目的 通过使用Galectin-3特异性配体拮抗剂改良柑橘果胶(modified citrus pectin,MCP)对肺动脉高压(PAH)动物模型进行干预,探讨MCP对PAH的治疗效果.方法 SD大鼠随机分为对照组、野百合碱(MCT)组、MCT+生理盐水组(MCT+saline)、MCT+MCP组.MCT组通过皮下注射MCT构建PAH模型,MCT+MCP组在注射MCT后使用MCP溶液灌胃.MCT+saline组在注射MCT后使用生理盐水灌胃.对照组在常规条件下饲养.对各组大鼠进行血流动力学、心脏形态、组织学及蛋白质表达等方面的检测.同时还检测PAH患者与健康对照者血浆中的Galectin-3水平.结果 PAH患者血浆Galectin-3水平较健康受试者显著升高(P＜0.05).MCP能显著降低MCT诱导的PAH大鼠的肺动脉平均压、右室收缩压及大鼠右室/(左室+室间隔)重量比.PAH大鼠肺动脉血管重构明显,MCP能显著减轻PAH大鼠肺动脉血管重构,但MCP并不能减轻Galectin-3在肺血管外膜中的表达.MCP能显著减少PAH大鼠肺组织中的collagen Ⅰ、collagen Ⅲ蛋白含量,但MCP并不能减轻Galectin-3蛋白在PAH大鼠肺组织中的表达.结论 MCP能够减低PAH大鼠的肺动脉压力,显著减轻PAH大鼠的肺动脉血管重构,表明Galectin-3在PAH的发病机制中起重要作用,靶向干预Galectin-3可能为PAH治疗提供新的思路.

目的 探讨D-阿洛糖(D-allose)对小鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)的神经功能恢复、半乳糖凝集素-3(Gal-3)、腺苷一磷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AMPK/mTOR)及部分炎症因子表达的影响.方法 C57BL/6雄性小鼠50只,随机分为对照组(Con组)、假手术组(Sham组)、脑缺血再灌注损伤组(MCAO组)、脑缺血再灌注损伤+D-阿洛糖组(MCAO+D-allose组)及脑缺血再灌注损伤+改良柑橘果胶组(MCAO+MCP组).采用线栓法建立大脑中动脉闭塞/再灌注(MCAO/R)模型.造模成功后对小鼠进行Longa神经功能评分及转棒行走评分;采用TTC染色法观察脑梗死灶体积;通过Western blot及RT-PCR技术检测Gal-3、自噬相关分子的表达水平;免疫荧光技术检测脑组织中Gal-3的分布情况;试剂盒检测TNF-α,IL-8分泌.结果 相较于Con组和Sham组,MCAO模型可增加小鼠神经功能评分(P＜0.01)、增加脑梗死体积(P＜0.01)、上调Gal-3的表达并增强自噬(P＜0.01).给予D-阿洛糖及Gal-3抑制剂MCP治疗后可改善神经功能障碍、减小脑梗死体积(P＜0.01),并降低Gal-3的表达(P＜0.01),抑制AMPK磷酸化,促进mTOR磷酸化,抑制自噬(P＜0.01).结论 D-阿洛糖可有效促进CIRI小鼠神经功能恢复和减小梗死灶体积,其机制可能是通过下调Gal-3的表达进而抑制组织损伤后细胞过度自噬,并减少TNF-α,IL-8等炎性因子释放,从而发挥神经保护作用.

目的 检测改良性柑橘(MCP)对人膀胱癌增殖和生长的抑制作用.方法 MTT检测膀胱癌细胞T24和J82细胞的活性.Western blot检测T24和J82细胞中凋亡蛋白cv Caspase-3和cv PARP以及Galectin-3蛋白的表达水平.建立膀胱癌T24细胞皮下移植瘤裸鼠模型,灌胃MCP后,比较各组肿瘤重量和体积大小,免疫组化的方法检测各组别的增殖蛋白Ki67和凋亡蛋白cv Caspase-3以及Galectin-3蛋白表达水平的差异性.显微镜观察分析结果.结果 MTT结果证实MCP对人膀胱癌细胞T24和J82细胞活力有抑制作用(P＜0.05).Western blot证实浓度为2.0％的MCP组别中膀胱癌细胞凋亡蛋白表达明显增高.灌胃MCP对T24移植瘤荷瘤裸鼠的肿瘤体积和重量均有明显的抑制(P＜0.05),免疫组织化学染色定量分析表示700mg/kg组荷瘤鼠组织内Ki67和Caspase-3证实增殖指数降低(P＜0.05),其潜在靶点Galectin-3表达降低.结论 本课题研究显示MCP对膀胱癌细胞的增殖和存活的显著抑制作用,且Galectin-3表达降低.故MCP作为一种天然的膳食纤维,同样可以作为药物预防和治疗膀胱癌.

目的 探讨半乳糖凝集素-3(Gal-3)诱导血管平滑肌细胞增殖及促进大鼠动静脉内瘘(AVF)狭窄发生的作用,并探讨可能机制.方法 取30只AVF大鼠,随机数字法分为AVF组、柑橘果胶组、联合组,每组10只;另取10只大鼠行假手术,设为假手术组.联合组灌胃柑橘果胶生理盐水溶液(含柑橘果胶0.15 mg/kg),尾静脉注射表皮生长因子[细胞外信号调节激酶(ERK)通路激动剂(EGF)](10 μg/kg);柑桔果胶组灌胃柑橘果胶生理盐水溶液(0.15 mg/kg),尾静脉注射等体积PBS;假手术组、AVF组灌胃等量生理盐水,尾静脉注射等体积PBS.每日1次.干预4周.MTT法检测血管平滑肌细胞增殖能力;ELISA法检测血清炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)]水平;ELISA法检测血管组织转化生长因子-β(TGF-β1)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平;Western blot法检测血管组织p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、p-p38 M APK、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达量.结果 与AVF组比较,柑橘果胶组 24、48、72 h 吸光度值,血清 TNF-α、IL-6 水平,血管组织 TGF-β1、VEGF 水平,p-p38 M APK/p38 M APK、p-ERK1/2/ERK1/2降低(P＜0.05);与柑橘果胶组比较,联合组24、48、72 h吸光度值,血清TNF-α、IL-6水平,血管组织TGF-β1、VEGF 水平,p-p38 MAPK/p38 M APK、p-ERK1/2/ERK1/2 升高(P＜0.05).结论 Gal-3 抑制剂改良柑橘果胶可抑制血管平滑肌细胞增殖及炎症反应,缓解AVF狭窄,并抑制ERK信号通路活性.