目的:探讨血清微小RNA-129-5p(miR-129-5p)在骨关节炎(OA)中的表达水平及诊断价值。方法:选取2019年3月至2023年7月在山西省人民医院骨科就诊的126例OA患者为观察组，并纳入同期体检中心的105例健康体检者为对照组。采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测血清miR-129-5p的表达水平；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和C反应蛋白(CRP)的表达水平；利用Pearson相关系数分析miR-129-5p、HMGB1水平与TNF-α、IL-1β、CRP的相关性；分析miR-129-5p与HMGB1的相关性；利用多因素Logistic回归分析miR-129-5p对OA的风险性；并采用受试者工作特征(ROC)曲线判断miR-129-5p对OA的诊断价值。结果:观察组血清miR-129-5p水平显著低于对照组(0.49±0.28比0.99±0.34， t＝12.390， P<0.01)，观察组血清HMGB1水平显著高于对照组[(45.68±18.41) ng/ml比(23.20±8.92) ng/ml， t＝11.414， P<0.01]。观察组血清TNF-α、IL-1β、CRP水平均显著高于对照组( t＝7.331、5.246、8.622， P<0.01)。血清miR-129-5p水平与HMGB1呈明显负相关( r＝－0.615， P<0.01)，多因素Logistic回归分析结果显示，miR-129-5p的比值比( OR)值为0.019。ROC曲线分析显示，血清miR-129-5p截断值0.928对预测OA具有良好的灵敏度(95.24%)和特异性(59.05%)，曲线下面积(AUC)为0.861[95%置信区间：0.815～0.907， P<0.01]。 结论:血清miR-129-5p水平在OA患者中显著降低，且与HMGB1及炎性标志物TNF-α、IL-1β、CRP呈负相关，对预测OA具有诊断价值。

目的:检测胶质瘤组织中长链非编码RNA(lncRNA)核受体亚家族2组F成员2反义核糖核酸1(NR2F2-AS1)和微小RNA-129-5p(miR-129-5p)的表达，并探讨其临床意义。方法:选取2015年1月至2016年9月山西省人民医院神经外科接受手术治疗的103例胶质瘤患者的胶质瘤组织及同期因颅脑手术切除的50例正常脑组织为研究对象。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测组织样本中lncRNA NR2F2-AS1和miR-129-5p的表达水平，分析两者的相关性，分析两者的表达变化与胶质瘤患者临床病理参数的关系，用Kaplan-Meier曲线分析lncRNA NR2F2-AS1、miR-129-5p表达水平与胶质瘤患者术后5年累积生存率的关系，Cox回归分析法分析影响胶质瘤患者预后的因素。结果:胶质瘤组织中lncRNA NR2F2-AS1相对表达量高于正常脑组织，而miR-129-5p相对表达量低于正常脑组织(均 P<0.05)。胶质瘤组织中lncRNA NR2F2-AS1与miR-129-5p的表达呈负相关( r＝－0.756， P<0.05)。胶质瘤组织中lncRNA NR2F2-AS1与miR-129-5p的表达与肿瘤WHO分级及肿瘤长径有关(均 P<0.05)。LncRNA NR2F2-AS1<2.89组患者术后5年累积生存率高于lncRNA NR2F2-AS1≥2.89组患者( P<0.05)，miR-129-5p<0.55组患者术后5年累积生存率低于miR-129-5p≥0.55组患者( P<0.05)。LncRNA NR2F2-AS1高表达、miR-129-5p低表达、WHO分级Ⅲ~Ⅳ级及肿瘤长径是影响胶质瘤患者术后预后的危险因素(均 P<0.05)。 结论:胶质瘤组织中lncRNA NR2F2-AS1表达升高、miR-129-5p表达降低，两者参与脑胶质瘤临床生物学进展，并与患者预后密切相关。

目的:探讨破骨细胞分化过程中微小RNA(miR)-129-5p的失调以及miR-129-5p在破骨细胞分化中的确切作用机制。方法:首先建立核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导鼠源单核巨噬细胞(RAW264.7)分化的破骨细胞，实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-129-5p在破骨细胞分化前后的表达差异。然后用miR-129-5p模拟物处理RANKL诱导的RAW264.7细胞，验证miR-129-5p对破骨细胞分化的影响。细胞计数试剂盒(CCK-8)实验用于检测破骨细胞的增殖活性，抗酒石酸酸性磷酸酶染色确定破骨细胞数目，蛋白质印迹法检测破骨相关标志物的蛋白表达。最后，通过RT-qPCR或蛋白质印迹法分析miR-129-5p对成纤维细胞生长因子2(FGF2)表达的影响。组间统计学差异采用 T-Test法检验。 结果:miR-129-5p在RANKL组的表达水平低于对照组(0.405±0.007比0.984±0.031， t＝24.070， P<0.01)。在功能上，上调miR-129-5p可以抑制破骨细胞的分化，CCK-8实验结果显示，miR-129-5p处理组的破骨细胞活力低于阴性对照组(1.096±0.027比0.549±0.006， t＝33.670， P<0.001)。机制上，miR-129-5p对破骨细胞分化的抑制作用，可能与负调节FGF2表达有关。RT-qPCR实验结果显示，miR-129-5p处理组破骨细胞中FGF2 mRNA表达水平明显低于对照组(1.001±0.026比0.151±0.004， t＝48.001， P<0.01)。此外，功能挽救实验结果表明过表达FGF2可以抵消miR-129-5p上调对破骨细胞分化的抑制作用。RT-qPCR实验结果显示，miR-129-5p mimic+OE-FGF2组破骨细胞中FGF2的水平高于miR-129-5p mimic+OE-NC组(0.973±0.059比5.108±0.018， t＝86.059， P<0.001)，差异均有统计学意义。 结论:miR-129-5p通过负调节FGF2表达，显著抑制了破骨细胞分化。

目的:探讨胰腺癌组织和癌旁组织中DNA甲基转移酶3A的表达水平，并采用转录组学筛选调控DNA甲基转移酶3A的微小RNA(miRNA，miR)家族。方法:选取2021年6月到2023年6月新乡医学院第一附属医院住院部手术切除的胰腺癌组织和对应癌旁组织作为研究对象。采用蛋白质免疫印迹分析DNA甲基转移酶3A的表达水平。随机选取6例癌旁组织和胰腺癌组织作为研究对象，采用转录组学分析癌旁组织和胰腺癌组织中差异表达的(microRNA，miRNA)，并采用生物信息学和荧光素酶报告基因分析差异表达miRNA对DNA甲基转移酶3A的调控关系。结果:癌旁组织中DNA甲基转移酶3A表达水平(0.77±0.16)明显低于胰腺癌组织(1.48±0.21)，差异有统计学意义( t＝19.690， P<0.05)。胰腺癌组织和癌旁组织共有390个miRNA差异表达，其中上调259个，下调131个。这些miRNA主要生物学过程包括细胞增殖、细胞发育、细胞分化等；分子功能主要包括肿瘤细胞运动、细胞迁移、细胞侵袭、细胞增殖和细胞间信号转导等。发现下调的miRNA与DNA甲基转移酶3A存在碱基互补，其中差异最为显著排序前10个的miRNA分别为miR-143-3p、miR-129-5p、miR-493-5p、miR-367-3p、miR-29a-3p、miR-212-3p、miR-323A-3p、miR-5195-3p、miR-4465和miR-532-5p。癌旁组织中miR-143-3p、miR-129-5p、miR-493-5p、miR-367-3p、miR-29a-3p、miR-212-3p、miR-323a-3p、miR-5195-3p、miR-4465和miR-532-5p表达水平(1.09±0.11、0.97±0.08、1.08±0.31、1.17±0.121、1.07±0.08、1.01±0.10、0.97±0.08、1.01±0.05、0.99±0.03、1.04±0.10)明显高于胰腺癌组织(0.51±0.10、0.46±0.11、0.47±0.15、0.62±0.12、0.37±0.07、0.56±0.10、0.66±0.04、0.68±0.06、0.73±0.05、0.66±0.13)，差异有统计学意义( t＝11.860、12.170、5.590、9.910、21.070、9.941、11.180、14.030、13.570、7.470， P<0.05)。miRNA对照和荧光素酶报告基因共转染细胞荧光素酶活性(0.97±0.02、0.96±0.02、0.97±0.02、0.98±0.02、0.97±0.02、0.97±0.04、0.95±0.03、0.96±0.03、0.97±0.02、0.96±0.02)明显高于miR-143-3p、miR-129-5p、miR-493-5p、miR-367-3p、miR-29a-3p、miR-212-3p、miR-323a-3p、miR-5195-3p、miR-4465和miR-532-5p模拟物和荧光素酶报告基因共转染细胞荧光素酶活性(0.32±0.07、0.33±0.06、0.35±0.09、0.50±0.04、0.50±0.05、0.53±0.07、0.58±0.03、0.63±0.03、0.65±0.05、0.81±0.05)，差异有统计学意义( t＝22.400，24.470，16.730，24.480、20.530，14.010，21.360，19.040，15.960，6.751， P<0.05)。 结论:DNA甲基转移酶3a在胰腺癌组织中表达水平显著增加，miR-143-3p、miR-129-5p、miR-493-5p、miR-367-3p、miR-29a-3p、miR-212-3p、miR-323a-3p、miR-5195-3p、miR-4465和miR-532-5p等miRNA参与调控DNA甲基转移酶3a在胰腺癌组织中的表达。

目的:利用生物信息学方法分析糖皮质激素对晶状体上皮细胞(LECs)生物学功能的影响，并预测相关的微小RNA(miRNA)。方法:下载GSE3040数据集，设置1 μmol/L地塞米松处理的人LECs细胞株HLE-B3细胞为实验组，1 μmol/L二甲基亚砜(DMSO)处理的HLE-B3细胞为对照组，利用GEO2R工具分析2个组间的差异表达基因。利用Metascape网站进行差异基因功能富集分析，通过EdU细胞增生实验检测2个组间细胞增生差异。通过STRING网站和cytoscape软件构建蛋白互作网络图，cytohubba app计算出hub基因，采用实时荧光定量PCR法检测2个组间hub基因的表达差异。利用mirCode数据库预测与hub基因相关的miRNA。结果:实验组与对照组间分析出341个差异基因，其中上调基因为300个，下调基因为41个。下调基因中差异最显著的5个基因是 SLC12A1、 MED13L、 ALDH5A1、 SLC15A3和 WWC1基因；上调基因中差异最显著的5个基因是 SCNN1A、 ANKRD36、 FKBP5、 PYY和 ADH1B基因。列出了富集量排名前20的生物学功能关键词，结果显示富集量最大的是对HLE-B3细胞增生的负向调节。实验组细胞增生率为(8.09±0.20)%，低于对照组的(39.63±0.80)%，差异有统计学意义( t＝38.43， P<0.01)。前10位hub基因分别是 SST、 CXCL8、 GRM1、 GNRH1、 CXCL5、 PPBP、 CX3CR1、 PYY、 EDNRA和 GRK5，实时荧光定量PCR结果显示2个组间SST、CXCL8、GRM1、PYY、EDNRA和GRK5 mRNA相对表达量比较差异均有统计学意义(均 P<0.05)。与hub基因相关性强的前6位miRNA分别是miR-15abc、miR-214、miR-23abc、miR-129-5p、miR-132和miR-24。 结论:1 μmol/L地塞米松即可对HLE-B3细胞的增生产生负性调控作用。 SST、 CXCL8、 GRM1、 PYY、 EDNRA和 GRK5基因可能是糖皮质激素的作用靶点，miR-15abc、miR-214、miR-23abc、miR-129-5p、miR-132和miR-24最可能与hub基因相关。

目的:探讨微小RNA-129-3p(miR-129-3p)通过靶向E2F转录因子5(E2F5)影响肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的恶性生物学行为。方法:荧光定量聚合酶链反应检测不同肝癌细胞株与正常肝细胞株中miR-129-3p及E2F5的表达；构建过表达miR-129-3p的HepG2细胞株，噻唑蓝细胞增殖实验、平板克隆实验检测细胞增殖及克隆形成能力；细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，蛋白质印迹法检测蛋白表达；双荧光素酶报告基因法和蛋白质印迹法验证miR-129-3p和E2F5的靶向关系。实验分组如下：细胞未经转染(NC)组；转染对照miR-con(miR-con)组；转染miR-129-3p(miR-129-3p)组；共转染miR-129-3p和空载体pcDNA (miR-129-3p+pcDNA)组；共转染miR-129-3p和pcDNA-E2F5(miR-129-3p+pcDNA-E2F5)组。结果:肝癌细胞株MHCC-97H、HepG2、LM3、Hep3B、PLC、Huh7中miR-129-3p的表达量均低于正常肝细胞株HL-7702，差异具有统计学意义(均 P<0.05)。与NC组和miR-con组相比，miR-129-3p组的细胞克隆数[(86.56±20.84)比(511.29±45.03)和(509.78±40.81)]、细胞迁移率[(3.03±1.29)%比(15.01±2.30)%和(14.99±2.31)%]、迁移相关蛋白MMP-2相对表达量[(0.51±0.22)比(1.87±0.30)和(1.84±0.35)]和穿膜细胞数[(33.10±1.58)比(101.23±0.31)和(100.96±3.44)个]均降低，差异有统计学意义(均 P<0.05)。双荧光素酶报告实验表明miR-129-3p可负性靶向调控抑制E2F5表达。 结论:miR-129-3p在肝癌细胞中低表达，过表达miR-129-3p可通过靶向E2F5抑制肝癌细胞恶性生物学行为。

目的 探讨LncRNA OIP5-AS1对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖和凋亡的影响及其机制.方法 将TE-1细胞随机分为对照组(正常培养)、si-NC组(转染 si-NC)、si-OIP5-AS1 组(转染 si-OIP5-AS1)、si-OIP5-AS1+NC inhibitor 组(转染 si-OIP5-AS1、NC inhibitor)、si-OIP5-AS1+miR-129 inhibitor组(转染 si-OIP5-AS1、miR-129 inhibitor)、NC mimic 组(转染 NC mimic)、miR-129 mimic 组(转染 miR-129 mimic)、miR-129 mimic+Vector 组(转染miR-129 mimic、Vector)、miR-129 mimic+KRAS 组[转染 miR-129 mimic、Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因(KRAS)].用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组细胞中OIP5-AS1、miR-129的表达水平,用蛋白质印迹实验检测细胞中KRAS、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白的表达水平,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞的增殖情况,用原位末端标记(TUNEL)实验检测各组细胞的凋亡情况.结果 对照组、si-NC组、si-OIP5-AS1 组、si-OIP5-AS1+NC inhibitor 组和 si-OIP5-AS1+miR-129 inhibitor 组细胞 OIP5-AS1 表达量分别为 1.00±0.13、0.98±0.12、0.25±0.04、0.25±0.02 和 0.89±0.08,miR-129 表达量分别为1.00±0.15、0.97±0.07、2.06±0.17、2.04±0.11 和 1.22±0.15,72 h 光密度(OD)分别为 1.16±0.12、1.11±0.09、0.58±0.03、0.58±0.05 和 0.94±0.10.NC mimic、miR-129 mimic、miR-129 mimic+Vector、miR-129 mimic+KRAS 组的KRAS蛋白相对表达水平分别为1.08±0.07、0.41±0.06、0.40±0.06和1.03±0.10,72 h OD 值分别为 1.17±0.10、0.59±0.03、0.60±0.04 和0.90±0.05.si-NC 组的上述指标与 si-OIP5-AS1 组比较,si-OIP5-AS1+NC inhibitor 组 的上述指标与 si-OIP5-AS1+miR-129 inhibitor 组 比较,NC mimic组的上述指标与 miR-129 mimic 组比较,miR-129 mimic+Vector 组的上述指标与miR-129 mimic+KRAS组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 OIP5-AS1可通过调节miR-129靶向KRAS,促进ESCC细胞增殖和上皮间质转化.

目的:探讨化瘀散水煎剂通过调控微小RNA-129-5p/叉头框蛋白C1(FOXC1)轴对肝癌裸鼠移植瘤生长的影响.方法:建立肝癌裸鼠移植瘤模型,并分为裸鼠NC组、化瘀散水煎剂组、化瘀散水煎剂+ inhibitor-NC组、化瘀散水煎剂+miR-129-5p inhibitor组,每组8 只.qRT-PCR法检测miR-129-5p、FOXC1 mRNA表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-129-5p与FOXC1 靶向调控关系,观察记录裸鼠的瘤重及移植瘤体积,HE染色观察移植瘤组织形态,TUNEL检测肿瘤组织细胞凋亡,免疫组织化学染色检测瘤组织 Ki-67、Cleaved Caspase-3、FOXC1 表达,Western blot 检测 Ki-67、Cleaved Caspase-3、FOXC1 蛋白表达.结果:miR-129-5p在肝癌细胞中表达显著下降,FOXC1 mRNA表达显著升高,其中HepG2 细胞变化最显著(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验表明miR-129-5p与FOXC1 存在靶向调控关系;与NC组相比,化瘀散水煎剂组肿瘤细胞出现坏死,凋亡数增加,miR-129-5p、Cleaved Caspase-3显著升高,移植瘤质量和体积、FOXC1、Ki-67 表达显著降低(P<0.05);下调miR-129-5p逆转化瘀散水煎剂对肝癌移植瘤的抑制作用(P<0.05).结论:化瘀散水煎剂可能通过上调miR-129-5p从而下调FOXC1 表达,进而抑制肝癌移植瘤生长.

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)NUTM2A-AS1对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管内皮细胞损伤的影响及分子机制.方法 将人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)在DMEM培养基中培养,采用100 μg/mL oxLDL处理的HUVEC纳入oxLDL组,常规培养的细胞纳入Con组.将lncRNA NUTM2A-AS1干扰表达载体及阴性对照、miR-129-5p模拟物及阴性对照转染至 HUVEC 后采用 100μg/mL oxLDL 处理后的细胞分别纳入 oxLDL+si-NUTM2A-AS1 组、oxLDL+si-NC 组、oxLDL+miR-129-5p组、oxLDL+miR-NC组.将lncRNA NUTM2A-AS1干扰表达载体与微小RNA(miR)-129-5p抑制剂或阴性对照共转染至HUVEC 后采用 100 μg/mL 的 oxLDL 处理的细胞分别纳入 oxLDL+si-NUTM2A-AS1+anti-miR-129-5p 组、oxLDL+si-NUTM2A-AS1+anti-miR-NC组.采用试剂盒测量细胞中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;采用流式细胞术检测细胞凋亡;采用蛋白质印迹法检测蛋白表达;采用双荧光素酶报告实验及RNA下拉实验检测NUTM2A-AS1与miR-129-5p的靶向关系.结果 与Con组比较,oxLDL组lncRNA NUTM2A-AS1表达水平升高,miR-129-5p表达水平降低,MDA含量升高,SOD、GSH-Px活性降低,血管内皮细胞凋亡率和cleaved-caspase3、cleaved-caspase9表达水平升高,差异有统计学意义(P＜0.05).干扰lncRNA NUTM2A-AS1表达或过表达miR-129-5p后,MDA含量降低,SOD、GSH-Px活性升高,细胞凋亡率降低,差异有统计学意义(P＜0.05).lncRNA NUTM2A-AS1敲低介导的oxLDL条件下血管内皮细胞的损伤抑制可以被miR-129-5p下调逆转.lncRNA NUTM2A-AS1靶向调控miR-129-5p.结论 干扰lncRNA NUTM2A-AS1表达通过靶向上调miR-129-5p抑制oxLDL诱导的血管内皮细胞损伤.

目的 探讨二氯二苯基三氯乙烷(dichlorodiphenyltrichloroethane,DDT)诱导人结直肠癌增殖、侵袭与微小RNA-129(microRNA-129,miR-129)/细胞周期蛋白依赖性激酶-14(cyclin-dependent kinase-14,CDK-14)表达的关系.方法 5x106个/mL密度的人结直肠癌细胞分别用终浓度为0、100、250和500 nmol/L的DDT处理72 h,运用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]法及甲基紫染色测定细胞活力的和细胞细胞集落,流式细胞仪测定细胞凋亡水平,Transwell小室(transwell chamber,Transwell)侵袭室及划痕试验测定细胞侵袭迁移水平,实时荧光逆转录(real-time fluorescent reverse transcription,RT-PCR)法及蛋白印迹法测定细胞miR-129、CDK-14、卷曲螺旋结构域-34(coiled-coil domain-34,CCDC34)、半乳糖激酶 1(Galactokinase 1,GALK1)水平.结果 100、250 和 500 nmol/L DDT 组细胞增殖水平[(70.59±7.72、76.63±8.32、84.25±9.04 vs 62.58±6.83)％]、细胞集落[(99.95± 9.58、215.63±19.85、398.96±35.26vs62.63±6.52)个]、侵袭数目[(76.25±9.58、154.62±19.51、298.96±38.57vs49.65±6.65)个]、迁移水平(75.96±14.58、119.69±20.59、165.63±32.68 vs 11.59±2.28)、CDK-14、CCDC34、GALK1 mRNA 蛋白水平明显高于对照组(P＜0.01),凋亡率、miR-129水平明显低于对照组(P＜0.01);且500 nmol/L DDT组细胞增殖水平、细胞集落、侵袭数目、迁移水平、CDK-14 mRNA 蛋白[(1.60±0.28、2.14±0.33、2.99±0.51 vs 0.92±0.16),(0.42±0.07、0.85±0.14、1.20±0.20 vs 0.21± 0.03)]、CCDC34(0.48±0.08、0.87±0.15、1.18±0.18 vs 0.28±0.07)、GALK1(0.50±0.09、0.84±0.14、1.22±0.19 vs 0.30±0.08)蛋白水平均高于 250 nmol/L DDT 组,差异均有统计学意义(均 P＜0.01),凋亡率(1.70±0.31、1.00±0.16、0.60±0.11 vs 3.00±0.51)、miR-129(1.42±0.24、0.92±0.15、0.64±0.10 vs 1.78±0.28)水平均低于 250 nmol/L DDT组,差异均有统计学意义(均P＜0.01);250 nmol/L DDT组细胞增殖水平、细胞集落、侵袭数目、迁移水平、CDK-14、CCDC34、GALK1 mRNA蛋白水平均高于100 nmol/L DDT组,差异均有统计学意义(均P＜0.01),250 nmol/L DDT组细胞凋亡率、miR-129水平均低于100 nmol/L DDT组,差异均有统计学意义(均P＜0.01);DDT浓度与细胞增殖水平、细胞集落、侵袭数目、迁移水平、凋亡率、miR-129水平、CDK-14、CCDC34、GALK1 mRNA蛋白水平有明显剂量-反应关系(P＜0.01).结论 DDT下调miR-129表达靶向上调调控CDK-14以及CCDC34、GALK1的表达,从而促进结直肠癌细胞的增殖和侵袭,并抑制其凋亡.