32)分,而安慰剂组变化不明显,两组评分比较差异有统计学意义(P<0.05).治疗组患者卵巢颗粒细胞凋亡率与安慰剂组相比,明显降低(P<0.05).治疗组的成胚率和临床妊娠率(57.35％和46.63％)均优于安慰剂组(48.48％和24.24％),差异有统计学意义(P<0.05).两组之间的获卵数没有差异.与安慰剂组相比,2PN受精率变化没有统计学意义.与安慰剂组相比,治疗组PI3K和pAkt的mRNA和蛋白表达水平明显升高,FoxO3a表达下降.结论:对于接受IVF-ET的高龄肾阴虚证不孕患者,补肾中药可以缓解临床肾阴虚症状,提高成胚率及临床妊娠率,其机制可能与通过调节颗粒细胞中PI3K、pAkt和FoxO3a的表达来改善卵母细胞发育微环境、抑制颗粒细胞凋亡及提高卵母细胞质量有关.