目的:探讨miR-140-5p介导Jagged1对肾透明细胞癌(ccRCC)迁移、侵袭及血管生成能力的影响。方法:选取福建省漳州市医院泌尿外科2019年4月至2020年12月经肾癌根治术患者的肾透明细胞癌及癌旁组织标本17例，选取购自美国菌种保藏中心肾透明细胞癌细胞系(786-0)和肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2)，荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-140-5p的表达。免疫组织化学检测ccRCC组织中Jagged1的表达。将786-0细胞分为miRNA阴性对照组(miR-NC组)、过表达miR-140-5p组(miR-140-5p组)、Jagged1阴性对照组(Jagged1-NC组)、敲减Jagged1组(si-Jagged1组)。使用划痕、transwell小室和血管生成实验，分别检测细胞迁移、侵袭和血管生成的改变。RT-qPCR检测miR-140-5p过表达后Jagged1 mRNA的表达，蛋白质印迹法(Western blot)检测Notch/Jagged1信号通路中Jagged 1蛋白的表达。计量资料比较采用 t检验，计数资料采用 χ2检验。 结果:ccRCC组织(0.318±0.144)中miR-140-5p的表达量显著低于正常肾组织(1.028±0.033)，差异有统计学意义( t＝-19.787， P<0.01)；786-0肾癌细胞(0.295±0.064)中miR-140-5p的表达量显著低于HK-2正常肾细胞(1.009±0.157)，差异有统计学意义( t＝-8.366， P<0.01)；在体外，miR-140-5p组的细胞迁移率(0.394±0.015)、侵袭细胞数(142.000±17.874)和血管管腔样结构的形成数(46.000±5.291)显著少于miR-NC组的细胞迁移率(0.548±0.020)、侵袭细胞数(267.000±26.357)和血管管腔样结构的形成数(74.000±8.000)，差异有统计学意义( t＝-10.362、-14.445、-5.056， P<0.01)；与miR-140-5p相反，ccRCC组织中Jagged1的表达(92.30%)显着高于正常肾组织(36.67%)，差异有统计学意义( χ2＝5.356， P<0.05) ；si-Jagged1组的细胞迁移率(0.429±0.011)、侵袭细胞数(130.533±19.379)和血管管腔样结构的形成数(45.333±3.214，)都显著少于Jagged1-NC组的细胞迁移率(0.495±0.025)、侵袭细胞数(252.466±19.231)和血管管腔样结构的形成数(66.000±3.605)，差异有统计学意义( t＝-3.999、-17.297、-7.410， P<0.05)；miR-140-5p组中Jagged1 mRNA的相对表达量(0.434±0.150)显著低于miR-NC组(1.026±0.265)，差异有统计学意义( t＝-3.425， P<0.05)。miR-140-5p组(0.336±0.159)中Jagged1蛋白的表达较miR-NC组(0.900±0.121)降低，差异有统计学意义( t＝-4.901， P<0.01)。 结论:miR-140-5p可抑制ccRCC的进展，miR-140-5p可能下调Jagged1抑制ccRCC迁移、侵袭及血管生成。

目的:探究微小RNA-140-5p(miR-140-5p)通过靶向调控组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)基因表达在胃癌转移中的作用及机制。方法:收集2020年4月至2020年10月齐齐哈尔医学院附属第三医院院胃癌患者手术切除癌组织以及癌旁组织(52例)；细胞实验对象为购买人胃正常上皮黏膜细胞系GES-1和胃癌细胞系MGC-803、SGC-7901和HGC-27。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)以及蛋白质印迹法(Western blot)检测胃癌患者肿瘤组织中HDAC4的表达。在线网站Targetscan预测HDAC4上游调控miRNA。双荧光素酶报告实验验证miR-140-5p和HDAC4的靶向关系。胃癌细胞依据不同转染处理分组为si-NC组、si-HDAC4组、mimic-NC组、miR-140-5p mimic组、inhibitor-NC组和miR-140-5p inhibitor组。采用RT-qPCR检测胃癌细胞miR-140-5p的表达，Western blot检测HDAC4蛋白表达。Transwell实验检测细胞迁移和侵袭；流式细胞术检测细胞凋亡，组间比较采用 t检验。 结果:胃癌组织中的HDAC4的mRNA和蛋白表达高于癌旁组织(1.024±0.099比1.512±0.065；0.916±0.160比1.734±0.289， t＝29.71、17.86，均 P<0.05)。在胃癌细胞中miR-140-5p与HDAC4存在结合位点，双荧光素酶报告实验验证miR-140-5p结合在HDAC4的3’端非编码区(3’UTR)(0.986±0.050比0.436±0.039， t＝15.02， P<0.05)。胃癌细胞中miR-140-5p表达显著低于正常细胞(1.021±0.054比0.362±0.029， t＝18.62， P<0.05)。miR-140-5p mimic组细胞迁移(180.000±5.890比54.000±3.230， t＝32.49， P<0.05)和侵袭(94.000±5.430比43.000±3.420， t＝13.77， P<0.05)能力显著低于mimic-NC组，而凋亡能力显著高于mimic-NC组(11.250±1.560比30.240±3.550， t＝8.48， P<0.05)；miR-140-5p inhibitor组细胞迁移(192.000±6.000比284.000±8.430， t＝15.37， P<0.05)和侵袭(89.000±5.110比153.000±6.990， t＝12.80， P<0.05)能力显著高于inhibitor-NC组，而凋亡能力显著低于inhibitor-NC组(13.200±1.620比5.350±1.000， t＝7.14， P<0.05)。miR-140-5p mimic+Jagged1/FC组细胞迁移(60.000±3.430比196.000±7.230， t＝29.44， P<0.05)和侵袭(48.000±3.750比97.000±4.890， t＝13.77， P<0.05)能力显著高于miR-140-5p mimic+DMSO组，而细胞凋亡能力显著低于miR-140-5p mimic+DMSO组(28.950±3.240比12.050±1.430， t＝8.27， P<0.05)。 结论:胃癌细胞的miR-140-5p上调表达可通过抑制HDAC4/Notch信号轴进而抑制胃癌转移进程。

目的:探讨微小RNA-29b对老年冠心病患者左心室肥厚(LVH)的诊断价值。方法:研究对象为2015年1月至2018年12月于我院心血管内科住院的老年冠心病患者140例，其中以单纯冠心病(无LVH)患者70例作为NLVH组，以冠心病合并LVH患者70例作为LVH组，选择同期于我院进行健康检查的70例老年无冠心病人群为对照组。观察并比较3组人群之间的室间隔厚度(IVSD)、左心室后壁厚度(LVPWD)、微小RNA-29b的相对表达量；分析微小RNA-29b与IVSD、LVPWD的相关性；分析微小RNA-29b对老年冠心病伴LVH患者的诊断价值。结果:3组间IVSD、LVPWD、微小RNA-29b相对表达量比较差异均具有统计学意义( F＝22.838、22.147、114.096，均 P＝0.000)；LVH组IVSD、LVPWD、微小RNA-29b的相对表达量明显高于NLVH组( t＝3.479、3.206、9.852，均 P＝0.000)，也高于对照组( t＝3.904、3.553、10.792，均 P＝0.000)；NLVH组微小RNA-29b的相对表达量明显高于对照组( t＝2.306， P＝0.420)。微小RNA-29b诊断老年人冠心病伴LVH的ROC曲线分析结果显示，Youden指数的最大切入点为0.80，微小RNA-29b诊断老年人冠心病伴LVH的最佳临界值为3.52，诊断LVH的敏感度为91.73%、特异度为88.27%；Pearson相关分析结果显示，微小RNA-29b表达水平与IVSD、LVPWD呈明显正相关关系( r＝0.63、0.61，均 P＝0.000)。 结论:老年冠心病伴LVH患者微小RNA-29b的表达明显升高，微小RNA-29b表达水平与IVSD、LVPWD呈正相关，对老年人冠心病伴LVH诊断具有较高的灵敏度与特异度。

目的:探讨参麦注射液通过调控微小RNA-140-3p(miR-140-3p)对胃癌细胞多药耐药的影响与机制。方法:建立并培养人胃癌耐药细胞株HGC-27/DCF(5-Fu、顺铂和多西他赛)细胞(购自美国细胞培养物收藏中心)，设空白对照组(DCF＋生理盐水)、阴性对照组(DCF＋miR-140-3p inhibitor NC＋生理盐水)、参麦组(DCF＋miR-140-3p inhibitor NC＋参麦注射液)、miR-140-3p抑制剂组(DCF＋miR-140-3p inhibitor＋生理盐水)、参麦＋miR-140-3p抑制剂组(DCF＋miR-140-3p inhibitor＋参麦注射液)。使用荧光定量RT-qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)实验测定miR-140-3p、程序性死亡因子-1(PD-1)、程序性死亡因子配体1(PD-L1)的表达水平；使用细胞计数试剂盒(CCK-8)测定HGC-27/DCF细胞的增殖水平；经细胞经膜联蛋白-V(Annexin V)与碘化丙锭(PI)染色测定细胞凋亡率；细胞侵袭实验(Transwell)实验测定细胞侵袭能力。使用单因素方差分析进行组间比较。结果:GES-1、HGC-27、HGC-27/DCF细胞的miR-140-3p表达水平分别为3.02±0.67、1.04±0.17及0.26±0.08( F＝33.800， P<0.05)、PD-1表达水平分别为0.21±0.04、0.30±0.05、0.59±0.08( F＝33.800， P<0.05)，PD-L1表达水平分别为0.09±0.02、0.16±0.03、0.39±0.05( F＝58.355， P<0.05)；事后两两比较结果显示，miR-140-3p在HGC-27/DCF细胞中的表达水平高于GES-1和DCF细胞，PD-1和PD-L1在HGC-27/DCF细胞中的表达水平低于GES-1和HGC-27细胞，组间差异有统计学意义( P<0.05)。空白对照组、阴性对照组、miR-140-3p抑制剂组、参麦组、参麦＋miR-140-3p抑制剂组的细胞增殖活力分别为0.47±0.03、0.48±0.02、0.30±0.04、0.68±0.11、0.45±0.04( F＝16.565， P<0.05)、细胞凋亡率分别为(8.52±0.75)、(9.02±0.66)、(21.52±4.25)、(3.88±0.55)、(15.63±3.02)%( F＝25.014， P<0.05)；事后两两比较结果显示，空白对照组的细胞增殖活力高于miR-140-3p抑制剂组但低于参麦组，参麦＋miR-140-3p抑制剂组的细胞增殖活力高于miR-140-3p抑制剂组但低于参麦组，组间差异有统计学意义( P<0.05)；空白对照组的细胞凋亡率低于miR-140-3p抑制剂组但高于参麦组，参麦＋miR-140-3p抑制剂组的细胞凋亡率低于miR-140-3p抑制剂组但高于参麦组，组间差异有统计学意义( P<0.05)。空白对照组、阴性对照组、miR-140-3p抑制剂组、参麦组、参麦＋miR-140-3p抑制剂组的细胞侵袭数目分别为162.50±25.20、155.80±18.30、208.80±36.50、123.50±25.60、166.40±18.50( F＝4.228， P<0.05)；事后两两比较结果显示，空白对照组的细胞侵袭数目低于miR-140-3p抑制剂组但高于参麦组，参麦＋miR-140-3p抑制剂组的细胞侵袭数目低于miR-140-3p抑制剂组但高于参麦组，组间差异有统计学意义( P<0.05)。 结论:参麦注射液的作用可以被miR-140-3p抑制剂所拮抗，参麦注射液能够减缓胃癌细胞DCF耐药，其机制可能与miR-140-3p介导的PD-1/PD-L1信号通路有关。

目的:探讨环状RNA（circRNA）在RA PBMCs表达谱的差异及临床意义。方法:收集4例RA患者（T组）及4名健康体检者（C组）静脉血，运用Arraystar circRNA微阵列芯片检测2组PBMCs中circRNA表达谱，应用相关数据库进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）验证表达失调circRNA的表达情况，并对目标circRNA构建circRNA-微小RNA（miRNA）-信使RNA（mRNA）调控网络（即ceRNA网络）。建立受试者工作特征曲线（ROC曲线），对潜在诊断价值进行分析。采用SPSS Statistics 23.0和Graphpad Prism 8.0分析数据，采用两独立样本 t检验分析2组间差异。 结果:①微阵列芯片结果显示，与C组比较，T组PBMCs中异常表达的circRNA共有399个，其中149个上调，250个下调。②生物信息学分析：circRNA与miRNA结合位点预测提示RA中差异表达的circRNA可能通过靶向结合miR-140-5p、miR-338-5p和miR-9-5p等分子影响炎症反应；基因本体论分析发现差异表达的circRNA主要在细胞质、蛋白质结合等方面；京都基因与基因组百科全书通路分析发现涉及的通路多与人体免疫调节相关。③多样本RT-qPCR验证结果显示T组中hsa_circRNA_009012的相对表达量显著高于C组（ t=-4.417， P<0.01），hsa_circRNA_101328的表达水平显著低于C组（ t=-1.042， P<0.01），hsa_cir-cRNA_058230的表达无明显改变（ t=4.691， P>0.05）。④ ROC曲线分析提示hsa_circRNA_009012具有诊断RA的潜在价值（ROC曲线下面积=0.96）。 结论:circRNA在RA患者PBMCs中表达失调，可能参与RA发生发展的调控，其中hsa_circRNA_009012有望成为RA诊疗的新型生物学标志物。

目的:探讨LOC103693069改善骨髓间充质干细胞(BMSCs)缺氧性凋亡的作用和机制。方法:原代细胞提取自SD大鼠，于2020年4月由贵州医科大学实验动物中心提供。采用全骨髓贴壁培养法体外分离培养BMSCs，按不同缺氧浓度，常氧、5%O 2、1%O 2、0%O 2培养48 h，检测确定最佳缺氧浓度。构建LOC103693069慢病毒转染BMSCs，分为4组，BMSCs组，BMSCs+Lv-NC组，BMSCs+Lv-LOC103693069组，BMSCs+Lv-LOC103693069-RNAi组，通过生信分析、荧光素酶实验结合细胞功能实验等评价抗缺氧性凋亡的效果并探讨其机制。多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD- t检验。 结果:鉴定培养BMSCs成骨、成软骨、成脂分化阳性，经检测确定0%O 2培养48 h为造模条件。通过基因芯片检测结合实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)验证，最终确定LOC103693069为目标基因。缺氧处理后检测BMSCs+Lv-LOC103693069组细胞凋亡率[(47.00±1.23)%]低于BMSCs+Lv-NC组[(70.20±1.56)%]，差异有统计学意义( t＝4.56， P<0.05)。通过生信分析预测其下游通路为THY1/Notch设计阻断实验，首先过表达LOC103693069，缺氧处理后细胞凋亡率为[(41.00±1.23)%]，在此基础抑制THY1，导致凋亡率[(74.30±2.13)%]低于过表达LOC103693069组，差异有统计学意义( t＝4.35， P<0.05)。行挽救实验，当抑制LOC103693069细胞凋亡率[(72.60±1.72)%]高于过表达THY1细胞凋亡率[(42.50±1.12)%]，差异有统计学意义( t＝4.12， P<0.05)。随后，通过荧光素酶实验证实LOC103693069和THY1 mRNA 3’非编译区序列(3’UTR)在微小RNA(miR)-140-5p上有相同的结合位点。行细胞功能实验研究也证实了LOC103693069能够调控THY1 mRNA表达水平，但能够被miR-140-5p逆转该调控，证实了LOC103693069竞争性结合miR-140-5p调控THY1/Notch通路。 结论:LOC103693069通过竞争性结合miR-140-5P调控THY1/Notch通路，改善BMSCs缺氧性凋亡。

目的:观察微小RNA(miRNA，miR)-140在软骨细胞中的表达并探讨其临床意义。方法:收集股骨头32例，按照软骨退变情况，分为骨关节炎(OA)组17例，对照组15例。同时收集两组患者临床资料及相关生化指标，采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测两组的miR-140的表达水平，比较两组的临床资料、生化指标和miR-140的表达水平，同时结合相关指标，分析miR-140与其相关性，评估影响miR-140的因素及临床意义。结果:两组患者白细胞、血红蛋白、白蛋白、尿酸、血沉及C-反应蛋白差异无统计学意义，OA组的体重指数(BMI)高于对照组，差异有统计学意义( t＝2.436， P<0.05)。miR-140在OA组的相对表达水平为(0.14±0.03)，低于对照组(1.02±0.23)，差异有统计学意义( t＝-14.892， P<0.05)。相关性分析显示，miR-140与年龄、BMI呈正相关( r＝0.852、0.809， P<0.05)。 结论:miR-140在骨关节炎患者中表达下降并与体重指数及年龄因素明显相关。

目的:探讨微小RNA-140-5p（miR-140-5p）在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）中的表达及其在ESCC细胞增殖和侵袭中的作用。方法:即时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR，qPCR）分析ESCC组织和细胞样本中miR-140-5p的表达。将阴性对照和miR-140-5p类似物转染Eca109和KYSE70细胞，细胞增殖与活性检测试剂盒（CCK-8）和Transwell分别检测转染后细胞的增殖和侵袭能力的变化，双荧光素酶报告实验证实miR-140-5p与葡萄糖转运蛋白1（Glut1）的相互作用，Western blot用来检测转染后Glut1蛋白的表达。结果:GEO数据分析结果表明，ESCC组织中miR-140-5p的表达水平显著低于正常组织，差异均具有统计学意义（ P<0.01）。qPCR结果显示，ESCC组织和细胞中miR-140-5p的表达均显著低于正常组织和正常食管上皮细胞Het-1A，差异均具有统计学意义（ P<0.01）。miR-140-5p的表达与ESCC患者肿瘤的分化程度、TNM分期和淋巴结转移均密切相关，高表达miR-140-5p的ESCC患者生存率显著高于低表达患者，差异具有统计学意义（ P<0.05）。miR-140-5p类似物显著上调Eca109和KYSE70细胞中miR-140-5p的表达，其表达上调显著抑制Eca109和KYSE70细胞的增殖和侵袭能力。双荧光素酶报告实验结果表明，Glut1是ESCC细胞中miR-140-5p的直接作用靶点，其在ESCC组织中表达显著上调，其与miR-140-5p表达呈负相关关系，miR-140-5p类似物显著抑制Eca109和KYSE70细胞中Glut1蛋白的表达。 结论:miR-140-5p在ESCC的发生发展中发挥重要作用，靶向miR-140-5p/Glut1可能成为ESCC患者新的治疗策略。

目的 探讨脓毒症患者预后多基因表达风险模型的构建并评估其预测效能.方法 纳入2019年1月至2022年6月收治的脓毒症患者140例.根据患者住院后28 d死亡情况分为死亡组和存活组;对比两组患者临床资料、实验室指标;采用反转录-荧光定量PCR法测定所有患者外周血微小RNA103(miR103)、Toll样受体2(TLR2)、单个核细胞中信号转导子和转录激活子3(STAT3)、自噬相关蛋白Beclin1基因表达情况;使用多因素Cox回归模型确定脓毒症患者28 d死亡风险的相关因素,通过Ggrisk软件进行风险模型构建,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估模型效能.结果 死亡组在序贯器官衰竭评分(SOFA评分)、年龄及急性生理功能和慢性健康状况Ⅱ评分(APACHE Ⅱ评分)方面与存活组比较差异有统计学意义(P＜0.05).死亡组患者miR103、TLR2、STAT3、Beclin1基因相对表达量与存活组比较差异有统计学意义(P＜0.05).多因素Cox回归分析显示,miR103、TLR2、STAT3、Beclin1基因为脓毒症患者28 d死亡的独立预测因子.ROC曲线分析显示,由上述基因构建的预测风险模型在早期预警28 d死亡方面具有良好的预测价值(AUC=0.964,P＜0.001),敏感度为97.50％,特异度为91.00％.经过比较,由上述基因构建的预测风险模型预测效能显著高于APACHE Ⅱ评分及SOFA评分(均P＜0.001).结论 miR103、TLR2、STAT3、Beclin1基因表达水平对脓毒症患者28 d死亡风险具有一定相关性,构建的多基因表达风险模型能够有效预测脓毒症28 d死亡风险.

目的 探讨血浆miR-205、miR-21 在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者中的表达水平及临床意义.方法 选取2022 年 1-12 月收治的 COPD 140 例,另选取同期体检的健康人群 70 例作为健康组.根据COPD是否进入急性加重期将患者分为急性加重组 63 例与稳定组 77 例.采用荧光定量 PCR 法检测 3 组血浆miR-205、miR-21 水平,采用受试者工作特征曲线评估血浆miR-205、miR-21 对AECOPD发生的预测价值,采用多因素Logistic逐步回归分析探讨AECOPD预后的影响因素.结果 稳定组和急性加重组COPD患者血浆miR-205、miR-21水平均高于健康组,且急性加重组高于稳定组(P<0.05).血浆miR-205、miR-21 联合预测AECOPD发生的曲线下面积大于二者单独预测.死亡组 AECOPD 患者血浆 miR-205、miR-21 水平高于生存组(P<0.05).血浆 miR-205、miR-21高表达及急性生理与慢性健康状况Ⅱ系统评分≥2 分是 AECOPD 患者入院后 28d 死亡的危险因素(P<0.01).结论 AECOPD患者血浆miR-205、miR-21 表达水平明显升高,可作为早期诊断和预后的生物学指标,且二者联合预测AECOPD患者发生的效能更高.