背景:Ⅰ型胶原蛋白的免疫原性主要分布在分子链的端肽区域,可在胶原蛋白提取过程中通过水解或是去除而使其失活,制备去端肽Ⅰ型胶原蛋白,降低其免疫原性.目的:评价去端肽Ⅰ型胶原蛋白的免疫原性.方法:采用酶切、盐析、透析工艺制备去端肽Ⅰ型胶原蛋白,通过考马斯亮蓝对牛血清白蛋白染色极限的分析,鉴定去端肽Ⅰ型胶原蛋白的纯度,依据YY/T 0606.25-2014中规定的方法,利用Quant-IT PicoGreen dsDNA Reagent and Kits试剂盒测定去端肽Ⅰ型胶原蛋白的DNA残留量,利用ELISA试剂盒分析去端肽Ⅰ 型胶原蛋白的端肽去除效果,依据YY/T 1561-2017标准检测去端肽Ⅰ型胶原蛋白的α-Gal抗原含量.结果与结论:去端肽Ⅰ型胶原蛋白的纯度可达99.8％,DNA残留量为4μg/g,C、N末端肽浓度低于试剂盒检测限,α-Gal抗原含量低于检测限.通过酶切、盐析、透析工艺制备的去端肽Ⅰ型胶原蛋白,可显著去除天然胶原蛋白的免疫原性根源,有效控制胶原蛋白临床应用的免疫原性风险.

目的 探究补肾中药对去势大鼠雌性激素、骨代谢及破骨细胞活性的影响.方法 选取雌性SD大鼠40只,建立骨质疏松模型,分为假手术组、模型组、补肾中药组、密钙息组,10只/组.各组对应给予生理盐水、补肾中药、密钙息注射液治疗3个月.检测各组大鼠血清钙(Ca)、磷(P)、碱性磷酸酶(ALP)含量;用ELISA法检测血清雌二醇(E2)、骨钙素(BGP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP5b)、Ⅰ型胶原C端肽(CTX)、羟赖氨酸糖苷(GHYL)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)、NF-KB受体激活蛋白配体(RANKL);检测腰椎骨密度(BMD)及最大承载力.结果 与模型组比较,补肾中药组大鼠血清Ca、P下降,E2升高,骨形成指标ALP、BGP升高,胶原蛋白的分解产物CTX、GHYL升高,破骨细胞分泌的TRAP5b也升高,炎症因子TNF-α、IL-17、NF-κB水平均降低,腰椎BMD及最大承载力上升,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 补肾中药能通过提升去势大鼠雌激素水平,改善骨代谢,增加骨量,抑制炎症反应及破骨细胞活性,达到防治骨质疏松的效果.

目的 探讨虾青素能否防治去卵巢糖尿病大鼠的骨质流失以及可能的机制.方法 3月龄雌性SD大鼠分为3组(每组6只):对照组CON(假手术),模型组OVX/T1DM(去卵巢糖尿病大鼠),药物组OVX/T1DM-ASX(去卵巢糖尿病大鼠,给予虾青素100 mg/(kg·d).结果 连续治疗60 d后,与OVX/T1DM组相比,OVX/T1DM-ASX组骨密度(BMD)明显升高(P<0.01),血清I型胶原蛋白(CTX-1)、骨钙素、I型前胶原蛋白n端前肽(PINP)、抗酒石酸磷酸酶5b(TRACP 5b)水平均显著升高(P<0.01).虾青素治疗能抑制去卵巢糖尿病大鼠骨组织形态学的改变,减少骨髓脂肪细胞增加,提高OPG/RANKL的比值.结论 虾青素对绝经后糖尿病骨质流失有保护作用,这种作用与调控OPG/RANKL轴有关.

目的:评价去端肽胶原对下颌第三磨牙拔除后邻牙远中骨缺损再生的临床效果.方法:选择2019年1月—2019年7月就诊于山西医科大学口腔医院颌面外科的双侧下颌第三磨牙均为水平中位阻生的患者32例,采用第二磨牙颊侧龈沟内结合远中颊侧切口、不去骨的方法拔除双侧下颌第三磨牙后,随机选择一侧作为实验组,拔牙窝植入去端肽胶原;另一侧作为对照组,常规植入胶质银明胶海绵.拔牙术前、术后3个月和6个月,测量第二磨牙远中颊侧探诊深度,术后3个月、6个月拍摄锥形束CT(cone-beam CT,CBCT),测量第二磨牙远中成骨情况.数据采用SPSS 24.0软件包进行统计学分析.结果:去端肽胶原组和自然愈合组术后3个月和6个月第二磨牙远中牙周探诊深度较术前均有所降低,但是组间差异无统计学意义(P>0.05);术后3个月和6个月,去端肽胶原组第二磨牙远中新生骨高度和骨密度均显著大于自然愈合组(P<0.001);术后3个月,去端肽胶原组新生骨的体积显著大于自然愈合组(P<0.05),但术后6个月,2组间新生骨的体积差异无统计学意义(P>0.05).结论:去端肽胶原有利于下颌第三磨牙拔除后第二磨牙远中骨缺损的重建和修复.

背景:自动物体提取胶原蛋白并经冻干工艺得到胶原蛋白海绵,可赋予材料良好的临床止血性能,同时可实现在机体中的自身降解,但所提取的胶原蛋白也存在携带病毒及体内免疫原性风险.经过酸酶结合工艺处理去除胶原端肽、并灭活病毒,实现材料良好的生物安全性.目的:规模化生产制备胶原蛋白海绵,并对其进行免疫原性及病毒灭活有效性的整体生物安全性评价.方法:通过酸酶结合法从牛跟腱中提取胶原蛋白,经冷冻干燥工艺得到胶原蛋白止血海绵.将1,4片胶原蛋白海绵分别埋植于Wistar大鼠腹部皮下,埋植1,4,8,12周后对大鼠体征、血常规、T淋巴细胞增殖、免疫球蛋白含量等指标进行检测.取3批次的牛跟腱粉碎后中间体样品,分别浸泡于伪狂犬病毒、水泡性口炎病毒、猪细小病毒和猪脑心肌炎病毒液中,检验酸酶结合法处理的胶原蛋白海绵对病毒灭活的有效性.结果 与结论:①于无菌车间规模化提取胶原蛋白,经冷冻干燥后得到胶原蛋白海绵,并完成内外包装和辐照灭菌的生产全过程;②埋植1,4片胶原蛋白海绵大鼠的生理体征、血常规、NK细胞杀伤活性、T淋巴细胞增殖状态及免疫球蛋白含量等指标均表现正常;③酸酶法工艺灭活的3批次牛跟腱粉碎后中间体样品均无可以检测到的病毒,可使病毒滴度下降4个logs以上;同时,对未能检测到的病毒滴度样品进行了敏感细胞接种盲传3代,结果未显示细胞病变;④免疫原性和病毒灭活检测表明,所制备的胶原蛋白止血海绵有着良好的生物安全性.