皮肤放射性损伤合并创伤称为"皮肤放创复合伤".因其致伤因素复杂多样(除辐射因素外,还存在创伤、烧伤、冲击伤等多重复合伤),具有创面迁延难愈的疾病特点[1-2].因此,皮肤放创复合伤治疗相关的研究一直是创伤和放射医学领域中的热点问题[3].近来研究发现,维生素B12对皮肤创伤,尤其是放射性损伤具有一定改善作用.前期研究发现,损伤性创面吸收维生素B12后可以促进皮肤中RNA的合成,加速伤口愈合,减轻放射性灼伤所致的红斑[4-5].本团队前期针对皮肤放创复合伤开发了复方维生素B12软膏Ⅱ号(商品名:实尔新),然而对复方维生素B12软膏Ⅱ号刺激性与致敏性方面的研究仍有所欠缺.因此,本实验拟在通过观察豚鼠皮肤重复接触复方维生素B12软膏Ⅱ号后机体免疫系统反应在皮肤上的表现,以明确其对豚鼠皮肤的刺激性和致敏性,并评价其临床安全性.

放射损伤合并创伤称为放创复合伤.放创复合伤由于结合放射伤和创伤,具有创口反复溃烂,持久难愈的特点,是难愈性创伤的重点研究对象.动物模型的建立是放创复合伤相关研究的关键环节,合理的动物模型是可靠实验结果的有力保障.本文从辐射类型、动物种类、致伤类型、致伤位置等多方面概述和归纳目前各类放创复合伤动物模型的研究进展,为放创复合伤标准化动物模型的建立、伤情机制研究以及防治功效评估提供科学基础.

背景:放创复合伤主要发生在肿瘤放疗和核辐射事故患者中,由于辐射破坏修复机制导致伤口愈合延迟或延长,目前仍缺乏有效的治疗策略.目的:针对放创复合伤的多种临床症状,制备抗菌、加速愈合和局部麻醉的多功能敷料.方法:以左氧氟沙星、丝素蛋白和盐酸利多卡因为原料,应用3D生物打印技术制备多功能创面敷料.①将多功能敷料分别放置于表面涂有金黄色葡萄球菌、大肠杆菌与铜绿假单胞菌的固定培养板上,37℃孵育过夜,检测抑菌圈直径.②将40只昆明种小鼠随机分单纯创伤组、放创模型组、治疗组、阳性药组,每组10只.放创模型组、治疗组、阳性药组小鼠全身接受60Co γ射线照射,辐射1 h后,在4组小鼠背部各制作1个直径1 cm的全层皮肤缺损创面,单纯创伤组、放创模型组创面涂抹生理盐水,阳性药组创面涂抹三乙醇胺乳膏,治疗组创面覆盖多功能敷料,每隔1 d更换敷料或换药,连续治疗14 d.创面造模后3,7,14 d,检测创面愈合率与血清白细胞介素6水平;创面造模后14 d,获取创面处皮肤组织,进行苏木精-伊红、Masson染色及细胞角蛋白14免疫组化染色.结果与结论:①3D打印多功能创面敷料具有良好的抗菌活性,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌与铜绿假单胞菌的抑菌圈直径分别为(4.15±0.09),(4.18±0.23),(4.35±0.13)cm.②随着造模时间的延长,小鼠创面逐渐愈合,治疗组、阳性药组造模后3,7,14 d的创面愈合率均高于放创模型组(P<0.01,P<0.001),并且治疗组创面愈合率高于阳性药组.随着造模时间的延长,小鼠血清白细胞介素水平呈先升高后降低的趋势,治疗组造模后3,7,14 d的血清白细胞介素水平均低于放创模型组.苏木精-伊红、Masson染色显示,单纯创伤组肉芽肿组织可见炎性细胞浸润,真皮层胶原纤维排列致密;放创模型组表皮层和真皮层正常结构被破坏,可见炎性细胞浸润;治疗组可见正常皮肤黏膜组织,表皮层排列规则紧密,汗腺、毛囊和真皮层胶原纤维排列整齐规则;阳性药组表皮层排列规则紧密,汗腺、毛囊和真皮层胶原纤维排列整齐规则.细胞角蛋白14免疫组化染色显示,治疗组表皮组织厚度低于其他3组(P<0.01,P<0.001).③结果表明,3D打印多功能敷料具有局部麻醉、抗感染、促愈合多重功能.

目的 探讨TSP-1在小鼠皮肤放创复合伤(CRWI)伤口愈合过程中的作用.方法 以TSP-1敲除(KO)小鼠为主要研究对象,以野生型(WT)小鼠作为对照,每组15只,比较WT小鼠与TSP-1KO小鼠皮肤CRWI的伤口愈合情况.取WT小鼠与TSP-1KO小鼠皮肤CRWI建模后第7天的伤口组织进行免疫组化染色以及免疫荧光染色,Western blot分析NF-кB蛋白表达水平,并使用RT-qPCR检测伤口部位炎症细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平,以确定2组小鼠皮肤CRWI伤口部位的炎症反应状态及血管生成情况.结果 与WT小鼠相比,从CRWI建模第3天开始TSP-1KO小鼠皮肤CRWI伤口愈合显著延迟(P<0.05).CRWI建模后第7天TSP-1KO小鼠伤口部位的F4/80巨噬细胞浸润减少(P<0.05),NF-кB蛋白表达水平降低(P<0.01),炎症细胞因子IL-1β和IL-6的表达水平也相对降低(P<0.01),并且伤口部位CD31阳性细胞以及α-SMA阳性细胞数量减少(P<0.05).结论 敲除TSP-1会导致小鼠皮肤CRWI炎症反应减弱,血管生成受到抑制,伤口愈合延迟.

放创复合伤主要见于肿瘤放疗以及核辐射损伤等合并创伤的患者,其突出的问题是创面愈合延迟或经久不愈;放创复合伤伤口难愈的机制复杂,目前的临床治疗手段也有限.本文就放创复合伤创面难愈的机制和治疗进行综述,主要包括细胞衰竭、基质细胞功能障碍、异常胶原沉积、微血管损伤等创面难愈机制以及干细胞治疗、抗氧化治疗、转化生长因子-1(transforming growth factor-β,TGF-β1)的调节、植入生物材料等针对难愈机制的靶向治疗手段,旨在为放创复合伤创面难愈机制及治疗的进一步研究提供参考.

目的:放创复合伤是一种以血管损伤和促炎细胞因子缺乏为特征的难愈性创伤.瘦素(leptin)的直接应用在血管生成和炎症中起着重要作用.本研究构建了一种可持续稳定的leptin表达系统――leptin修饰的人胎盘来源间充质干细胞(HPMSCs/leptin),并探究其对经X射线辐照后的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的成血管潜能及周围炎症的影响和潜在机制.创新点:可持续稳定的leptin表达系统(HPMSCs/leptin)促进受X射线辐照后HUVECs的成血管潜能及外周炎症反应,有助于解决放创复合伤伤口愈合过程中血管损伤和促炎因子缺乏的问题.方法:利用慢病毒载体将leptin基因转染HPMSCs获得HPMSCs/leptin.采用X射线单次照射HUVECs,剂量为20 Gy.细胞迁移侵袭实验技术(Transwell)检测照射后HUVECs的迁移情况.在Transwell体系的基础上,建立HPMSCs与受辐照HUVECs共培养体系.CCK-8比色法测定细胞增殖.酶联免疫吸附法(ELISA)检测促炎细胞因子(粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-1α(IL-1α)、IL-6和IL-8)的分泌.实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测促血管生成因子(VEGF和bFGF)mRNA的表达.蛋白免疫印迹法(western blot)检测核因子 κB(NF-κB)和JAK/STAT信号通路的相关分子表达.结论:可持续稳定的leptin表达系统(HPMSCs/leptin)具有更好的细胞增殖、迁移和成血管潜能.HPMSCs/leptin单独培养和HPMSCs/leptin与受辐照HUVECs共培养体系中,促炎细胞因子的分泌增加与NF-κB和JAK/STAT信号通路的相互作用有关.HPMSCs/leptin可能促进X射线照射后HUVECs的成血管潜能和外周炎症反应.

放射治疗是目前临床恶性肿瘤的主要治疗方法之一,适用于大多数癌症患者.放射治疗结合外科手术已成为多种实体肿瘤的标准局部治疗方法.在四肢软组织肉瘤的治疗中,采用放疗联合外科手术治疗的方法,尽最大可能保留了功能性组织,避免了根治性切除和近端截肢,同时保持局部肿瘤控制率等于或优于单纯根治性手术[1-3].此外,这种联合治疗改善了乳腺癌、软组织肉瘤、直肠癌、头颈癌的术后功能和美容效果[4].然而,术前放射治疗的应用导致了皮肤放射损伤的发生,增加了术后伤口愈合并发症的风险.据报道,在放疗后的皮肤区域进行手术会导致半数以上的软组织肉瘤患者出现并发症,甚至出现迁延不愈的创伤[5-6].这种合并放射损伤的皮肤创伤称为"放创复合伤".放射损伤与创伤合并后,常使放射损伤和创伤两方面均有加重,其创面愈合特点更加迁延复杂,可能形成痒痛难忍、溃烂反复的难愈性创伤[7-9].因此,开发一种能够促进放射合并创伤的特效药物,具有巨大的临床效益与价值.

放射损伤合并创伤称为"放创复合伤",此类伤口在临床上常见于手术切除原发灶后合并放射治疗的癌症患者.因受放射损伤及创伤的双重影响,此类伤口经久不愈是最为突出的治疗难题.该文着重介绍了细胞因子治疗、干细胞治疗、物理治疗、中药治疗等现有治疗方法,并以放创复合伤难愈机制为导向,具体分析了治疗方法的靶向作用与机制,并对靶向治疗方法现存的临床应用问题进行了讨论与展望,旨在为今后放创复合伤靶向治疗的研究提供新思路.

目的 探讨瘦素(leptin)转染的人胎盘间充质干细胞(HPMSCs)对被X射线辐照后的口腔黏膜修复细胞的作用影响,为进一步的临床治疗提供新思路.方法 实验分为转染leptin的HPMSCs组(HPMSCs/Leptin)和转染空载体的HPMSCs组(HPMSCs/NC),将人牙龈成纤维细胞(HGnF)、人口腔角质细胞(HOK)和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)进行单剂量20Gy的X射线照射,Transwell检测3种被X射线辐照后细胞的迁移能力.构建HPMSCs/Leptin或HPMSCs/NC与辐照后HGnF、HOK和HUVEC的共培养体系,通过CCK-8检测被X射线辐照后3种细胞在24 h、48 h、72 h、96 h的增殖活性,ELISA检测被X射线辐照后3种细胞在24 h、48 h、72 h表达炎症因子(人IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、GM-CSF和TNF-α)的水平.结果 HPMSCs/Leptin可促进HUVEC的迁移,抑制HGnF和HOK的迁移.HPMSCs/Leptin能增强辐照损伤后的HOK和HUVEC的增殖能力,但对HGnF的增殖影响不明显.HPMSCs/Leptin能促进HGnF、HOK和HUVEC分泌炎症因子人IL-1α、IL-6、GM-CSF和TNF-α,但对人IL-1β和IL-8的分泌无明显影响.结论 瘦素转染的人胎盘源间充质干细胞HPMSCs/Leptin可通过补充口腔黏膜修复细胞数量、调节炎症反应、促进血管新生等途径,对促进放创复合伤伤口愈合过程发挥一定的积极作用.

目的 应用携带肝细胞生长因子(HGF)基因的质粒(pHGF)对大鼠放创复合伤进行基因治疗,探究其促愈作用.方法 120只SPF级雌性Wistar大鼠按体重随机分为单伤组、伤照组、伤照+阳性药(重组人表皮生长因子外用溶液,金因肽)治疗组(JYT组)和伤照+pHGF治疗组(HGF组),每组30只.大鼠经致伤和照射后建立放创复合伤模型,建模后即刻HGF组在创面一次性给予pHGF质粒,JYT组给予金因肽治疗,伤照组给予等体积的PBS.伤照后3、7、14、21、28和35 d描记伤口面积、检测外周血象和伤口组织羟脯氨酸含量,并进行病理检测和伤口肉芽组织毛细血管计数,研究pHGF对大鼠放创复合伤的促愈作用.结果 伤照后3、28及35 d,大鼠体重及外周血白细胞计数显著降低.伤照后11 d内,HGF组伤口相对面积小于或显著小于伤照组(P<0.05).伤照后7、14 d,HGF组羟脯氨酸含量明显高于JYT组(P<0.05).毛细血管密度结果显示,伤照后3、7 d,HGF组肉芽组织毛细血管密度明显大于伤照组和JYT组(P<0.05);伤照后14 d,HGF组毛细血管密度小于伤照组(P<0.05).病理检测结果显示,HGF组大鼠创面肉芽组织出现较早,成纤维细胞增生活跃,肉芽组织和新生毛细血管均较伤照组丰富,且愈合后期创面角质层生成和再上皮化过程明显较伤照组快.结论 pHGF能有效促进伤口区胶原和毛细血管形成、伤口区肉芽组织生成,以及角质形成细胞增殖,可明显促进大鼠放创复合伤的早期愈合.