患者，男，42岁，因"乏力伴呼吸困难10余天"于2021年11月11日至当地医院就诊。患者既往体健，无特殊病史。查体：神志清，精神较差，贫血貌，全身皮肤黏膜无黄染，无瘀点、瘀斑，双肺呼吸音粗，未闻及明显干湿啰音，心律齐，各瓣膜未闻及病理性杂音，腹软，无压痛、反跳痛，肝脾未触及，双下肢无水肿。入院后查血常规：WBC 147.7×10 9 /L，HGB 27 g/L，PLT 18×10 9 /L。骨髓象：增生活跃，粒系、红系增生受抑，全片见巨核细胞20个。淋巴细胞占98.5%，其中原始及幼稚淋巴细胞占97.5%，其形态特点：胞体大小不等，核圆形或类圆形，部分细胞可见核切迹，核染色质细腻，核仁清晰或隐匿，胞质量少，染天蓝色。细胞化学染色：MPO：阴性；PAS：7%阳性（细颗粒状）；NBE：阴性。血液肿瘤免疫分型：在CD45/SSC点图上设门分析，原始向CD45阴性延伸的分布区域可见异常细胞群体，约占有核细胞的96%，主要表达HLA-DR、CD10、CD19、CD22、CD34、CD38、CD58、CD123、cCD79a、TdT。染色体核型：46,XY,?t（14;18）（q32;q21）,-16,+mar,inc[2]/46,XY[18]。白血病43种融合基因筛查定性检测：阴性。急性淋巴细胞白血病（ALL）相关46种基因突变分析：检测到PAX5基因移码突变（p.Arg199GlysTer45，48.3%）。明确诊断为急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）。2021年11月17日行VDCP方案化疗，具体为：长春地辛6 mg第1、8、15天，伊达比星20 mg第1、8天，泼尼松30 mg第1~28天，环磷酰胺1.6 g第1、18天。2021年12月7日复查骨髓示形态学完全缓解（CR），微小残留病（MRD）：1.45%，染色体：46,XY,add（5）（q31）,?t（14;18）（q32;q21）,-16,add（16）（p13）,+mar,inc[2]/46,XY[18]。2021年12月23日起行Hyper-CVAD A方案巩固化疗，2022年1月26日于我院复查骨髓发现87%的原始幼稚细胞，提示患者B-ALL复发，同时加做转录组测序（RNA-seq）发现了ZEB2-JAK2融合基因。2022年1月31日行VP方案再诱导化疗，具体为：长春地辛4 mg第1、8天，地塞米松10 mg第1~14天，同时入组了ssCART-19临床试验（U01S0152201）。2022年2月16日复查骨髓：增生明显活跃，原始幼稚细胞占65.5%。该患者明确诊断为伴有JAK2重排的难治复发性Ph样B-ALL。2022年2月21日行FC方案预处理，具体为：环磷酰胺700 mg第1~3天，氟达拉滨70 mg第1~3天。2022年3月3日骨髓象：增生减低，原始幼稚细胞占40%，MRD：42.54%。2022年3月4日回输CD19 +CAR-T细胞，总量为15×10 5/kg。回输第9天出现了细胞因子释放综合征3级反应，予地塞米松、芦可替尼、输注血制品等对症处理后好转。CAR-T细胞回输28 d后复查骨髓示形态学CR，MRD：10.4%。患者因经济原因后续没有选择行造血干细胞移植治疗。2022年5月6日患者外周血涂片发现88%的原始幼稚细胞，流式细胞术提示原始异常细胞约占93%，患者本病再次复发，随访至2022年6月30日，患者于当地医院治疗中，本病仍处未缓解状态。

目的:检测初治多发性大动脉炎（TAK）患者血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，分析其在TAK发病机制中的可能作用。方法:选2020年6月至11月北京协和医院风湿免疫科确诊的初治TAK患者10例，另选与之年龄性别匹配的健康对照者5例，分别通过RNA测序和蛋白质谱技术检测血浆外泌体携带的微小RNA和蛋白，筛选出差异表达的微小RNA和蛋白，并对其进行层次聚类分析、功能、信号通路和结构域富集分析，最终筛选出与血管炎有关的微小RNA和蛋白，探究其在TAK发病机制中的可能作用。统计学采用Fisher精确概率检验或 χ2检验。 结果:TAK患者血浆外泌体携带的差异表达的微小RNA 29个，其中miR-101-3p、miR-122-5p、miR-143-3p、miR-185-3p、miR-192-5p、miR-194-5p、miR-19a-3p、miR-19b-3p、miR-20b-5p、miR-21-5p、miR-22-3p、miR-335-5p、miR-34a-5p、miR-3613-5p、miR-548ad-5p、miR-590-3p、miR-7-5p表达上调，miR-1249-3p、miR-141-3p、miR-199a-5p、miR-199b-5p、miR-200a-3p、miR-200c-3p、miR-204-5p、miR-29c-5p、miR-335-3p、miR-381-3p、miR-4433b-5p、miR-584-5p表达下调。差异表达的蛋白357个，其中236个表达上调，121个表达下调，最终筛选前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白。结论:血浆外泌体携带的miR-34a-5p、miR-200c-3p、miR-143-3p、miR-22-3p、miR-21-5p、前激肽释放酶、激肽原1、桥粒蛋白可能通过调节血管生理过程、炎症反应、自身免疫等过程参与TAK的发病机制，具有作为TAK生物标志物和治疗靶点的潜在作用。

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA) SNHG12靶向微小RNA(miRNA，miR)-199a对肿瘤细胞增殖、侵袭和转移的影响。方法:选取新乡医学院第一附属医院2017年9月到2021年9月手术摘除的123例宫颈癌组织和癌旁组织作为研究对象。荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析宫颈癌组织和癌旁组织lncRNA SNHG12和miR-199a表达水平；宫颈癌Hela细胞随机分为lncRNA对照组、SNHG12 KD组，miRNA对照组和miR-199a。细胞计数试剂盒(CCK-8)和体外移植瘤实验分析两组细胞增殖能力；Transwell分析细胞侵袭能力；体内实验分析细胞淋巴结转移数量；荧光素酶基因报告实验检测lncRNA SNHG12和miR-199a的关系。计量资料比较采用 t检验。 结果:癌旁组织lncRNA SNHG12表达水平(1.25±0.19)明显低于宫颈癌组织lncRNA SNHG12表达水平(2.98±0.23)，癌旁组织miR-199a表达水平(1.49±021)明显高于宫颈癌组织miR-199a表达水平(0.46±0.14)，差异有统计学意义( t＝4.001、3.891， P<0.05)。lncRNA对照组细胞48 h吸光度( A)值(1.95±0.24)明显高于SNHG12 KD组细胞48 h A值(1.33±0.17)，miRNA对照组细胞48 h A值(2.18±0.25)明显高于miR-199a组细胞 A值(1.44±0.27)，差异有统计学意义( t＝3.891、4.019， P<0.05)。lncRNA对照组细胞成瘤体积[(794.54±88.09) mm 3]明显高于SNHG12 KD组细胞成瘤体积[(372.43±34.76) mm 3]，差异有统计学意义( t＝5.309， P<0.05)。lncRNA对照组细胞侵袭数量[(109.43±16.98)个]明显高于SNHG12 KD组细胞侵袭数量[(69.44±7.09)个]，差异有统计学意义( t＝8.129， P<0.05)。lncRNA对照组细胞淋巴结转移数量[(12.43±3.09)个]明显高于SNHG12 KD组细胞成瘤体积[(5.09±2.98)个]，差异有统计学意义( t＝2.891， P<0.05)。miR-199a是lncRNA SNHG12是靶点。lncRNA对照组细胞miR-199a表达水平(1.67±0.23)明显低于SNHG12 KD组细胞miR-199a表达水平(3.91±0.31)，差异有统计学意义( t＝4.190， P<0.05)。 结论:lncRNA SNHG12在宫颈癌组织中呈高表达，通过与miR-199a吸附结合，参与宫颈癌细胞的增殖、侵袭和转移等过程。

目的:探讨微小RNA-199a-3p（miR-199a-3p）通过沉默信息调节因子1（SIRT1）/核因子-κB（NF-κB）通路抑制支原体肺炎发展的作用。方法:80只SPF级BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、miR-199a-3p组及抑制组，每组各20例。除对照组外，通过高载量肺炎支原体菌液连续滴鼻3 d建立支原体肺炎小鼠模型。造模后，各组小鼠均进行尾静脉注射，miR-199a-3p组和抑制组小鼠分别注射agomir液、antagomir液，对照组和模型组小鼠均给予尾静脉注射等量生理盐水。实验结束后处死各组小鼠，各组小鼠均眼球取血，酶联免疫吸附试验检测白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。取各组小鼠肺组织，行HE染色观察肺组织病理改变，实时荧光定量PCR法检测肺组织 miR-199a-3p基因表达水平，Western Blot检测肺组织SIRT1/NF-κB信号通路蛋白表达。 结果:与模型组比较，miR-199a-3p组血清IL-4、IL-6、IL-1β和TNF-α水平均降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。HE染色结果显示，对照组小鼠的肺组织结构基本正常且无肺泡内渗出或炎性反应，其余3组均存在不同程度的肺泡间质增宽、肺泡内渗出以及炎性细胞浸润。与模型组比较，miR-199a-3p组 miR-199a-3p基因表达水平和SIRT1蛋白相对表达水平升高，差异均有统计学意义（均 P<0.05）；NF-κB蛋白相对表达水平降低，差异有统计学意义（ P<0.05）。 结论:miR-199a-3p基因在支原体肺炎小鼠肺组织中表达降低，提高 miR-199a-3p基因表达水平通过抗炎作用对支原体肺炎小鼠肺组织损伤起到保护作用，其作用机制可能与其对SIRT1/NF-κB通路的调控有关。

目的 探讨微小RNA(miR)-199a-5p保护脑缺血后血-脑屏障(BBB)完整性的机制.方法 通过SPF级成年雄性SD大鼠建立永久性大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,48只大鼠随机分为假手术组、模型组、MCAO+miR-199a-5p组和MCAO+miR-199a-5p阴性对照组,每组12只.应用Ludmila Belayev 12分评分法评估大鼠的神经行为学表现;采用Evans蓝染色检测脑缺血后BBB的完整性;免疫荧光染色检测脑缺血后细胞凋亡;Western blotting技术检测claudin-5、磷脂酰肌醇-3激酶调节亚基2(PIK3R2)、p-Akt、Akt和血管内皮生长因子(VEGF)-A的蛋白表达;利用Real-time PCR检测脑缺血半暗带、梗死区miR-199a-5p、claudin-5及VEGF-A表达水平.结果 MiR-199a-5p mimic干预增强MCAO大鼠本体感觉和运动能力.MiR-199a-5p降低脑缺血后PIK3R2的表达,激活Akt信号通路,并增加缺血半暗带中claudin-5和VEGF-A的表达.此外,miR-199a-5p减轻了脑缺血后的炎症.MiR-199a-5p降低脑缺血后BBB渗透性,减少神经细胞凋亡.结论 MiR-199a-5p可降低缺血性脑卒中后PIK3R2的表达,激活Akt信号通路,降低炎性细胞因子的表达,减轻缺血性脑卒中对BBB的破坏.

目的 探讨微小RNA-199a-3p(miR-199a-3p)、E盒结合锌指蛋白 1(ZEB1)对急性冠状动脉综合征(ACS)患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后预后的预测价值.方法 选取 2021年 5 月至 2022 年 5 月秦皇岛市第二医院接收的行PCI术治疗的 113 例ACS患者为观察组,根据观察组患者PCI术后 1 年内是否发生主要不良心血管事件(MACE),分为MACE组 26 例和非MACE组 87 例,同期健康体检者 106 例为对照组.检测血清miR-199a-3p、ZEB1 水平,比较MACE组和非MACE组临床资料,Pearson分析患者血清miR-199a-3p和ZEB1 水平相关性,多因素Logistic分析影响ACS患者PCI术后发生MACE的影响因素,ROC曲线分析血清miR-199a-3p、ZEB1 对ACS患者PCI术后发生MACE的预测价值.结果 与对照组相比,观察组血清miR-199a-3p水平较低,ZEB1 水平较高(t=13.709、25.641,P<0.05);在ACS患者中miR-199a-3p与ZEB1呈负相关(r=-0.421,P<0.05);ACS患者PCI术后较PCI术前血清miR-199a-3p水平高,ZEB1水平低(t=4.820、6.040,P<0.05);MACE组与非MACE组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、左心室射血分数、miR-199a-3p、ZEB1 比较,差异有统计学意义(t=3.310、2.717、3.947、7.068、6.544,P<0.05);LDL-C、ZEB1 水平是ACS患者PCI术后MACE的危险因素,左心室射血分数、HDL-C、miR-199a-3p水平是ACS患者PCI术后MACE的保护因素;miR-199a-3p、ZEB1 联合预测ACS患者PCI术后MACE的曲线下面积为 0.947,优于单独预测(Z=1.970、2.791,P<0.05).结论 ACS患者血清中miR-199a-3p、ZEB1 水平呈负相关,两者均对ACS患者PCI术后MACE有预测价值,两者联合的预测价值更高.

目的 探讨槐角黄酮对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和炎症因子分泌的影响.方法 将乳腺癌细胞BT549分为正常对照(NC)组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、miR-NC组、miR-199a-3p组、高剂量+anti-miR-NC组、高剂量+anti-miR-199a-3p组.采用CCK-8、克隆形成实验评估细胞增殖;采用Transwell法评估细胞迁移和侵袭.采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-199a-3p表达.采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)以及白细胞介素-1β(IL-1β)水平.采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测p-p38MAPK和p-p65蛋白表达.结果 与NC组比较,低、中、高剂量组BT549细胞活力、克隆形成数、迁移数、侵袭数降低,miR-199a-3p表达升高,细胞培养液上清中TNF-α、IL-6以及IL-1β水平降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与miR-NC组比较,miR-199a-3p组BT549细胞活力、克隆形成数、迁移数、侵袭数降低,细胞培养液上清中TNF-α、IL-6以及IL-1β水平降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).与高剂量+anti-miR-NC组比较,高剂量+anti-miR-199a-3p组BT549细胞活力、克隆形成数、迁移数、侵袭数升高,细胞培养液上清中TNF-α、IL-6以及IL-1β水平升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与NC组比较,高剂量组BT549细胞p-p38MAPK和p-p65蛋白表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与高剂量+anti-miR-NC组比较,高剂量+anti-miR-199a-3p组BT549细胞p-p38MAPK和p-p65蛋白表达升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 槐角黄酮可抑制乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和炎症反应,其机制可能是通过上调miR-199a-3p表达、抑制p38MAPK/NF-κB通路实现的.

目的:探讨微小RNA(miR)-199a-3p调控CD4＋T细胞表达，参与肺炎支原体肺炎(MPP)患儿免疫反应及其发病机制。方法:选择2018年1月至2020年12月重庆市第七人民医院收治的500例MPP患儿为研究对象，并将其纳入观察组，将同期在该院进行健康体检的200例儿童纳入对照组。将进行体外试验的THP-1细胞培养后，随机分为miR-199a-3p siRNA组(n＝3，转染miR-199a-3p siRNA)，miRNA mimic组(n＝3，转染miRNA mimic)及未处理组(n＝3，等量RPMI 1640完全培养基处理)，采用外购肺炎支原体(MP)中提取的脂质相关膜蛋白(LAMP)，刺激上述3组THP-1细胞后，进行相关试验。采用独立样本t检验，对观察组及对照组受试儿的外周血单核细胞中miR-199a-3p/U6、CD4＋T细胞比例，以及血清白细胞介素(IL)-6、IL-17、IL-23及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)水平进行统计学比较。采用单因素方差分析及LSD-t检验，对3组THP-1细胞中IL-6、IL-17、IL-23及GM-CSF表达水平进行总体及两两比较。采用Pearson相关性分析法，对LAMP刺激后THP-1细胞中CD4＋T细胞表达水平与miR-199a-3p表达水平的相关性进行分析。本研究经重庆市第七人民医院伦理委员会批准(审批文号：LLH201708-02)。所有受试儿监护人对本研究均知情同意，并签署知情同意书。结果:①观察组患儿外周血单核细胞中miR-199a-3p/U6为0.55±0.12，低于对照组的0.87±0.09；外周血单核细胞中CD4＋T细胞比例，以及血清IL-6、IL-17、IL-23及GM-CSF水平分别为(14.4±3.8)%、(0.52±0.08) ng/L、(36.2±5.1) ng/L、(2.89±0.21) ng/mL、(273.8±30.2) mg/L，均分别高于对照组的(6.7±2.0)%、(0.41±0.09) ng/L、(23.9±5.9) ng/L、(1.56±0.14) ng/mL、(163.3±13.8) mg/L，并且上述差异均有统计学意义(t＝38.44、34.30、9.29、15.56、44.23、66.24，均为P<0.001)。②LAMP刺激后，miRNA mimic组THP-1细胞中IL-6、IL-17、IL-23及GM-CSF表达水平，均分别高于miR-199a-3p siRNA组及未处理组，并且差异均有统计学意义(P<0.05)。③LAMP刺激后，THP-1细胞中CD4＋T细胞相对表达水平与miR-199a-3p相对表达水平呈负相关关系(r＝—0.643，P＝0.003)。结论:miR-199a-3p可能通过调控CD4＋T细胞的表达，参与MPP患儿免疫反应。

目的 探讨基于多个外泌体微小RNA(miRNA)表达水平构建子痫前期(PE)风险模型的可行性,并验证其对PE的预测效能.方法 选择2019年6月—2021年12月建档且孕周≤20周的孕妇1037例作为研究对象,入组后收集所有患者首次建档的一般资料及实验室检查资料.通过qRT-PCR分析所有样本中外泌体miRNA表达情况(包括miR-155-5p、miR-215-5p、miR-203a-3p、miR-199a-5p及miR-125a-3p).而后对所有患者随访至妊娠结束,统计随访期间PE发生情况并根据结果将患者分为PE组及对照组.使用Cox回归分析PE的影响因素,以ggrisk包构建多miRNA风险模型,并采用受试者工作特征(ROC)曲线评估所构建模型对PE的预测效果.结果 截至2022年10月31日随访结束,最终完成随访974例(93.92%).PE组65例和对照组909例.PE组年龄、孕前体质量指数(BMI)、孕12周腰围均大于对照组,吸烟史及饮酒史占比高于对照组(P＜0.05).PE组三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、血小板分布宽度、平均血小板体积、血红蛋白、miR-155-5p、miR-199a-5p、miR-215-5p水平均高于对照组,而促甲状腺激素、miR-125a-3p及miR-203a-3p水平低于对照组(P＜0.05).miR-125a-3p、miR-155-5p、miR-199a-5p、miR-203a-3p及miR-215-5p表达水平为PE发生的独立预测因子(P＜0.05).由上述外泌体miRNA构建的风险预测模型在PE发生方面具有良好的预测价值(AUC=0.998,P＜0.001),敏感度为96.92%(63/65),特异度为 93.94%(854/909).结论 miR-125a-3p、miR-155-5p、miR-199a-5p、miR-203a-3p及miR-215-5p与PE的发生相关,以上述外泌体中5个miRNA构建的PE预测模型效果较好.

目的 探讨长链非编码 RNA NORAD(LncRNA NORAD)、微小 RNA-199a-3p(miR-199a-3p)在食管鳞癌病人血清中的表达,分析其对食管鳞癌的诊断价值.方法 2018年1月～2022年12月间我院收治的食管鳞癌病人286例(食管鳞癌组),记录其临床病理特征,同期纳入健康体检者204例(对照组).采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清LncRNA NORAD、miR-199a-3p表达水平;采用Pearson相关性分析血清LncRNA NORAD与miR-199a-3p表达水平的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LncRNA NORAD、miR-199a-3p表达水平对食管鳞癌的诊断价值.结果 食管鳞癌组血清LncRNA NORAD表达水平高于对照组,miR-199a-3p表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).食管鳞癌病人血清LncRNA NORAD与miR-199a-3p表达水平呈负相关(r=-0.649,P＜0.05).有淋巴结转移、TNM分期为T3～T4期、低分化的食管鳞癌病人LncRNA NORAD高表达、miR-199a-3p低表达比例高于无淋巴结转移、TNM分期为T1～T2期、中/高分化的食管鳞癌病人,差异有统计学意义(P＜0.05).LncRNA NORAD、miR-199a-3p单独及二者联合诊断食管鳞癌的AUC分别为0.817、0.796、0.854.结论 食管鳞癌病人血清LncRNA NORAD高表达,miR-199a-3p低表达,二者表达水平可作为食管鳞癌的辅助诊断指标之一.