目的 分析糖尿病肾病(DN)患者血清长链非编码RNA KCNQ1反向链/反义转录物1(LncRNA KCNQ1OT1)、微小核糖核酸-192-5p(miR-192-5p)与白蛋白尿短期进展及预后的关系.方法 选取2021年4月-2022年12月康复大学青岛中心医院/青岛市中心医院内分泌风湿免疫科收治的DN患者102例为观察组,根据2次检测(间隔6个月)24 h尿白蛋白及SCr水平分为未进展亚组(n=78)和进展亚组(n=24),根据随访1年预后情况分为预后良好亚组(n=84)和预后不良亚组(n=18),选择同期医院健康体检者58例为健康对照组.采用qRT-PCR检测血清 LncRNA KCNQ1OT1、miR-192-5p 相对表达量;Pearson 法分析 LncRNA KCNQ1OT1 与 miR-192-5p 的相关性;多因素Logistic回归分析患者白蛋白尿短期进展的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LncRNA KCNQ1OT1,miR-192-5p对患者预后的预测价值.结果 与健康对照组比较,观察组血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高,miR-192-5p水平降低(t/P=17.619/＜0.001、16.120/＜0.001);与未进展亚组比较,进展亚组血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高,miR-192-5p水平降低(t/P=7.698/＜0.001、9.485/＜0.001);与未进展亚组比较,进展亚组患高血压比例降低及FPG、HbA1c、BUN、SCr升高,差异均有统计学意义(x2/P=9.835/0.002,t/P=2.593/0.011、2.356/0.020、4.582/＜0.001、3.139/0.002);与预后良好亚组比较,预后不良亚组血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高,miR-192-5p 水平降低(t/P=7.602/＜0.001,9.380/＜0.001);LncRNA KCNQ1OT1 与 miR-192-5p 呈负相关(r/P=-0.452/＜0.001);高血压、血清LncRNA KCNQ10T1水平升高为患者白蛋白尿短期进展的危险因素[OR(95％CI)=1.532(1.058～2.219)、1.638(1.100～2.438)],miR-192-5p水平升高为患者白蛋白尿短期进展的保护因素[OR(95％CI)=0.671(0.517～0.871)];LncRNA KCNQ1OT1、miR-192-5p 以及二者联合预测患者预后的 AUC 分别为 0.808、0.822、0.896,联合预测显著优于各自单独预测(Z/P=2.030/0.042、2.116/0.034).结论 DN患者血清LncRNA KCNQ1OT1水平升高,miR-192-5p水平降低,两者均为DN患者发生白蛋白尿短期进展的影响因素,且对患者预后具有一定辅助预测价值.

目的:对比缺氧环境下不同肺腺癌细胞株表达差异的microRNA,为进一步研究缺氧环境中肺癌细胞microRNA的作用机制提供参考.方法:建立缺氧模型,将培养于缺氧情况中及正常氧浓度下的GLC-82、A549细胞分别提取RNA,通过芯片检测及PCR验证,筛选差异表达的microRNA.利用TargetScanHuman 7.2数据库和cytoscape软件预测差异显著的microRNA分子调控的靶基因及可能参与的信号通路.结果:在缺氧条件下,A549细胞中3个microRNA表达上调,30个microRNA表达下调:而在GLC-82细胞中,2个microRNA表达上调,31个microRNA表达下调.两种细胞相比较,除miR-192-5p变化趋势相反外,其他microRNAs的表达变化趋势相同.通过KOBAS在线网站KEGG及GO预测分析,差异表达microRNA主要参与了肿瘤相关信号通路、胰岛素信号通路、Ras信号通路以及氧代谢等生物学过程.结论:肺癌细胞株在缺氧环境下和正常氧状态下mircoRNA出现表达差异,并且来源于不同遗传背景的细胞株之间也存在差异.差异表达的microRNA靶基因参与了多种细胞代谢相关通路,具有氧代谢,氧应答相关功能.

目的:筛选并验证分析与新生儿急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)相关的微小核糖核酸(miRNA),初步研究患儿血浆中miR-6833-3p的表达水平及其诊断效能.方法:选取南京医科大学附属儿童医院25例ARDS患儿(ARDS组)为研究对象,同期选取32例普通新生儿为对照组.采用微流体芯片技术筛选与新生儿ARDS相关的miRNA,对于组间差异表达超过5倍的miRNA进一步进行实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)验证芯片重复性及进行靶基因预测,对两组血浆miR-6833-3p的表达水平进行检测并与急性生理评分做相关性分析,通过绘制受试者工作特征(receiver operat-ing characteristic,ROC)曲线分析miR-6833-3p在患者中的诊断效能并计算诊断敏感度及特异度.结果:通过基因芯片筛选出24个与新生儿ARDS相关的高表达差异基因.表达差异超过5倍的miRNA有8个,4个上调的分别是miR-31-5p、miR-4754、miR-6833-3p和miR-192-3p,4个表达下调的基因分别是miR-362-3p、miR-11a、miR-7a-2-3p和miR-1382.通过验证发现miR-6833-3p在ARDS组血浆中显著上调(P＜0.01),且与APACHEⅡ评分中的急性生理评分呈正相关(r=0.731,P＜0.001).通过靶基因预测分析发现miR-6833-3p与PI3-K/Akt、MAPK信号通路可能密切相关.相关ROC曲线结果也显示,miR-6833-3p预测新生儿ARDS的ROC曲线下面积为0.848,其诊断最佳阈值为1.03,约登指数最大值为0.59,此时miR-6833-3p的诊断灵敏度为84.55％,特异度为75.36％.结论:miR-6833-3p在新生儿ARDS血浆中的表达水平显著升高,可作为新生儿ARDS的特异性标志物.