目的:明确1个多发性骨骺发育不良(MED)家系的基因变异及遗传学病因。方法:选取2020年9月13日于首都医科大学附属北京积水潭医院就诊的1个MED家系作为研究对象。收集该家系的临床资料，采集家系成员的外周血样，提取基因组DNA。对先证者进行全外显子组测序(WES)和生物信息学分析，确定变异位点，并通过Sanger测序法进行家系验证。分别构建 SLC26A2基因野生型和变异型表达质粒，瞬时转染人原代软骨细胞，应用免疫荧光技术与CCK8试剂检测变异对于蛋白定位和细胞增殖的影响。 结果:WES与PCR-Sanger检测发现先证者携带 SLC26A2基因复合杂合变异：c.484G>T(p.Val162Leu)和c.485_486delTG(p.Val162Glyfs*12)，分别遗传自其父亲与母亲。免疫荧光检测结果显示变异型SLC26A2 Val162Leu和SLC26A2 Val162Glyfs*12蛋白在人原代软骨细胞的细胞核和细胞质中均有分布，细胞增殖检测结果显示变异型SLC26A2 Val162Leu和SLC26A2 Val162Glyfs*12蛋白均能减少人原代软骨细胞的增殖。 结论:SLC26A2基因c.484G>T和c.485_486delTG变异均可影响人原代软骨细胞的增殖，可能是导致先证者患MED的遗传学病因。

目的:探讨股骨近端外展截骨治疗儿童股骨颈骨折不愈合的治疗效果。方法:回顾性分析北京积水潭医院小儿骨科2003年1月至2018年1月间收治的股骨颈骨折不愈合19例患儿的临床资料。其中，男13例，女6例；年龄(10.0±3.0)岁。术前已经过1～2次手术治疗15例；因多发创伤后漏诊2例；经长期牵引、外固定保守治疗后骨折仍不愈合2例。合并股骨头缺血坏死15例。记录患儿骨折分型、治疗经过、术中操作、术后愈合时间及并发症，并对手术前后股骨颈干角、Pauwel角变化进行对比分析。结果:全部19例患儿经股骨近端外展截骨治疗后均达到骨折愈合。合并骨质缺损4例，采用自体或异体骨移植治疗。术后愈合时间为(8.2±2.4)个月。本组术前颈干角和Pauwel角分别为110.3°±18.8°和56.4°±12.0°，术后颈干角和Pauwel角分别为142.3°±12.6°和25.3°±5.9°，组间比较，颈干角差异有统计学意义( P<0.05)。相关性检验显示，年龄(外展截骨手术时)与骨折不愈合无显著相关，而Garden分型和Delbet分型均与骨折不愈合相关( P＝0.039和0.001)。术后发生下肢机械轴外移5例，1例采用股骨远端外侧骺阻滞治疗，其余4例观察；内固定断裂1例，再次手术治疗；切口浅表感染1例，换药后愈合。双下肢不等长15例，未行进一步治疗。股骨近端骨骺早闭8例、股骨颈短颈畸形4例、继发股骨头骺滑脱2例，随访至股骨近端骨骺闭合未进一步加重，未行进一步治疗。继发髋臼发育不良2例，目前随访观察中。 结论:儿童股骨颈骨折不愈合治疗困难，并发症多。股骨近端外展截骨可以改变骨折线应力方向，增加骨折端压应力，有效治疗儿童股骨颈骨折不愈合。

目的:分析同患两种罕见遗传病患儿的临床特征。方法:回顾性分析2021年1月至2022年2月北京大学第一医院确诊的同患两种罕见遗传病的患儿病例资料，总结其临床及遗传学特征。结果:9例患儿中男6例、女3例，末次就诊或随访年龄为5.0（2.7，6.8）岁，主要临床表现包括运动发育落后、智力发育落后、表观畸形、骨骼异常等。例1~4均为男性，表现为步态异常、跑跳差，血清肌酸激酶明显增高，遗传学分析证实为DMD基因致病性变异所致的Duchenne型或Becker型肌营养不良，同患另1种遗传病，分别为原发性肥大性骨关节病、脊髓性肌萎缩症、脆性X综合征、脑海绵状血管瘤3型。例5~9分别为COL9A1基因相关多发性骨骺发育不良6型和NF1基因相关神经纤维瘤病Ⅰ型，COL6A3基因相关Bethlem肌病和WNT1基因相关成骨不全症ⅩⅤ型，Turner综合征（45，X0/46，XX嵌合体）和TH基因相关Segawa综合征，22q11.2微重复综合征和DYNC1H1基因相关常染色体显性遗传下肢受累脊髓性肌萎缩症1型，ANKRD11基因相关KBG综合征与IRF2BPL基因相关神经发育障碍伴倒退、运动异常、语言丧失和癫痫。Duchenne型肌营养不良最多见，6种常染色体显性遗传病为新生杂合致病性变异所致。结论:存在两种罕见遗传病的患儿临床表型复杂，当患儿临床特征及病情变化不能用一种罕见遗传病解释时，需考虑可能同时存在其他罕见遗传病，并注意新生致病性变异所致的常染色体显性遗传病。基于核心家系的全外显子组测序联合多种分子遗传学检测有助于遗传病的精准诊断。

目的 应用靶向捕获二代测序技术检测原因不明矮小症致病基因,并分析其与临床表型的相关性.方法 收集2007年至2015年在上海交通大学医学院附属瑞金医院儿内科就诊的临床诊断为原因不明矮小症77例患儿的临床资料.制备包括与生长相关的187个基因编码区序列的基因panel,对77例患儿进行二代测序,根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)指南评判变异位点,筛选出致病基因,并通过Sanger测序验证,分析患儿基因型和临床表型相关性.结果 检测到5例存在致病性变异;1例存在可能致病性变异;1例变异意义不明确.这7种变异均为杂合.1例ACAN基因存在致病性变异p.D2407fs,表现为矮小及骨龄偏大;3例发现PTPN11基因存在已知致病性变异,分别为p.A72G、p.I282V和p.P491S,确诊为Noonan综合征;1例COL2A1基因存在已知致病性变异p.R904C,确诊为Stickler综合征;l例COMP基因存在可能致病性变异p.D401N,可造成多发性骨骺发育不良;1例为家族性矮小患儿,发现GHSR基因新发杂合变异p.S289Y,其骨龄发育落后,基因型与临床表型一致,目前评判意义不明确.结论 发现ACAN基因杂合缺陷与骨龄发育超前的特发性矮小相关.COMP基因p.D401N变异,可能与多发性骨骺发育不良有关.GHSR基因新发杂合变异p.S289Y,可能导致矮小,须进一步功能实验验证.

目的 分析下肢成角畸形患儿采用8字板骺阻滞术治疗无效的原因.方法 收集采用8字板骺阻滞术治疗无效的下肢成角畸形患儿61例,回顾性分析其临床资料,分析8字板骺阻滞术治疗无效的原因.结果 本组患儿8字板骺阻滞术后随访12~95个月,平均46个月.6例患儿术后畸形有轻微改善,49例患儿术后畸形无明显变化.6例患儿更换过1次8字板,3例患儿更换过2次8字板.61例患儿最终取出8字板改行截骨矫形手术治疗残留的成角畸形.治疗无效的原因有以下几种情况:①31例(50.8%)骺早闭患儿治疗年龄偏大,行骺开放术后残留骺板生长能力差,不足以矫正成角畸形.②19例(31.1%)骺板为病态骺板、生长潜力小,包括多发内生软骨瘤病6例、多发骨骺发育不良6例、多发骨软骨瘤病1例、软骨发育不良4例、Blount病2例.③6例(9.8%)成角畸形大,包括多发内生软骨瘤病3例、Blount病3例.④5例(8.2%)残留骨干部位成角畸形,包括多发内生软骨瘤病3例、低磷性佝偻病2例.结论 8字板骺阻滞术治疗儿童下肢干骺端成角畸形无效的原因主要是骺开放术后残留骺板生长能力差、病态骺板所致的骺板生长潜力小、成角畸形大和畸形部位混杂等,对于此类患儿应慎重选择8字板骺阻滞术.

患儿男,因“生后呼吸困难18h”转入,系第1胎第1产,胎龄39周选择性剖宫产,出生体重3100 g,无窒息,羊水、脐带、胎盘无异常,生后不久出现呼吸促、皮肤发绀,不伴发热、抽搐等.查体:T 36.7℃,P 157次/min,R 62次/min,BP55/36mmHg.反应差,全身皮肤发绀,扁平脸,鼻梁平,高腭弓.三凹征阳性,双肺呼吸音粗,心前区可闻及Ⅱ/6级收缩期杂音,腹部无明显异常.四肢肌张力稍低.父母体健,母孕期无异常,否认家族遗传病史.实验室检查:肌酸激酶1045.5 U/L,肌酸激酶同工酶77.0 U/L,血常规、免疫球蛋白、血氨、甲状腺功能、凝血功能、TORCH均未见异常.染色体核型分析:46,XY.X线片:肘关节、髋关节、踝关节、脊柱、肩胛骨及股骨骨骺区域可见多发点状高密度影(图1).

患儿,女,1个月29 d.因抽搐6d、发现血糖增高5d入院.血糖波动于正常或增高,糖化血红蛋白因过高无法检测,尿糖+～++++,空腹C肽0.19 ng/mL,胰岛素11.68 μIU/mL.遗传性内分泌疾病基因Panel(检测基因412个,包含已知糖尿病相关基因49个)高通量测序发现患儿EIF2AK3基因存在新发c.2731_2732delAG和c.2980G＞A复合杂合突变,均位于基因的激酶结构域.该婴儿被确诊为Wolcott-Rallison综合征(WRS).WRS是一种罕见的常染色体隐性遗传疾病,以新生儿糖尿病、多发性骨骺发育不良和肝脏疾病为特征,新生儿糖尿病是WRS诊断的必备条件,EIF2AK3基因是WRS的致病基因.

目的 对1例多发性骨骺发育不良的患者进行临床及遗传学分析.方法 对以踝关节疼痛起病的多发性骨骺发育不良患者的临床资料进行分析.应用二代测序技术对患儿的基因组DNA进行测序分析,对疑似致病变异进行Sanger测序验证,评价新发变异的致病性.结果 患儿以双脚踝疼痛、跛行起病,影像学检查疑诊为多发性骨骺发育不良.基因测序发现患儿软骨寡聚物基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)基因第10外显子存在c.1126G＞T变异,该变异为新发的错义变异,尚未见文献报道.结论 发现1例COMP基因的新发变异,可能与患儿多发性骨骺发育不良相关.

目的 通过对一个5代疑似多发性骨骺发育不良(multiple epiphyseal dysplasia,MED)的大家系(患者17例)进行临床特征分析和致病基因的筛查,为遗传咨询和产前分子诊断提供实验依据.方法 采集家系成员病史,一般体检、关节、髋部X线片资料;收集该家系外周血样,提取样本DNA,靶向基因高通量测序方法对先证者DNA临床全外显子进行测序,使用Next Gene软件对测序序列进行比对分析,并进一步利用Ingenuity软件对存在的突变进行功能注释,寻找先证者致病突变.针对可疑突变,PCR和Sanger测序对家系其他成员DNA样本进行验证.结果 该家系共5代,现存家系成员38人,系谱分析符合常染色体显性遗传特征.家系共有患者17例,其临床表现为:幼时出现走路姿势异常,后出现髋关节及膝关节疼痛,X线有典型骨骺发育不良病理改变.高通量测序及数据分析后,筛选出先证者(Ⅳ-3)软骨低聚物基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)基因c.1153G＞A(p.Asp385Asn)错义杂合突变,该突变导致其编码蛋白的第385位天冬氨酸被天冬酰胺替代.先证者家系其他成员符合基因型与表型共分离.结论 COMP基因c.1153G＞A错义杂合突变是导致该MED家系患者发病的分子机制,该突变首次在大家系中被报道,进一步明确了COMP基因c.1153G＞A突变的致病性,有利于家系患者的进一步的诊治,也为产前诊断提供了实验依据.