目的:探讨激活态雪旺细胞(activated schwann cells，ASCs)干预骨髓间基质细胞(bone marrow stromal cells，BMSCs)联合异种神经移植体(acellular nerve xenograft，ANX)修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法:取大鼠骨髓腔内BMSCs，另取大鼠的ASCs和普通SCs，行原代培养。将两种细胞置于Transwell培养皿中培养并分成三组：BMSCs组，SCs-BMSCs组及ASCs-BMSCs组。在培养皿中培养后第2、4、6和8天，用CCK-8法检测各组BMSCs生物学活性，通过q-PCR检测各组脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的mRNA表达水平。在无菌条件下制备10 mm坐骨神经缺损的大鼠模型，制作异种神经支架复合体(兔源胫神经)。将SD大鼠分为三组(n＝10)：ANX＋BMSCs组，ANX＋SCs-BMSCs组及ANX＋ASCs-BMSCs组。将各组细胞打入支架，复合支架培养3 d，移植到大鼠模型中。术后8周通过神经电生理检测各组患肢感觉神经传导速度(sensory nerve conduction velocity，SCV)，使用q-PCR检测神经移植体内神经营养因子(BDNF、NGF和bFGF)表达水平，另比较三组模型的下肢患侧/健侧腓肠肌细胞横截面积比恢复率。结果:CCK-8测定发现共培养系统中BMSCs组细胞增殖活性强于单细胞组，第2天和第4天，三组的活性差异无统计学意义( P>0.05)，第6天ASCs-BMSCs组增殖活性强于BMSCs组与SCs-BMSCs组，差异有统计学意义( P<0.05)，BMSCs组与SCs-BMSCs组之间差异无统计学意义( P>0.05)。通过q-PCR检测BMSCs组中BDNF、NGF及bFGF的mRNA表达最低，ASCs-BMSCs组含量最高( P<0.05)。经8周饲养后的动物实验，通过检测发现，ANX-ASCs-BMSCs组的SCV，ANX内相关神经因子表达量以及ANX-ASCs-BMSCs组的大鼠患侧/健侧腓肠肌肌细胞横截面积均最大。 结论:ASCs能够促进BMSCs的分化增殖；运用ANX-ASCs-BMSCs促进周围神经功能再生。

背景:由于感染、肿瘤、先天性疾病等原因所致骨缺损修复始终是骨科医师面对的难题,其中大部分不能自身愈合,因此产生了骨移植修补的需要.自体骨由于具有良好的骨传导性、骨诱导性及骨生成作用,在临床应用最为广泛,但其使用受许多条件限制.支架材料作为骨组织工程的核心部分,其生物学结构、功能等备受关注.骨组织工程支架以及修补材料还广泛应用于整形外科、神经外科、口腔手术等其他领域.目的:综述骨修复及支架材料的研究进展.方法:由第一作者用应用计算机检索2006至2016年CNKI数据库(医学版)和外文生物医学期刊整合系统中有关骨移植支架材料与骨缺损修复方面的文献.结果与结论:材料科学和分子生物学等多学科的快速发展,多领域的交叉融合和三维技术的日益成熟,纳米细胞基因工程等技术的使用,复合型骨移植材料有着更广阔的前景.尽管各类骨移植材料品类繁多,但各有优缺点.临床治疗骨缺损,尤其大量或节段性骨缺损,急需要一种适宜的修复材料,作为最有潜力的异种骨移植,尚需进一步研究来评价其临床安全性及有效性.

目的 探讨化学联合冻融方式处理的脱细胞异种神经支架复合体外培养的同种异体类雪旺细胞后修复面神经损伤的实验效果.方法 取日本大耳白兔腹股沟脂肪垫,通过单酶消化法体外培养脂肪间充质干细胞(adiopose-deribed stem cell,ADSCs),并通过化学试剂及自体富血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)体外定向诱导成类雪旺细胞(schwann cell-like cell lineages,SCs-like);取Wistar大鼠双侧坐骨神经,通过化学联合冻融的方式制备脱细胞异种神经支架.使用DiOC16(3)荧光探针进行类雪旺细胞的标记.建立兔面神经5 mm的缺损模型,以不同移植物确立3组实验分组(n=10):A组(自体神经修复组);B组(复合DiOC16-SCs的异种神经支架修复组);C组(单纯异种神经支架修复组).术后8周通过再生神经的电生理、有髓神经纤维密度及特异性蛋白定量评价神经功能的早期修复效果.结果 术后各组动物分笼饲养,均存活良好.解剖时发现各组动物再生神经连续性及完整性均良好,未形成明显的神经瘤.术后8周各组术侧动作电位潜伏期延长,A、B组明显快于C组,且A组与B、C组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).甲苯胺蓝染色计算再生有髓神经纤维密度,A、B组明显高于C组(P＜0.05),A、B组之间比较差异无统计学意义.再生神经内特异性蛋白神经生长因子(nerve growth factor,NGF)及脑源性神经生长因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)染色观察,可见A、B组内NGF及BDNF的蛋白含量均高于C组(P＜0.05),且A组NGF蛋白含量最高,B组BDNF蛋白含量最高.结论 复合体外定向诱导的类雪旺细胞的脱细胞异种神经支架在修复面神经5 mm的缺损中早期获得的修复效果与自体神经的修复效果相近.

目的:探究去细胞异种神经支架对大鼠足底创面触觉功能重建的影响及机制.方法:将大鼠足底创面模型(n=48)随机平分为模型组、干细胞组、神经支架组三组.模型组不进行治疗,干细胞组将肌源性干细胞(浓度为107个/ml)细胞悬液注射到创伤部位,神经支架组在干细胞组治疗的基础上以注射植入后的细胞异种神经支架进行桥接.结果:干细胞组、神经支架组治疗第7天与第14天的机械痛阈高于模型组(均P<0.05),神经支架组高于干细胞组(P<0.05).干细胞组、神经支架组治疗第7天与第14天的足底神经指数与运动神经传导速度高于模型组(均P<0.05),神经支架组高于干细胞组(P<0.05).干细胞组、神经支架组治疗第14天与第21天的有髓神经纤维数量高于模型组(均P<0.05),神经支架组高于干细胞组(P<0.05).干细胞组、神经支架组治疗第14天与第21天的细胞角蛋白-20(CK-20)与代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)蛋白相对表达水平低于模型组(均P<0.05),神经支架组低于干细胞组(P<0.05).结论:去细胞异种神经支架在大鼠足底创面的应用能抑制CK-20与mGluR5蛋白的表达,有利于触觉功能重建,提高足底神经指数与运动神经传导速度,增加有髓神经纤维数量.