目的:探讨黄芩茎叶黄酮(SSF)对冈田酸(OA)引起的大鼠脑内双螺旋细丝(PHF)异常生成的抑制作用及其对蛋白磷酸酶(PP)的调节机制.方法:雄性SD大鼠,采用侧脑室注射OA(200 ng/kg)建立记忆障碍模型,Morris水迷宫进行记忆障碍模型筛选,取造模成功大鼠每日分别灌胃25、50和100 mg/kg SSF,连续36 d.Western blot法测定大鼠皮层与海马组织中PHF、PP1、PP2A-Cα、PP2A-Cβ、PP2CA和PP2CB的蛋白表达,以银杏叶黄酮作为阳性对照药.结果:与假手术组大鼠相比,模型组大鼠皮层与海马中PHF的蛋白表达明显增加(P<0.01),皮层与海马组织中PP2A-Cα和PP2A-Cβ及海马组织中PP2CB蛋白表达明显降低(P<0.05),皮层中PP2CA和PP2CB的蛋白表达明显增加(P<0.01),皮层中PP1的蛋白表达明显降低(P<0.01).与模型大鼠比较,灌胃25、50和100 mg/kg SSF 36 d不同程度地逆转了OA所致大鼠皮层与海马组织中PHF、PP2A-Cα和PP2A-Cβ及皮层中PP1的蛋白表达异常,对PP2CA和PP2CB蛋白表达无显著性影响,银杏叶黄酮也表现出与SSF相似的结果.结论:SSF能够明显抑制OA引起的大鼠脑内PHF异常生成,该作用可能与SSF调节大脑皮层和海马组织中PP1、PP2A-Cα和PP2A-Cβ的蛋白表达有关,而与调节PP2CA和PP2CB的关系较小.

目的:观察电针对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马区自噬相关蛋白表达的影响,从神经元自噬的角度探讨电针"百会""肾俞"穴治疗AD的机制.方法:SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、电针组和假电针组,每组12只.除空白对照组外,其余各组予D-半乳糖连续腹腔注射6周建立A D大鼠模型.电针组大鼠于每日腹腔注射后给予电针"百会""肾俞"穴,假电针组仅刺入"百会""肾俞"穴区皮肤且电针仪不通电,每次20 min,1次/d,共6周.干预结束后,采用Morris水迷宫和开放旷场实验评估各组大鼠的学习记忆和认知能力,透射电镜观察海马区突触数密度,用免疫组织化学染色法观察海马区双螺旋细丝蛋白-1(PHF-1)表达水平,用Western blot法检测海马区自噬相关蛋白磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的相对表达量.结果:与空白对照组比较,模型组大鼠第2天至第5天逃避潜伏期增长,经过原平台象限时间比率减小(P<0.01),旷场实验运动距离、直立次数、中心区域运动时间比率均减少(P<0.01),海马区突触数密度降低(P<0.01),PHF-1的阳性表达及PI3K、AKT、p-AKT、mTOR相对表达量均增加(P<0.01).与模型组和假电针组比较,电针组大鼠第2天至第5天逃避潜伏期缩短,经过原平台象限时间比率升高(P<0.01),旷场实验运动距离、直立次数、中心区域运动时间比率,以及海马区突触密度增高(P<0.01),PHF-1的阳性表达及PI3K、AKT、p-AKT、mTOR相对表达量均减少(P<0.01).与模型组比较,假电针组PI3K表达降低(P<0.05).结论:电针能改善AD样大鼠的学习记忆和认知障碍,其机制可能是与调控PI3K/AKT/mTOR信号通路,诱导自噬,促进神经原纤维缠结清除有关.

应用生物素-11-dUTP制备了钩端螺旋体（钩体）黄疸出血群赖型017株DNA探针，用打点杂交法检测了钩体DNA。发现生物素标记的黄疸出血群赖型017株DNA探针能识别致病钩体黄疸出血群（56601株），澳洲群（56607株）及七日热群（56610株），最小识别量为10pg；017株探针不能识别非致病的双曲钩体patoc型Patoc I株和细丝体属illini细丝体3055株DNA；钩体DNA探针不与大肠杆菌DNA杂交；钩体DNA探针与人白细胞DNA亦无杂交信号。结果表明应用生物素-11-dUTP标记的钩体DNA探针具有较好的特异性和敏感性，问号钩体和双曲钩体，细丝体属钩体DNA同源性较小。因而生物素标记的DNA探针可用于检测钩体，亦有可能应用于钩体病的早期诊断和流行病学调查。