目的:对一对ABO血型鉴定困难的双胞胎进行血清学和分子机制研究。方法:采用凝胶卡法进行血型血清学试验，序列特异性引物PCR进行 ABO基因分型，DNA直接测序和克隆测序分析 ABO基因外显子和远端转录调控区(-nt3988～-nt3645)，短串联重复序列位点分析16个位点的遗传状态。 结果:该双胞胎的红细胞与抗-A、抗-A1和抗-E均表现为2＋混合凝集， ABO基因分型和外显子测序提示为 ABO*O.01.01/ABO*O.01.02基因型，微卫星增强子序列测定提示含有A基因，短串联重复序列位点特异性检测的16个位点中9个有两个以上的单倍体存在，红细胞分群后两群表型分别为：A型，CcDEe和O型，CcDee。 结论:通过血清学和分子生物学技术展示了这对双胞胎血型嵌合体的特性。

目的 对山东省内医疗机构及血站送检的疑似ABO亚型的标本进行血清学、ABO基因测序及单倍型序列测定,分析山东省人群ABO亚型等位基因的分布和分子机制.方法 血清学检测疑似为ABO亚型的无偿献血者标本239例及临床就诊患者标本701例,共940例采用PCR-SBT方法进行ABO基因序列分析;采用单克隆测序方法检测单体型;软件分析比对测序结果,确定该标本的等位基因型.结果 分子测序发现山东省A基因亚型等位基因12种,以ABO*A2.05最为常见;B基因亚型等位基因15种,以ABO*BW.03最为常见;复合型ABO糖基转移酶基因6种,以ABO*BA.04最为常见;嵌合体血型6例.结论 山东省B亚型的数量和种类均多于A亚型;A亚型以ABO*A2.05和ABO*A3.07最为常见;B亚型以ABO*BW.03和ABO*BW.27多见;ABO*BA.04和ABO*cisAB.01等位基因是最常见的复合型ABO糖基转移酶等位基因类型.

目的 研究血型嵌合体的血清学特征分子生物学确认方法.方法 对4例医院输血科送检做ABO和RhD血型的患者,进行ABO和Rh血型鉴定、毛细管离心分离新生红细胞、吸收试验、DTT处理凝集红细胞试验,同时对患者1的血样进行分子生物学研究.结果 患者1:ABO血型为AB/B型嵌合,Rh血型为RhCE基因嵌合;患者2:Rh血型为RhD基因嵌合;患者3:ABO血型为AB/B型嵌合,Rh血型为RhD基因嵌合;患者4:ABO血型为O/B型嵌合,Rh血型为RhCE基因嵌合.结论 在血型血清学上,排除患者有近期输血史,同时又不存在使患者抗原减弱的疾病情况下,ABO和Rh血型出现混合外观现象是其主要特征,实验人员可依据此怀疑患者是有血型嵌合体的可能通过血清学和分子生物学方法进行确认.

哺乳动物的生殖,一般是由1个精子和1个卵子通过受精作用形成1个合子细胞,然后发育成1个个体.但有极少数的个体,在血液细胞或体细胞中表现出不同类型细胞的混合,即镶嵌现象,由不同基因的细胞所组成的生物体被称为嵌合体.血型嵌合体也称做血型开米拉,即TwinChimeras,是由于双生子之间的血管交叉吻合,造血细胞通过吻合的血管交换而产生的,人类血型嵌合体十分罕见.这种血型者体内有2类血型红细胞群体,定型时可出现“混合外观”现象.笔者现对工作时遇到的1例进行分析.

目的 通过对特殊病例治疗的过程及疗效,回顾相关文献,提高对伴PLZF-RARα融合基因阳性急性早幼粒细胞白血病(APL)的治疗认识.方法 采用常规化疗使疾病达到完全缓解后、序贯单倍体异基因外周造血干细胞移植的方法治疗PLZF-RARα融合基因阳性APL.结果 患者经过常规化疗后疾病达完全缓解,第一次复发于化疗缓解后序贯单倍体异基因造血干细胞移植,疾病达完全缓解,血型转化为供者血型,嵌合体达100％,无慢性排异、移植后淋巴增殖性疾病等表现,患者长期无病存活.结论 伴PLZF-RARα融合基因阳性APL可采用单倍体异基因外周造血干细胞移植,以达到治愈目的.

目的:对一例疑似血型嵌合体进行血清学及基因学鉴定.方法:采用血清学标准方法鉴定ABO血型;PCR扩增ABO基因7个外显子及其侧翼序列,通过测序分析进行基因学定型;采用凝聚胺介质和Liss-coombs卡进行交叉配血试验.结果:血清学正定型表现为抗A凝集(强度为4+),抗B呈混合凝集(±)且抗B管底部有大量红细胞.反定型显示A、B、O型细胞均不凝集.家系调查显示其父为B型,母为A型,子为O型,正反定型均一致.测序结果显示ABO基因第6、7外显子存在3个等位基因A102、B101和O02,其中O02和B101来自于其父,A102来自于其母.配血试验表明AB型悬浮红细胞配血主、次侧均无溶血、无凝集;A、B、O型悬浮红细胞配血主侧无溶血、无凝集,次侧无溶血、有凝集.结论:患者是嵌合体血型.

目的:建立改良微柱凝胶法用于嵌合体ABO血型的检测.方法:建立改良微柱凝胶法,用于检测A(或B)和O型红细胞不同比例混合红细胞与盐水试管法检测为混合外观或微柱凝胶法检测为双群现象的标本,用散在红细胞抗原验证试验验证.结果:改良微柱凝胶法混合红细胞检测限为20∶1至1∶21,10例标本2例为双群,散在红细胞抗原验证试验标本中存在2种红细胞,8例为非双群,散在红细胞抗原验证试验为均一红细胞;微柱凝胶法混合红细胞检测限为10∶1至1∶15,10例标本均为双群;盐水试管法检测10例标本6例为混合外观.结论:改良微柱凝胶法提高了混合红细胞中微量细胞的检出能很好地将嵌合体血型与抗原减弱型和ABO亚型区分开来,是一种适用于检测嵌合体血型的有效方法.

患儿女,5岁6个月,因生长迟缓、身材矮小就诊.查体:身高99.2cm(小于同龄儿童的第3百分位),体重15kg(小于同龄儿童的第3百分位),血型为O型Rh(+).神志清,精神好,身材匀称,皮肤光滑,智力正常.无特殊面容,无颈璞,无盾状胸、鸡胸,甲状腺、浅表淋巴结触及无肿大.四肢关节无畸形,外生殖器无异常.乳距无增宽,双侧乳房B1期,双侧乳核未触及,阴毛PH1期,无腋毛.超声检查结果示:子宫卵巢未见明显异常,盆腔内未见明显无回声.出生史:患儿系第一胎,孕32+4周剖宫产,出生体重1.05kg,出生身长不详,生后入保温箱治疗约2月.父亲身高176cm,血型O型Rh(+),母亲身高160cm,血型A型Rh(+).

目的 探讨ABO基因调控区增强子、启动子变异对ABO表型的影响.方法 对4名来自上海儿童医学中心血型鉴定正反不符的患儿标本,采用ABO-Rh血型确认卡(DG Gel Confirm)、中性卡(DG Gel Neutral)、抗球蛋白检测卡(DG Gel Coombs)在全自动血型检测系统上做血清学血型鉴定、抗球蛋白试验和抗体筛查,采用PCR结合直接测序法检测患儿及其中1个家系的ABO基因增强子、启动子、第1-7外显子及其邻近内含子序列.结果 4名患儿的红细胞分别与凝胶卡中抗-A、抗-B试剂反应出现弱阳性或双群现象(DP),其表型分别为ABweak、Aweak、Aweak、AweakB型.DAN测序:4名患儿基因型分别为ABO* A1.02/B.01、ABO* A1.02/O.01.02、ABO* A1.01/O.01.02、ABO*A1.02/B.01/O.01.04,同时ABO基因调控区增强子或启动子分别存在变异现象;2例为增强子微卫星拷贝数异常、其中1例伴启动子变异,2例为血型嵌合体引起增强子突变而导致的血型抗原弱表达.病例3患儿父母表型分别为A和B型,基因型分别为ABO*A1.02/O.01.01和ABO*B.01/O.01.02.结论 ABO基因调控区对ABO血型的正常表达起着非常重要的作用,增强子异常或启动子的变异将导致ABO血型抗原的表达减弱;检测增强子序列也可以发现可能存在的ABO血型嵌合体.

报告应用胎儿造血组织移植，三次移植中一次因血型不符，发生意外，其余二次无不良反应，有一例效果满意，肯定形成红细胞嵌合体。作者认为胎儿造血组织移植工作值得开展但操作规程必须严格。