目的 检测Ki-67及异柠檬酸脱氢酶-R132H(IDH1-R132H)在中枢神经系统胶质瘤细胞中的表达情况,进一步探讨其临床价值.方法 收集手术切除并经病理确诊的脑胶质瘤患者41例为研究对象,取同期因颅脑外伤及自发性颅内出血行血肿清除开颅手术而获取的正常脑组织13例作空白对照.免疫组化法检测并比较Ki-67及IDH1-R132H在神经胶质瘤及对照组中蛋白表达情况.结果 Ki-67在Ⅲ～Ⅳ级中的阳性率(93.7％)明显高于Ⅰ～Ⅱ级肿瘤组织(45.4％),两组差异有统计学意义(x2=11.748,P＜0.05),在正常脑组织中表达为阴性;IDH1-R132H在Ⅱ和Ⅲ级中的阳性率(83.3％)明显高于Ⅰ和Ⅳ级肿瘤组织(47.0％),两组差异有统计学意义(x2=6.047,P＜0.05),在正常脑组织中表达为阴性;IDH1-R132H阴性表达和阳性表达组中,Ki-67蛋白阳性表达率,两组差异有统计学意义(x2=4.055,P＜0.05),进一步行相关性分析,差异有统计学意义(r=-0.314,P＜0.05).结论 Ki-67和IDH1-R132H蛋白表达水平可指导脑胶质瘤患者临床实践,提供一定的参考依据.

目的:探讨血管中心性胶质瘤的临床、组织及分子病理学特征，总结其诊断及鉴别诊断的要点。方法:回顾性分析2019年5月至2021年12月首都医科大学附属北京天坛医院神经外科收治的5例血管中心性胶质瘤患儿(占同期收治的颅内肿瘤患者的0.02%)的临床资料。所有患儿均行手术切除治疗。总结其临床特征，肿瘤的组织病理学、免疫组织化学特点及分子病理学特征。结果:5例患儿的中位年龄为9岁(4~15岁)；均以癫痫起病，中位病程为6个月(6 d至12个月)。术前临床诊断均为低级别胶质瘤。5例患儿的肿瘤均位于小脑幕上皮质，累及一侧脑叶，头颅MRI显示T1加权成像肿瘤呈等或低信号，T2加权成像及液体衰减反转恢复序列像肿瘤呈稍高信号，增强扫描显示病变无强化。5例肿瘤均经手术全切除。光学显微镜下可见梭形的胶质细胞以血管为中心，呈放射状或纵向袖套样排列；免疫组织化学检测结果显示胶质纤维酸性蛋白呈阳性，异柠檬酸脱氢酶1、p53及α-地中海贫血/精神发育迟滞综合征X染色体相关基因蛋白均为野生型，Ki-67增殖指数均<3%，上皮细胞膜抗原呈灶状阳性。5例肿瘤中，4例存在MYB：：QKI基因融合。5例患儿的随访时间为6~35个月，至末次随访均存活。结论:血管中心性胶质瘤罕见，主要累及儿童，其生物学行为偏良性。结合组织学形态、免疫组织化学及特征性的分子病理学改变，可准确诊断这一疾病，并与其他类型的胶质瘤相鉴别。

目的 研究异柠檬酸脱氢酶(IDH)野生型胶质母细胞瘤(GBM)的组织病理及分子病理特征.方法 选取2021年9月—2023年8月于河北大学附属医院神经外科接受手术治疗的74例GBM患者为研究对象,采用苏木精-伊红染色观察组织病理学特点;采用免疫组织化学染色及二代测序方法研究分子病理学特征;采用Kaplan-Meier法绘制生存分析曲线,分析患者生存期与IDH1突变之间的关系.结果 74例GBM患者中男性占60.81%(45/74),患者年龄为(55.23±4.58)岁.58例为额叶肿瘤,16例为颞叶肿瘤.苏木精-伊红染色组织形态学结果显示,82.43%(61/74)的肿瘤组织可见典型的栅栏状坏死、血管增生、肿瘤异型性显著,符合典型GBM组织形态特点,其余肿瘤组织形态学符合2级或3级星形细胞瘤的形态特征.免疫组织化学染色结果显示,所有肿瘤IDH1 R132H染色均为阴性,Ki-67染色示平均阳性率为38%.二代测序分子病理结果显示,所有组织IDH1/2均为阴性,表皮生长因子受体(EGFR)扩增阳性占74.32%(55/74),端粒酶逆转录酶(TERT)启动子区域突变占59.46%(44/74).细胞周期素依赖性激酶抑制因子2A/B(CDKN2A/B)发生纯合性缺失的比例为33.78%(25/74).O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)启动子区甲基化水平高表达占47.30%(35/74).结论 GBM具有IDH野生型的分子特征,部分病例伴有EGFR扩增、TERT启动子区突变、CDKN2A/B纯和缺失、MGMT启动子区高甲基化的分子改变.

目的 探讨弥漫性半球胶质瘤(DHG)的临床病理特征及分子病理特征.方法 选取2021年1月—2023年5月于首都医科大学附属北京天坛医院神经外科接受手术切除或立体定向活检的27例DHG患者为研究对象,收集患者临床资料并进行随访.采用苏木素-伊红染色及免疫组织化学染色检测肿瘤细胞特征性的蛋白表达;采用二代测序+焦磷酸测序的方法检测肿瘤分子病理学特征.结果 27例DHG患者的中位发病年龄为22.5岁;男性占59.3%(16/27);24例肿瘤主要位于单侧额、顶、颞叶,仅3例位于双侧大脑半球.组织病理学结果显示,27例肿瘤形态学上5例呈星形细胞瘤形态,17例呈胶质母细胞瘤形态,1例呈胶质母细胞瘤伴节细胞样分化,4例呈原始神经外胚层肿瘤形态.免疫组化染色结果显示,27例肿瘤胶质纤维酸性蛋白染色均为弥漫阳性,少突胶质细胞转录因子2蛋白阴性表达,α-地中海贫血/精神发育迟滞综合征X染色体相关基因表达缺失,p53蛋白呈错义突变或无义突变表达,异柠檬酸脱氢酶1 R132H、异柠檬酸脱氢酶2 R172K、H3K27M、BRAF V600E蛋白均呈阴性表达,24例肿瘤细胞核不同程度地表达H3.3G34R蛋白,3例肿瘤弥漫性表达H3.3G34V蛋白.Ki67增殖指数3%～80%不等.分子病理学检测结果显示,所有肿瘤均出现H3F3A基因H3.3 G34(35)突变,23例伴ATRX缺失,27例均伴TP53突变.随访2～24个月,其中5例在确诊10～24个月后死亡,中位无进展生存期为6.5个月,中位总生存时间为11个月,5例失访.结论 DHG恶性程度高,尽管全切或近全切病变加放疗或化疗,患者仍很快复发进展或死亡.因此,对于DHG进行免疫组化及分子病理检测是必要的,更有利于对DHG患者的积极治疗和预后评估.

目的 运用Crispr-Cas12a法快速检测冰冻脑胶质瘤组织样本中异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)基因R132H单核苷酸多态性,初步评价该方法的检测效能及其与直接测序方法的一致性.方法 选择30 例脑胶质瘤冰冻组织样本,分别使用Crispr-Cas12a法、免疫组织化学法(IHC)以及直接测序法对样本IDH1-R132H位点突变情况进行检测,计算Crispr-Cas12a法的灵敏度、特异性等效能指标,并利用配对χ2 检验(McNemar检验)及Kappa一致性检验分析Crispr-Cas12a法、IHC法与金标准(直接测序方法)的一致性.结果 利用Crispr-Cas12a法初步实现了60 min内对冰冻脑胶质瘤组织样本IDH1-R132H位点突变的快速检测.以直接测序为金标准,Crispr-Cas12a法的灵敏度为87.7%,特异性为97.0%,一致性为91.1%,Kappa一致性检验显示两种方法一致性较好(k =0.816).结论 Crispr-Cas12a法能快速、准确地对冰冻脑胶质瘤组织样本IDH1-R132H突变进行检测,且稳定性较好,有望成为一种检测IDH1 突变的术中检测方法.

目的 探讨异柠檬酸脱氢酶-1(IDH1)突变与O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲级转移酶(MGMT)启动子甲基化在高级别胶质瘤中表达相关性及对预后的影响.方法 收集2008-2014年沈阳军区总医院神经外科收治的107例高级别(Ⅲ～Ⅳ级)胶质瘤患者的肿瘤与血液标本,所有患者均接受放疗和/或化疗.PCR检测IDH1突变与MGMT启动子甲基化,Spearman分析其表达相关性及对患者预后的影响.结果 107例患者中,16例发生IDH1突变,突变率为15.0％(16/107),均为R132H型突变;MGMT启动子甲基化阳性率为50.5％(54/107);IDH1突变与MGMT启动子甲基化在高级别胶质瘤中表达具有相关性(r =0.258,P＜0.05);随访18个月,发生IDH1突变与MGMT启动子甲基化的患者存活率高、预后较好(P＜0.05).结论 IDH1可判断胶质瘤的恶性程度,MGMT可作为化疗的重要参考指标.IDH1突变与MGMT启动子甲基化具有相关性且可改善胶质瘤患者预后.

目的 探讨手术切除程度对高级别胶质瘤病人预后的影响.方法 回顾性分析303例高级别胶质瘤病人的临床资料,包括间变型胶质瘤(WHOⅢ级)126例,胶质母细胞瘤(WHOⅣ级)177例.均进行异柠檬酸脱氢酶(IDH)基因检测,并统计分析各项临床资料数据与总生存期(OS)的关系.结果 单变量分析显示:年龄＜55岁,全部完成放化疗方案,IDH-1R132H基因突变型,术前KPS评分≥70分,WHOⅢ级肿瘤及手术全切除病人的中位OS更长(P＜0.05).Kaplan-Meier生存曲线显示:肿瘤切除程度越高,病人预后越好(P＜0.05).多变量分析显示:年龄、病理级别、手术切除程度、放化疗和IDH-1132H基因类型均是预测病人预后的独立风险指标.结论 高级别胶质瘤预后差,需要手术结合术后放化疗综合治疗;肿瘤全切除对延长病人OS、提高生活质量具有重要意义.

目的 通过联合检测脑胶质瘤样本异柠檬酸脱氢酶1、2(IDH1、IDH2)基因突变/p53基因突变以及Ki-67蛋白表达情况,明确不同脑胶质瘤基因型特征,探讨其表达与胶质瘤病理分级和临床特征的相关性,为临床诊断与治疗提供分子病理学依据.方法 采用直接测序法检测46例胶质瘤样本IDHl基因第132位密码子、IDH2基因第172位密码子突变及p53基因第5~8外显子突变,免疫组织化学方法检测样本Ki-67蛋白表达,分析分子标志物与样本临床特征和病理分级相关情况.结果 共检出32.6%(15/46)的样本发生IDH1基因R132H突变,WHOⅡ~Ⅳ级样本中突变率分别为40.0%、58.3%、17.4%,IDH1基因突变与较低年龄(P=0.028)、肿瘤位置发生于额叶(P=0.002)、WHOⅡ~Ⅲ级组织学分级(P=0.047)、Ki-67蛋白低表达(P=0.034)显著相关;检出4例胶质母细胞瘤样本发生p53基因突变,突变位点位于第7、8外显子,并伴IDH1基因野生型;所有样本Ki-67均有阳性表达,在Ⅱ~Ⅳ级胶质瘤中Ki-67表达呈上升趋势,不同级别胶质瘤间Ki-67阳性表达程度有统计学差异(P<0.01),Ki-67低表达组IDH1突变率高于Ki-67高表达组,IDH1基因突变与Ki-67表达呈负相关.结论 不同病理分型胶质瘤的IDH1基因突变比例存在差异,在WHOⅡ~Ⅲ级中最高,IDH1、Ki-67表达水平与胶质瘤分级密切相关,p53基因突变在原发性胶质母细胞瘤中更常见,IDH1、p53、Ki-67联合检测有利于胶质瘤的诊断分级和预后评估,具有一定的临床价值.

目的 建立检测脑胶质瘤患者异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)R132H突变的焦磷酸测序方法,并探讨其在临床上的应用性.方法 回顾性纳入中国脑胶质瘤基因组图谱计划(CGGA)数据库中30例脑胶质瘤患者的临床资料和石蜡包埋样本,其中15例为IDH1 R132H野生型,15例为IDH1R132H突变型.采用焦磷酸测序方法检测样本中IDH1 R132H的突变情况,并与免疫组织化学染色结果进行比较分析.结果 30例脑胶质瘤患者焦磷酸测序结果显示,IDH1 132位点CAT所占比例为10％～52％,其中15例IDH1 RI32H野生型样品均＜19％,而其余15例IDH1 R132H突变型样品均＞27％.免疫组织化学染色结果显示,15例IDH1 R132H野生型样品为阴性,其余15例IDH1 R132H突变型为阳性,其中8例为阳性,7例为强阳性.相关性分析结果显示,免疫组织化学染色结果为阴性的样本,焦磷酸测序定量检测的IDH1 R132H突变比例均＜20％ (10％-18％);而免疫组织化学染色结果为阳性的样本,IDH1 R132H突变比例均＞20％(28％～52％);两者间的差异有统计学意义(P＜0.05),且不存在重叠区域.结论 基于焦磷酸测序平台的检测方法可定量分析脑胶质瘤样本IDH1 R132H的突变状态,适合作为临床分子病理学的常规检测.

目的 研究IDH1 R132H、HIF-1α及VEGF在脑胶质瘤中的表达及与临床病理特征的关系.方法 用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)技术PV-9000二步法检测51例脑胶质瘤组织、10例正常脑组织中IDH1 R132H、HIF-1α及VEGF的表达情况,并分析其与脑胶质瘤组织的临床病理特征之间的关系.结果 ①病例组与对照组进行分析:病例组的IDH1R132H、VEGF及HIF-1α阳性率明显高于正常组,且均存在统计学差异(P＜0.05).②IDH1R132H、HIF-1 α及VEGF蛋白的表达与临床病理特征的关系:IDH1 R132H阳性表达21例,Ⅲ级表达最高,Ⅱ级表达次之,Ⅳ级表达最低;男性中阳性表达高于女性;中年组表达最高,老年组表达最低;顶叶表达最高,额叶表达最低;经统计学分析,IDH1R132H蛋白的表达与性别、年龄、组织分级及位置无关(P＞0.05).HIF-1α阳性表达24例,Ⅳ级表达最高,Ⅱ级表达最低;男性中阳性表达高于女性;老年组表达最高,青年组表达最低;颞叶表达较高,额叶表达最低;经统计学分析,HIF-1α的阳性表达在年龄分组中中年及老年差异有统计学意义(P＜0.05),与性别、组织分级及位置无关(P＞0.05).VEGF表达阳性31例,Ⅰ级表达最高,Ⅳ级表达最低;女性中阳性表达高于男性;老年组表达最高,中年组表达最低;其他部位表达最高,枕叶表达最低;经统计学分析,VEGF在胶质瘤的位置分组中差异有统计学意义(P＜0.05);与性别、年龄、组织分级无关(P＞0.05).③IDH1 R132H、VEGF及HIF-1α 3个指标之间两两比较的相关性分析:VEGF与HIF-1 α呈正关联,关联强度:1.67(x2=3.840,P=0.05),95％ CI:[1.00,2.76],而IDH1R132H与HIF-1α无明显关系(x2 =0.004,P=0.948),与VEGF无明显关系(x2=1.697,P=0.183).结论 IDH1R132H、VEGF及HIF-1α三个指标在脑胶质瘤中的表达明显高于对照组,且对照组不表达;HIF-1α的表达与年龄有关,VEGF的表达与位置有关,且HIF-1α与VEGF的表达有较强的关联性.