目的:优选头顶一颗珠总皂苷的提取工艺。方法:采用星点设计，以头顶一颗珠中的3种主要皂苷成分（重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ和偏诺皂苷元-3-O-α-L-鼠李糖基（1→4）-［O-α-L-鼠李糖基（1→2）］-O-β-D-葡萄糖苷（PRRG）的总提取率为评价指标，以乙醇浓度、料液比、提取时间为主要影响因素，在单因素试验基础上，通过多元线性回归和二项式拟合，采用效应面优化法选择头顶一颗珠总皂苷的最佳提取工艺。结果:头顶一颗珠总皂苷的最优提取工艺为：69%乙醇回流提取2次，料液比为1∶9.7，提取时间为1.9 h，二项式拟合复相关系数 r=0.966 1，提取预测值与实际值偏差4.68%。 结论:星点设计-效应面法可用于头顶一颗珠总皂苷提取工艺的优化，精密度较高，可预测性好，该法确定的最佳工艺条件下提取率较高。

文王一支笔为蛇菰科蛇菰属植物筒鞘蛇菰(Balanophora involucrate Hook.f.)的干燥全草,是土家族四大名药(文王一支笔、江边一碗水、头顶一颗珠、七叶一枝花)之一,又称鹿仙草、鸡心七、借母怀胎、观音莲、葛菌等[1].文王一支笔生长在阴湿环境,多寄生于杜鹃属植物和苦楝的根部,主要分布在湖北、湖南、广西、四川、云南等地,湖北省集中分布于恩施、武当山及神农架地区[2].

目的:对头顶一颗珠药材进行质量研究.方法:采用DNA条形码技术鉴定头顶一颗珠;基于ITS2序列鉴别头顶一颗珠药材及其混伪品;进行水分、灰分、浸出物检查;正交法优选延龄草总皂苷的最佳提取工艺.结果:DNA条形码研究获得ITS2、psbA-trnH主导单倍型;基于ITS2序列成功鉴别头顶一颗珠药材及其混伪品;延龄草总皂苷的最佳提取工艺为:70％乙醇,料液比1:12,80 ℃提取3次,每次1.5h.结论:该研究为头顶一颗珠质量标准的研究提供了参考.

目的 探索头顶一颗珠(TTM)水煎液对激活糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)诱导的阿尔茨海默病(AD)模型大鼠脑海马Tau蛋白磷酸化和突触发育的影响.方法 将♂4月龄50只SD大鼠随机均分为5组,分别为假手术组、AD模型组、TTM治疗组(低、中、高剂量组),TTM水煎液大鼠灌胃7 d,假手术组和模型组灌饮用水7 d,灌胃d 2开始Morris水迷宫训练,5 d后找出所有d 5中能在15 s内找到隐藏平台的模型组和治疗组大鼠,侧脑室注射各5μL的GF-109203X(GFX,PKC特异性抑制剂)和渥曼青霉素(wortmannin,WT,PI3K特异性抑制剂),浓度各为100μmol·L-1,假手术组同位置注射2％DMSO 10μL.24 h后行水迷宫测试.免疫印迹和免疫组化技术检测脑海马中Tau蛋白磷酸化水平,及其相关GSK-3β激酶信号通路各蛋白活性和突触相关蛋白表达水平;尼氏染色法检测海马神经元尼氏小体变化情况;高尔基染色法检测海马神经突触发育、树突棘数量及形态变化.结果 水迷宫检测发现,TTM能改善大鼠空间学习记忆障碍;免疫印迹检测显示,模型组脑海马GSK-3β活性上调,进而升高Tau蛋白多个位点磷酸化水平;而低、中剂量TTM增加PKC和Akt活性,从而抑制下游激酶GSK-3β 活性,导致Tau蛋白磷酸化水平下降.免疫组化结果显示,TTM能降低Tau蛋白磷酸化水平.免疫印迹结果还显示,TTM能提高模型大鼠脑海马突触相关蛋白Synapsin-1、Syn-aptophysin、GluR-1表达水平;尼氏染色提示AD模型鼠脑海马神经元尼氏小体数量减少,用药后明显增多.中、高剂量TTM增加模型组海马神经元树突数量、复杂性及树突棘密度.结论 TTM可有效改善GSK-3β活性升高所引起的大鼠空间认知功能障碍,其机制可能是通过作用于GSK-3β信号通路,下调GSK-3β活性,进而抑制Tau蛋白过度磷酸化,同时促进神经元和突触发育起到保护作用.

头顶一颗珠为百合科植物延龄草的根茎,具有镇静安神、活血止血、解毒等功效.本文归纳头顶一颗珠药理研究的相关文献,归纳出头顶一颗珠具有抗癌、抗炎镇痛、免疫调节、肝保护、改善心脑缺血、增强心脏功能、抗氧化、抗衰老,以及对中枢神经系统的药理作用等,以期为头顶一颗珠的研究开发及临床应用提供参考.

目的 探讨头顶一颗珠( TTM)改善冈田酸( OA)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠认知功能障碍及其作用机制.方法 将 SD大鼠随机分为 DMSO组、OA模型组、TTM 治疗组.治疗组用低、中、高剂量 TTM 水煎液分别灌胃1 周、2周.水迷宫训练后,在治疗组和模型组大鼠双侧海马注射OA(0.392 mmol·L-1)各1.5 μL,DMSO组大鼠双侧海马各注射10% DMSO 1.5 μL.注射后进行水迷宫测试,取海马和灌流取材.水迷宫测试大鼠空间学习能力;Western blot检测各组海马PP2A活性及Tau蛋白磷酸化水平;尼氏染色观察海马CA1、CA3区尼氏小体变化情况.结果 水迷宫实验表明,TTM六组大鼠逃避潜伏期短于OA组;Western blot显示高剂量 TTM 能提高 PP2A 活性,减少 Tau-PS396 和PT404表达;尼氏染色结果表明,高剂量TTM增加尼氏小体数量.后二者具有剂量依赖性.结论 TTM能提高AD大鼠脑海马PP2A活性,降低Tau蛋白磷酸化水平,增加海马区尼氏小体数量,改善其空间记忆学习能力.

目的:开展重楼饮片[性状][薄层鉴别]和[含量测定]研究,为完善2020年版《中国药典》重楼饮片质量标准提供参考.方法:采用文献总结和实际样品观察进行性状描述;采用薄层色谱法进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定市售和自制饮片中重楼皂苷I,Ⅱ,Ⅵ和Ⅶ的含量;采用UPLC法测定自制饮片中10种甾体皂苷(伪原薯蓣皂苷,重楼皂苷Ⅶ,17-羟基纤细薯蓣皂苷,重楼皂苷H,重楼皂苷Ⅵ,重楼皂苷Ⅱ,薯蓣皂苷,纤细薯蓣皂苷,重楼皂苷I和重楼皂苷V)的含量.结果:饮片外观性状上,除了色泽、质地、气味,增加直径1.0～4.5 cm的限定.薄层色谱图中正品重楼多不能检出重楼皂苷Ⅵ,伪品头顶一颗珠在相应位置斑点清晰.13批市售样品中只有5批符合现行2015年版《中国药典》规定的“重楼皂苷I,Ⅱ,Ⅵ和Ⅶ之和不低于0.6％的要求”.炮制过程软化和干燥方式对甾体皂苷含量有明显影响,以浸泡、晒干较好.结论:建议新增性状,将重楼皂苷Ⅵ从薄层鉴别删除,以重楼皂苷H替代重楼皂苷Ⅵ进行含量限度控制,规定“重楼皂苷I,Ⅱ,H和Ⅶ之和应不低于1.0％”.

目的 探讨头顶一颗珠(TTM)对D-gal所致大鼠脑衰老miR-155-3p的影响.方法 50只SD大鼠分成5组,正常对照组,D-gal组,TTM组(低、中、高).喂养6周后Morris水迷宫测试学习记忆能力后,处死大鼠,取海马,行HE和Nissl染色及8-OHdG免疫组织化学染色;q-PCR测定miR-155-3P;Western blot测Rheb、mTOR、p-mTOR和p70s6K.结果 Morris水迷宫测试D-gal组逃避潜伏期和路程长度均比正常组和TTM组长,穿越平台次数D-gal组少于正常组和TTM组(P＜0.05).D-gal组神经元排列不整齐,间隙增宽,TTM组好于D-gal组;正常组CA1区神经元尼氏小体颗粒较多,D-gal组明显减少,TTM组较模型组增多;8-OHdG与正常组相比,D-gal组明显升高(P＜0.01),TTM组明显低于D-gal组(P＜0.05);D-gal组海马miR-155-3P表达比正常组明显升高(P＜0.05),TTM组miR-155-3P表达上调得到缓解(P＜0.05);TTM上调D-gal海马组织中Rheb、p70S6K的表达,抑制mTOR.结论 D-gal所致大鼠海马中miR-155-3P表达增加,其可能机制是调控Rheb/mTOR/p70S6K通路,TTM能拮抗D-gal所致大鼠海马衰老.

目的:建立土家族药物头顶一颗珠的HPLC指纹图谱检识方法,为头顶一颗珠的质量评价提供参考.方法:以Syncronis-C18柱(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,采用乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,测定湖北省不同产地头顶一颗珠的指纹图谱,筛选其共有模式,标定共有指纹峰,并对不同产地头顶一颗珠指纹图谱进行相似度比较和主成分分析.结果:鄂产头顶一颗珠指纹图谱含23个共有峰,经相似度评价,10批次的头顶一颗珠药材与共有模式比较相似度均达到0.90以上,整体相似度较好.经主成分分析,前5个主成分的累积方差贡献率为86.93％,10批样品的综合得分在0.175-0.069之间,显示各批药材质量差异相对较小,其中,恩施市红土乡罗家乡产地药材综合得分最高,质量最好.结论:该研究建立的HPLC指纹图谱可作为头顶一颗珠药材质量鉴别依据,能有效评价鄂产头顶一颗珠药材的质量.

目的 探究头顶一颗珠提取物对人肝癌HepG2细胞抑制作用及其对基质金属蛋白酶-9(matrix metallo proteinases-9,MMP-9)、核转录因子-κB p65(nuclear factorκB p65,NF-κB p65)的表达研究.方法 多浓度头顶一颗珠正丁醇萃取物(0、6、12、24、48、96)μmol/L分别作用于人肝癌细胞株(hepatocarcinoma G2,HepG2)24小时、48小时、72小时,使用细胞增殖和毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)法,比较各组肝癌HepG2细胞的生长抑制率.多浓度头顶一颗珠正丁醇萃取物(0、3、6、12、24)μmol/L分别作用于HepG2细胞48小时后,用实时荧光定量PCR(real-timequantitative PCR,qPCR)检测MMP-9、NF-κB p65的表达水平.结果 多浓度头顶一颗珠正丁醇萃取物,与对照组比较,HepG2细胞的生长增殖均受到明显抑制(P<0.01),且呈时间和浓度依赖性;MMP-9、NF-κB p65表达水平明显降低(P<0.01),药物浓度越高,MMP-9 mRNA、NF-κB p65 mRNA表达水平越低,MMP-9、NF-κB p65 mRNA表达水平呈正相关性.结论 多浓度头顶一颗珠正丁醇萃取物能抑制人肝癌HepG2细胞增殖,且呈时间和浓度依赖性,可能通过抑制MMP-9 mRNA、NF-κB p65 mRNA的表达,从而达到抗肝癌作用.