目的:分析济宁市2017—2020年度乙型流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因变异情况及分子进化特征。方法:采集2017—2020年度济宁市哨点医院和流感暴发疫情病例咽拭子标本，进行核酸检测、病毒分离，选取20株乙型流感病毒代表毒株进行 HA和 NA基因测序，利用生物信息学软件构建进化树并分析分子进化特征。 结果:2017—2020年度共监测病例标本4 575例，流感病毒阳性842例，其中乙型流感病毒阳性398例，阳性率8.70%(398/4 575)，占比47.27%(398/842)。2017—2020年度济宁分离的BV系和BY系流感病毒与疫苗株比， HA基因同源性分别为98.7%～98.8%、98.5%～99.1%。2018—2020年度BV系流感归属于Victoria clade 1A分支，2017—2018年度BY系流感归属于Yamagata clade 3分支。对抗原表位和耐药位点的变异情况进行了分析，发现多处抗原表位发生了变异，但未发现神经氨酸酶抑制剂耐药位点的变异。 结论:2017—2020年度济宁市BV系和BY系乙型流感病毒均发生了数个抗原位点变异，出现了抗原转变，可能是引起乙型流感暴发的原因。

目的:研究2014—2019年杭州地区乙型流感病毒的流行情况以及血凝素基因(HA)和神经氨酸酶基因(NA)的遗传进化特征。方法:收集2014年10月—2019年9月间杭州地区流感样病例10 481例，用实时RT-PCR法检测乙型流感病毒，同时选取部分乙型流感病毒阳性样本，用特异性引物扩增HA和NA基因，进行基因测序并分析其遗传进化特征。结果:发现自2014年以来，杭州地区每年都有乙型流感病毒的流行。其中5～14岁年龄段人群发病率最高。2014—2019年，杭州地区流行的Victoria系乙型流感病毒都属于V1A进化簇，而Yamagata系乙型流感病毒都属于Y3进化簇。HA和NA基因的序列一致性分别为94.67%～100.00%和97.13%～100.00%，并在多个抗原位点发生了改变，同时出现了重排株。结论:乙型流感病毒在杭州地区流感流行中影响显著。2014—2019年，杭州地区乙型流感病毒出现了抗原变异和基因重排，流行株和疫苗株之间存在不匹配的情况，但目前并未发现耐药株的出现和流行。

目的:对四川省一例由野生动物(猪獾)咬伤发病的疑似狂犬病病例的唾液标本进行狂犬病病毒的全基因组序列测定，从分子水平对病毒进行遗传变异特征分析，了解四川省野生动物狂犬病病毒的流行和变异情况。方法:从疑似狂犬病病例的唾液标本中提取总病毒RNA，采用PCR的方法以特异性引物进行狂犬病病毒序列扩增，将获得的基因片段进行测序，并运用生物学软件将所得序列进行拼接从而得到狂犬病病毒株的全基因组序列。对全基因组进行遗传变异特征分析。结果:经测序获得1株猪獾源狂犬病病毒(以下简称SCR23-052)全基因组核苷酸序列，经NCBI在线BLAST及与多个参考序列比对表明，SCR23-052全基因组序列的组成和结构符合弹状病毒科狂犬病毒属特征；分别与宁夏毒株(J)、重庆毒株(CQ92、02050CHI)之间各个基因区域核苷酸与氨基酸序列相似性最高，SCR23-052基因组序列差异性在氨基酸水平明显低于核苷酸水平，说明蛋白质编码基因的核苷酸变异大多属于同义突变。种系发生分析显示SCR23-052属于基因V型，其糖蛋白主要抗原位点未见明显突变，在线网址预测糖蛋白在第56和338位发生了氨基酸糖基化，SCR23-052与参考疫苗株CTN181的信号肽序列相比氨基酸差异最少。本研究病毒在核蛋白主要抗原位点与所有参考疫苗株均发生了相同的突变(332位A→T)，在B细胞表位仅与参考疫苗株CTN181相比发生了379位L→V的突变，SCR23-052与基因Ⅴ型的参考毒株在核蛋白研究位点均一致。结论:获得了1株野生动物猪獾源基因V型狂犬病病毒株全基因组序列，不同于四川以往报道流行的犬源狂犬病病毒基因I型毒株。SCR23-052与各参考株基因组序列相比有不同程度差异，但主要毒力特征未改变。

目的:了解2018—2019年河北省流感流行特征，分析乙型流感病毒Victoria（BV）系毒株血凝素（HA）基因特征和变异情况。方法:于2018年4月至2019年3月，在河北省28所国家级哨点医院采集发热3 d内的流感样病例（ILI）咽拭子标本，同时通过“中国流感监测信息系统”收集2018—2019年河北省ILI的监测数据。对ILI的咽拭子标本进行核酸检测、病毒分离，并选取不同地区的14株BV毒株进行HA基因测序，利用DNASTAR 7.0和Mega-X软件分析HA基因序列特征并构建进化树。 结果:2018—2019年，河北省28所国家级流感监测哨点医院共监测门、急诊病例总数为4 689 103例，ILI例数为 99 266例（2.12%）；共检测ILI样本18 730份，流感病毒核酸阳性2 752份（14.69%），检出高峰在2019年第3周（44.92%），流行前期以甲型H1N1为主，流行后期以BV为主。HA基因序列分析显示14株BV病毒均属于162-164位氨基酸缺失株，氨基酸同源性为97.16%~100%，与疫苗株B/Colorado/06/2017相比氨基酸同源性为97.16%~98.95%，涉及11个氨基酸位点突变。结论:2018—2019年河北省流感冬、春季流行，BV流行毒株有多个抗原位点发生了变异，可能是引起暴发疫情的原因。

目的:探讨ADU-S100/多柔比星原位疫苗在弥漫大B细胞淋巴瘤中的抗肿瘤作用及相关机制。方法:选择6周龄雌性BALB/c小鼠，采用小鼠B细胞淋巴瘤A20细胞株构建小鼠B细胞淋巴瘤双侧皮下肿瘤模型，采用随机数字表法将皮下荷瘤小鼠随机分为未治疗组（不接受任何治疗）、ADU-S100原位疫苗治疗组（瘤内注射干扰素基因刺激因子激动剂ADU-S100）、多柔比星原位疫苗治疗组（瘤内注射多柔比星）和ADU-S100/多柔比星原位疫苗治疗组（瘤内注射ADU-S100+多柔比星），每组5只。将荷瘤小鼠右侧肿瘤定义为近端肿瘤，左侧肿瘤定义为远端肿瘤，仅对近端肿瘤进行瘤内药物注射治疗，远端肿瘤不处理。肿瘤接种后第23天，采用流式细胞术检测各组小鼠脾脏中CD11c +树突细胞（DC）、CD8 + CD11c + DC和CD80 + CD11c + DC亚群的比例。采用A20肿瘤细胞裂解物体外刺激各组小鼠的脾细胞，应用流式细胞术检测各原位疫苗治疗组CD8 + T细胞中5'-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷阳性（EdU +）细胞和肿瘤坏死因子α阳性（TNF-α +）细胞的比例，并使用乳酸脱氢酶（LDH）细胞毒性检测试剂盒测定各组细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的杀伤效应。在接种肿瘤后第7、12、17天通过腹腔注射抗小鼠CD8α（clone 53-6.7）抗体或同型对照抗体清除ADU-S100/多柔比星原位疫苗治疗小鼠体内的CD8 +细胞。肿瘤接种后第23天，测量ADU-S100/多柔比星原位疫苗联合抗小鼠CD8α（clone 53-6.7）抗体或同型对照抗体处理组小鼠近端和远端肿瘤体积，并采用流式细胞术检测两组小鼠脾脏中CD8 + T细胞和CD8 + CD11c + DC的比例，免疫组织化学染色法检测两组小鼠肿瘤组织中浸润的CD8 + T细胞。 结果:在肿瘤接种后第11、14、17、20、23天，各治疗组小鼠的近端肿瘤、远端肿瘤体积均低于未治疗组小鼠（均 P<0.05）。未治疗组、ADU-S100原位疫苗治疗组、多柔比星原位疫苗治疗组和ADU-S100/多柔比星原位疫苗治疗组小鼠脾脏中募集的CD11c + DC亚群比例分别为（4.92±0.63）%、（7.54±0.84）%、（7.45±0.86）%和（11.63±0.85）%，差异有统计学意义（ F＝72.30， P<0.001）；CD8 + CD11c + DC亚群比例分别为（1.36±0.34）%、（4.02±0.43）%、（4.22±0.61）%和（6.11±0.73）%，差异有统计学意义（ F＝76.09， P<0.001）；CD80 + CD11c + DC亚群比例分别为（0.51±0.24）%、（1.69±0.23）%、（1.82±0.25）%和（4.09±0.39）%，差异有统计学意义（ F＝167.40， P<0.001）。各原位疫苗治疗组的CTL杀伤效应以及CD8 + T细胞中EdU +细胞和TNF-α +细胞的比例均高于未治疗组（均 P<0.05），ADU-S100/多柔比星原位疫苗治疗组的CTL杀伤效应以及CD8 + T细胞中EdU +细胞和TNF-α +细胞的比例均高于ADU-S100原位疫苗治疗组和多柔比星原位疫苗治疗组（均 P<0.05）。ADU-S100/多柔比星原位疫苗+抗小鼠CD8α抗体处理组小鼠脾脏中CD8 + T细胞和CD8 + CD11c + DC细胞的比例均低于ADU-S100/多柔比星原位疫苗+同型对照抗体处理组（均 P<0.05），ADU-S100/多柔比星原位疫苗+抗小鼠CD8α抗体处理组小鼠近端和远端肿瘤体积均大于ADU-S100/多柔比星原位疫苗+同型对照抗体处理组（均 P<0.05）。 结论:ADU-S100/多柔比星原位疫苗可抑制小鼠B细胞淋巴瘤双侧皮下肿瘤模型中近端肿瘤的生长，并可产生能够部分抑制远端肿瘤生长的全身性抗肿瘤免疫效应，ADU-S100/多柔比星原位疫苗可能通过CD8 + CD11c + DC介导的CD8 + T细胞免疫应答发挥抗肿瘤免疫效应。

目的:了解2020年福州市哨点医院5岁以下腹泻住院儿童粪便样本中A组轮状病毒(group A rotavirus, RVA)的基因组特征。方法:通过ELISA对腹泻住院儿童粪便样本进行RVA筛查，采用RT-PCR方法扩增RVA阳性样本的11个基因节段并进行Illumina二代测序，使用MEGA等生物学软件对重要基因片段进行序列分析和抗原位点分析。结果:成功获得20株RVA全基因组序列，包括4种G/P基因组合G9P[8](55%)、G3P[8](25%)、G8P[8](15%)以及G2P[4](5%)，全基因组中DS-1-like重配株比例占40%(8/20)。相同型别的RVA序列同源性高，且与现今世界流行的毒株亲缘关系近。VP7、VP4和NSP4片段氨基酸位点变异情况复杂，重要抗原位点存在多处氨基酸变异情况发生。结论:在福州地区首次检测到G3P[8]型和G8P[8]型DS-1-like重配株，VP7、VP4和NSP4片段抗原位点上存在变异。鉴于不常见DS-1-like重配株的检出和多个重要抗原位点变异现象的出现，有必要对RVA全基因组特征进行持续监测，为疫情防控和疫苗的免疫策略提供科学依据。

分析新型冠状病毒疫情（新冠疫情）大流行期间广州市H3N2流感病毒分子变异特征。收集流感监测哨点医院流感样病例样本，进行病毒分离和全基因组高通量测序。结果显示，新冠疫情大流行期间广州市在2022年第二季度出现了一次H3N2流感流行高峰（阳性率为52.23%），流行强度和持续时间均高于2019年H3N2流感流行期。2022年流行株HA基因和NA基因均属于3C.2a1b.2a.1a.1分支，与2019年冬季的H3N2流行株进化分支（Group-3 毒株3C.2a1b.1a）不同。2022年流行株抗原位点变异主要发生在C区I48T位，HA蛋白受体结合位点与疫苗株一致。大部分流行株在HA蛋白上带有13个糖基化位点，一起暴发疫情分离株发生24-NST处糖基化位点的缺失。综上，新冠疫情大流行期间，引起广州市2022年H3N2流感流行的病毒株属于新衍生进化分支，进化起源上并非由2019年广州市毒株直接传播进化而来。

目的:对广州市2019年不同来源的H3N2流感病毒进行基因测序，分析H3N2流感病毒的进化变异特点。方法:对广州市2019年门诊监测、暴发疫情、住院重症病例等不同标本来源的H3N2流感病毒进行分离并对其血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）基因进行测序，运用DNA Star 7.1、Mega 6.0软件分析病毒的变异和进化特点。结果:2019年广州市H3N2流感表现为流行期Ⅰ（2019年1-8月）和流行期Ⅱ（2019年11-12月）2个流行高峰。男性和女性的H3N2流感病毒阳性率分别为13.46%（703/5 221）和11.50%（510/4 435），差异有统计学意义（ χ 2=8.43， P=0.00）。10~20岁年龄组H3N2流感病毒阳性率最高（25.18%，665/2 641），各年龄组阳性率差异有统计学意义。测序发现，不同标本来源的毒株高度同源，亲缘关系相近，属于3C.2a.1分支。根据流行时间和进化特点，进一步划分为Group 1~3共3个小进化分支，Group 1分支流行于流行期Ⅰ、Group 3分支流行于流行期Ⅱ，Group 2分支为2个流行期过度的进化分支，流行期Ⅱ的病毒由流行期Ⅰ的病毒进化而来，且不同分支存在基因重组的现象。在疫苗选择压力下，Group 1~3分支逐渐出现HA抗原位点突变，导致新的抗原漂移。HA抗原位点变异主要发生A和B区，Group 1分支和Group 3分支受体结合位点变异发生在前壁和后壁，Group 2~3分支在HA抗原位点A区缺失2个糖基化位点。 结论:2019年广州市H3N2流感病毒的遗传变异包括位点突变和基因重组。在疫苗免疫压力下H3N2流感病毒发生快速的进化变异，抗原位点变异逐渐累积，进而出现新的抗原漂移。应对H3N2流感病毒分子流行特点进行持续监测。

本期无重点号。专家观点《鼻咽癌外科治疗专家共识》，收集了来自全国32个省、自治区、直辖市以及特别行政区医疗单位的1 096份专业人员调查问卷，参与调查的专家包括耳鼻咽喉科、鼻颅底外科、头颈肿瘤科、放疗科和肿瘤内科。内容包括原位复发鼻咽癌的外科治疗、初治鼻咽癌的外科治疗、鼻咽癌放疗后遗症的外科治疗、复发区域淋巴结的外科治疗以及特殊病理类型鼻咽癌的外科治疗。论著《颈静脉孔区软骨肉瘤的诊断与手术治疗》通过回顾分析15例颈静脉孔区软骨肉瘤患者的临床资料，认为症状和体征缺乏特异性，其影像学特点有助于鉴别诊断，最终确诊依靠病理检查。外科手术是首选的治疗方法，伴有面神经麻痹患者应尽早手术切除肿瘤并积极修复面神经。并提出软骨肉瘤术后有复发风险，患者应接受长期随访。论著《平阳霉素纤维蛋白胶复合剂与平阳霉素地塞米松复合剂治疗咽喉部静脉畸形的疗效比较》，研究认为两者均是治疗咽喉部静脉畸形安全有效的复合硬化剂，但对于较大体积的病变，平阳霉素纤维蛋白胶复合剂治愈率更高且治疗次数更少。论著《行手术为主导治疗模式的456例下咽癌疗效分析》总结456例行手术为主综合治疗的原发下咽癌患者资料，认为通过对下咽癌的术前评估、手术切除与修复方式的改进、主动的咽后淋巴清扫及第二原发癌的全程干预，可提高下咽癌的疗效。论著《下行性坏死性纵隔炎临床诊疗及预后分析》总结得出下行性坏死性纵隔炎罕见、病死率高，感染性休克、降钙素原与急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ评分增高、合并糖尿病、冠心病是下行性坏死性纵隔炎患者预后不良的因素。尽早切开引流与持续负压封闭引流技术联合使用是一种较好的治疗方法。论著《咽喉反流患者唾液菌群初步研究》发现咽喉反流患者唾液菌群发生变化，出现菌群失调，可能与咽喉反流的发生发展相关。流行病学调查《新型冠状病毒Omicron株感染后嗅觉和味觉障碍的发病率和预后：35 566份中国多中心大规模调查数据分析》得出，①女性、有吸烟史的患者感染新型冠状病毒后更易发生嗅觉味觉障碍；②接种4针疫苗、有饮酒史的患者感染新型冠状病毒后更不容易发生嗅觉味觉障碍；③新型冠状病毒感染后嗅觉味觉功能多数在一定程度上自发改善，但短期内未能恢复至原有水平，少数可能长期存在；④男性、接种2针和3针疫苗、无吸烟史、无持续的伴随症状、既往有头面部外伤史以及有鼻腔口腔健康问题的患者更易恢复嗅觉味觉功能。新技术新材料《联合听觉监测技术在前庭神经鞘瘤切除术中的初步应用》发现前庭神经鞘瘤切除术中联合应用电诱发听性脑干反应、脑干听觉诱发电位和蜗神经复合动作电位监测，有助于提高患者术后蜗神经解剖及听力保留率。短篇论著《免注气经下唇前庭入路机器人甲状腺手术初步经验》认为采用悬吊法进行免注气经下唇前庭入路机器人甲状腺手术安全、可行，术后美观效果好，可为部分经选择的甲状腺肿瘤患者提供新的治疗选择。国外研究进展《中、美、德三国突发性聋诊疗指南的解读与分析》指出三国关于突发性聋的分型和治疗存在差异，文章对三国指南的最新版本进行解读和比较，为国内同仁进一步修订指南和开展临床实践提供参考。

目的:对南京地区2014—2016年流行的甲型H3N2型流感病毒血凝素(hemagglutintin，HA)基因进行测序和分析，掌握HA基因的位点突变和遗传进化特征。方法:于2014—2016年流感监测样本H3N2型流感病毒阳性标本中，根据时间段随机选取27株，MDCK细胞进行病毒分离和纯化，吸取病毒培养液提取病毒RNA，反转录-聚合酶链反应(reverse transcritase polymerase chain reaction，RT-PCR)扩增病毒HA基因全长并测序，掌握HA序列特征，对其遗传进化特点、重要功能位点进行详细分析。结果:27株H3N2型流感毒株HA基因核苷酸长度为1 701 bp，编码566个氨基酸；与同年WHO推荐疫苗株序列同源性高达97.9-99.5%。进化分析表明，2014-2016年南京流行株在进化树上分属两个分支，实现了从3C.3a到3C.2a基因型的转变，目前以3C.2a基因型流行为主；不同年份的南京分离株多个抗原表位上的氨基酸发生了变异。结论:2014—2016年南京地区H3N2亚型流感病毒流行株与疫苗株同源性高，疫苗可以产生良好的保护作用；HA基因抗原位点变异快，分子遗传进化活跃，有必要对病毒HA基因的分子特征进行持续监测，为下一个流感病毒流行季H3N2型的防控做好准备。