目的:分析微小RNA-23a（miR-23a）与磷酸酶及张力蛋白同源物基因（PTEN）调控轴在结直肠癌（colorectal cancer，CRC）LS513细胞中的表达情况，并探讨二者对CRC发生发展的影响。方法:将LS513细胞分为空白对照组（NG组，细胞不做特殊处理）、阴性对照组（NC组，加入5 μl Lipofectamine3000和50 pmol/μl NC）、抑制miR-23a表达组（miR-23a-inhibitor组，转染miR-23a-inhibitor序列）。采用实时荧光定量PCR法检测LS513细胞miR-23a、PTEN mRNA水平；MTT法检测LS513细胞增殖能力；Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力；蛋白质印迹法检测增殖、迁移侵袭及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）通路相关蛋白水平变化。结果:与NG组、NC组比较，miR-23a-inhibitor组LS513细胞中miR-23a水平显著降低（ P<0.05），PTEN mRNA及蛋白表达水平均显著升高（ P<0.05）。MTT法检测结果显示与NG组、NC组比较，miR-23a-inhibitor组增殖抑制率显著升高[（16.62±3.21）% vs（16.65±3.26）% vs（47.55±13.61）%]（ P<0.05），PCNA蛋白表达显著降低（ P<0.05）。与NG组、NC组比较，miR-23a-inhibitor组LS513细胞迁移数[（287.25±58.32）vs（285.37±58.43）vs（136.87±36.53）]、侵袭数[（242.53±50.95）vs（239.87±50.62）vs（103.77±30.06）均显著减少（ P<0.05），且MMP-9、E-cadlerin蛋白表达显著降低（ P<0.05）。与NG组、NC组比较，miR-23a-inhibitor组LS513细胞中p-PI3K/PI3K、p-ATK/ATK蛋白表达量显著降低（ P<0.05）。 结论:抑制miR-23a表达可能上调PTEN基因表达抑制PI3K/Akt通路活化，进而抑制LS513细胞增殖、迁移及侵袭。

目的 探讨舌鳞癌细胞线粒体微小RNA(mitochondrial microRNAs,mitomiRs)的表达,筛选出与化疗耐药相关的mitomiRs.方法 提取舌鳞癌细胞系CAL-27及其顺铂耐药细胞株CAL-27-re的线粒体、细胞质、总细胞RNA,采用高通量miRNA芯片筛选出耐药和亲本细胞中差异表达的mitomiRs,应用qRT-PCR验证在CAL-27和CAL-27-re中表达上调的mitomiRs,并在化疗耐药及敏感的舌鳞癌患者样本中验证表达上调的mit-omiRs.结果 芯片结果显示,在CAL-27和CAL-27-re的线粒体、细胞质和总细胞RNA共6个组分中共检测到263个miRNA,其中共有57个mitomiRs和134个细胞质微小RNA(cytoplasmic microRNAs,cytomiRs);与总miR-NA相比,CAL-27-re细胞中有35个mitomiRs表达上调,CAL-27细胞中有31个mitomiRs表达上调(≥1.5倍).进一步比较分析亲本和耐药细胞中差异表达的mitomiRs,在CAL-27-re细胞中有miR-2392、miR-4462、miR-1290、miR-4449、miR-1268a、miR-1246、miR-371a-5p、miR-3934-5p、miR-4271、miR-513p、miR-664b-3p共11个mi-tomiRs表达上调;而5个表达下调的mitomiRs则分别是miR-188-5p、miR-1973、miR-3653、miR-4499、miR-5787;其他41个mitomiRs在两种细胞株中的表达水平几乎相同.qRT-PCR与miRNAs芯片结果相符合,并且在CAL-27和CAL-27-re中得到验证的11个表达上调的mitomiRs中,有miR-1268a、miR-2392、miR-4462、miR-1290、miR-4449共5个mitomiRs在化疗耐药舌鳞癌临床样本中也同样表达上调.结论 顺铂化疗耐药和敏感的舌鳞癌细胞中存在差异表达的mitomiRs,特异高表达的mitomiRs:miR-1268a、miR-2392、miR-4462、miR-1290、miR-4449可能在舌鳞癌化疗耐药中具有重要作用.

目的 观察结肠癌(CC)组织、细胞中微小RNA-513b-5p(miR-513b-5p)的表达变化,以及miR-513b-5p对CC细胞增殖和迁移的影响,并探讨相关机制.方法 采用qRT-PCR法检测CC组织、癌旁组织和CC细胞株(HCT116、RKO、SW480、LoVo、SW620)、人结肠成纤维细胞(CCD-112CoN)中的miR-513b-5p.将HCT116细胞分为miR-con组(转染miR-con)、miR-513b-5p抑制剂组(转染miR-513b-5p inhibitors);采用CCK-8试剂盒和Transwell实验检测细胞增殖和迁移能力.通过生物信息预测miR-513b-5p在信号传导及转录激活因子3(STAT3)上的结合位点;分别将野生型STAT3(STAT3-WT)质粒、突变型STAT3(STAT3-MUT)质粒和miR-513b-5p mimic、miR-con转染HCT116细胞;用荧光素酶检测试剂盒检测荧光素酶活性,采用Western blotting法检测STAT3蛋白.取部分HCT116细胞,分为miR-con组(转染miR-con)、miR-513b-5p模拟物组(转染miR-513b-5p mimics)、STAT3过表达组(共转染STAT3过表达质粒和miR-513b-5p mimics);采用CCK-8法和Transwell实验检测细胞增殖和迁移能力.结果 CC组织和细胞中miR-513b-5p表达分别低于正常组织和CCD-112CoN细胞(P均<0.01).miR-513b-5p抑制剂组细胞增殖活力和迁移数量均高于miR-con组(P均<0.05).StarBase在线分析数据库显示,STAT3与miR-513b-5p存在结合位点;miR-513b-5p mimics可抑制STAT3-WT组荧光素酶活性(P<0.05),而对STAT3-MUT组荧光素酶活性无显著影响;miR-513b-5p mimics组STAT3蛋白相对表达量低于miR-con组、miR-513b-5p inhibitors组STAT3蛋白相对表达量高于miR-con组(P均<0.01).miR-513b-5p模拟物组细胞增殖活力和迁移数量均低于miR-con组,STAT3过表达组细胞增殖活力和迁移数量均高于miR-513b-5p模拟物组(P均<0.01).结论 miR-513b-5p在CC组织和细胞中低表达,下调miR-513b-5p可促进细胞增殖和迁移;miR-513b-5p通过靶向STAT3起到抑制CC细胞增殖和迁移的作用.