目的 观察云南黑松露醇提物对小鼠T 淋巴细胞增殖及免疫功能的影响.方法 将干燥云南黑松露粉末进行乙醇超声提取、乙酸乙酯萃取,水相及乙酸乙酯相部分样品分别采用C18 反相柱、凝胶柱进行分离、浓缩;噻唑蓝(MTT)法检测云南黑松露醇提物对刀豆蛋白A(ConA)刺激小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测云南黑松露醇提物对Anti-CD3 刺激小鼠脾淋巴细胞分泌γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素 2(IL-2)的影响;蛋白印迹(Western blotting)法检测云南黑松露醇提物对小鼠脾淋巴细胞IFN-γ 表达水平的影响;流式细胞术检测云南黑松露醇提物对小鼠脾淋巴细胞CD+3 及CD+4 细胞表达水平的影响.结果 云南黑松露醇提物共分离得到组分 17 个.其中水相部分分离得到组分 8 个,记作1-8;乙酸乙酯相部分分离得到组分9 个,记作A-I.MTT结果显示,在ConA诱导下,F号组分对小鼠脾淋巴细胞具有一定促增殖活性.ELISA结果显示,在Anti-CD3 诱导下,1、F和G号组分可促进小鼠脾淋巴细胞IL-2和IFN-γ分泌.Western blotting结果显示,2、F和G号组分可提高小鼠脾淋巴细胞IFN-γ 表达水平.流式细胞术检测结果显示,G号组分可促进小鼠脾淋巴细胞CD+3T细胞表达,1 和2 号组分可促进小鼠脾淋巴细胞CD+4T细胞表达.结论 云南黑松露醇提物具有促进小鼠脾淋巴细胞增殖的活性成分,可激活T细胞分泌炎症因子IFN-γ和IL-2,提高IFN-γ及CD+3、CD+4 细胞表达,具有一定免疫调节活性.

探究四川凉山彝族自治州块菌主产区华山松内生菌群的结构及多样性.在会东县选取4个点(新田乡、新云乡、淌塘镇、雪山乡)的块菌宿主华山松的根、茎、叶为实验材料,通过不同培养基分离样品根、茎、叶的内生细菌、真菌、放线菌,DNA分子鉴定分离菌株的种属,最终分离得到细菌46株,其中欧文氏菌属(Erwinia)5株,沙门氏菌属(Salmonell)1株,杆菌属(Bacillus)22株,葡萄球菌属(Staphylococcus)2株,假单胞菌属(Pseudomonas)2株,类芽胞杆菌属(Paenibacillus)2株,布丘氏菌属(Buttiauxella)2株,肠杆菌属(Enterobacte)3株,爱文氏菌属(Ewingella)1株,泛菌属(Rahnella)1株,拉恩氏菌属(RahnellaIzard)2株,其他属3株;真菌19株,均为子囊菌门(Ascomycota),其中青霉属(Penicillium)4株,疱霉属(Phoma)l株,子囊菌门未知菌1株,篮状菌属(Cladosporium)1株,分枝孢子菌属(Sydowia)1株,曲霉属(Aspergillus)l株,其他属10株;放线菌33株,为链霉菌属(Streptomyces)22株,短小杆菌属(Curtobacterium)2株,短杆菌属(Brevibacterium)1株,其他属8株.研究结果表明,来自不同地点、不同植株部位、不同培养基分离得到的块菌宿主华山松内生菌有差异,证实微生物在土壤、块菌、宿主植物之间有着复杂的相互作用,为块菌的人工栽培提供参考.

目的 分析测定攀枝花产印度块菌(松露)中香气化学成分的组成和相对含量.方法 采用顶空固相微萃取法萃取攀枝花产印度块菌中的化学成分,利用GC-MS法对块菌中香气化学成分的组成和相对含量进行分析与鉴定.结果 从攀枝花产印度块菌的香气成分中分析鉴定出37种化合物,占挥发性成分的100％,包括醇类、醛类、酮类、烃类及其衍生物等,其中,主要化学成分有异戊醛(55.41％)、正己醛(8.12％)、乙醇(5.14％)、1-辛烯-3-醇(3.62％)、异丁醛(3.27％)、桧烯(3.16％)、(-)-宁酮(2.41％)、苯乙醛(2.14％)、正戊醇(1.78％)、(3E)-3-乙基-2-甲基-1,3-己二烯(1.42％)、(-)-α-侧柏酮(1.22％)、3-辛酮(1.16％)、叔丁基苯(1.07％)和庚醛(1.02％)等.结论 所用方法具有不需要有机溶剂、自动便捷、高效快速、安全环保的特点,为研究与开发攀枝花产印度块菌提供了实验依据.

采用代谢组学技术研究中国块菌(云南黑松露)及其共生云南松的小分子活性代谢产物.运用核磁共振(1H-NMR)和气相质谱(GC-MS)两种技术,分析新鲜中国块菌成熟子实体及松根的代谢成分;将1H-NMR及GC-MS数据导入SMICA-P软件进行多元统计分析,比较二者的差异代谢物.在块菌子实体及松根中分别共检测到了苏氨酸、甘露二糖、延胡索酸、茶碱和表儿茶素等64个及45个化合物,其中松醇、1-环己烯-1-甲酸、谷氨酸、海藻糖、甜菜碱等25种物质具有显著差异,这些差异物质以碳代谢及氮代谢为主.两种方法互为补充,扩大了检测范围.本研究为探明中国块菌与其共生松树的共生机理,为今后中国块菌相关药物的开发及人工培养的研究提供了理论依据.

松露(块菌)是名贵的地下真菌,因其独特的香味和口感享誉全球,具有重要的经济价值、食药用价值和生态价值.块菌必须与宿主植物共生形成外生菌根后才能形成子实体(子囊果).由于块菌具有较高的经济价值而野生块菌资源被严重破坏,以块菌菌根苗制备技术为基础的人工栽培手段受到广泛关注.本文以块菌菌根苗培育为切入点,阐述了块菌资源面临的较大威胁、人工栽培手段的进步和人工种植园的快速发展,通过综述菌根苗培育前对共生组合的选择,菌根苗培育时使用的基质、接种剂、培养方式、与其他生物间的互作,以及菌根苗培育后进行检测的方法等研究进展,为外生菌根食用菌的菌根苗培育技术和人工栽培推广提供参考.