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柴蜕颗粒通过MAPK/Akt/NF-κB信号通路改善气道炎症治疗咳嗽变异性哮喘的药效及机制研究
编辑人员丨2023/10/28
目的 基于丝裂原活化蛋白激酶/蛋白激酶B/核转录因子-κB(MAPK/Akt/NF-κB)信号通路探讨柴蜕颗粒改善气道炎症治疗咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)的药效及作用机制.方法 雄性Hartley豚鼠32只,随机分为正常组、模型组、柴蜕颗粒组[5.3 g/(kg·d)]、孟鲁司特钠组[0.001 g/(kg·d)],每组8 只.除正常组外,其他各组豚鼠肌注4%OVA溶液0.5 mL,同时腹腔注射2%Al(OH)3凝胶0.2 mL建立CVA模型,致敏14 天后雾化吸入1%OVA溶液激发咳嗽症状,同时各给药组连续灌胃14 天进行干预.末次给药后,使用小动物肺功能仪检测豚鼠气道高反应性(airway hyperresponsiveness,AHR);血生化分析仪检测外周血、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中白细胞比例;苏木素—伊红(HE)染色观察肺组织病理学变化;酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测BALF中豚鼠免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)、白细胞介素4(interleukin-4,IL-4)、干扰素 γ(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子 α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素 10(interleukin-10,IL-10)表达水平;蛋白质免疫印迹法(Western blot,WB)检测肺组织中细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)、p-ERK、p38 丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)、p-p38 MAPK、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine protein kinase,Akt)、p-Akt、核因子-κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)、p-NF-κB p65 蛋白表达.结果 与正常组比较,模型组豚鼠咳嗽次数、气道阻力、病理评分显著增高(P<0.05,P<0.01),咳嗽潜伏期显著缩短(P<0.05);BALF中白细胞(white blood cell,WBC)总数、嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)、中性粒细胞(neutrophil,NE)、嗜碱性粒细胞(basophil,BA)总数及比例显著升高(P<0.05,P<0.01);BALF中 IgE、IL-4、TNF-α水平显著增高(P<0.05),IFN-γ、IL-10 水平显著下降(P<0.05,P<0.01);肺组织中 ERK、p38 MAPK 蛋白表达量明显降低(P<0.01,P<0.05),p-ERK、p-p38 MAPK、p-Akt、p65 NF-κB、p-p65 NF-κB 水平显著增高(P<0.05,P<0.01).与模型组比较,柴蜕颗粒组和孟鲁司特钠组CVA豚鼠咳嗽次数、气道阻力、病理评分显著降低(P<0.05,P<0.01),咳嗽潜伏期明显延长(P<0.05,P<0.01);外周血及BALF中WBC、EOS、NE、BA总数及比例显著降低(P<0.05,P<0.01);BALF中IgE、IL-4、TNF-α 含量明显降低(P<0.05,P<0.01),IFN-γ、IL-10 含量明显上升(P<0.05,P<0.01);肺组织中 ERK 蛋白表达量明显增高,p-ERK、p-p38 MAPK、p-Akt、p65 NF-κB、p-p65 NF-κB蛋白表达量显著下降(P<0.05,P<0.01).结论 柴蜕颗粒可有效改善肺功能和咳嗽敏感性治疗咳嗽变异性哮喘,其机制可能与平衡细胞因子表达,抑制MAPK/Akt/NF-κB信号通路活化作用有关.
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编辑人员丨2023/10/28
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古方治疗水痘两案
编辑人员丨2023/8/6
笔者运用中医经典方剂辨治水痘2例,实录如下.1 柴胡桂枝汤、五苓散合麻黄附子细辛汤褚某,女,26岁.2015年11月16日初诊.患者3天前无明显诱因出现发热,体温最高38.8℃,1天前身出现水疱,伴有瘙痒,口服疏风解毒胶囊、双黄连口服液效果不显来诊.现体温37.5℃,偶有头痛,口干多饮,时冷时热,小便黄,乏力,纳呆,汗出,咽痛,大便不成形.躯干、四肢可见散在绿豆大小红斑、水疱,水疱周围有红晕.血常规:单核细胞比率9.74%,单核细胞0.47×109/L.舌淡红、苔薄白,脉沉.辨证属太阳少阳证,方用柴胡桂枝汤合五苓散加减:桂枝、白芍、黄芩、炒莱菔子各12g,柴胡15g,茯苓、猪苓、泽泻各9g,生白术6g.4剂.颗粒剂,日1剂,水冲服.配合炉甘石洗剂外用.2015年11月20日二诊:无新发水疱,原水疱部分结痂,无瘙痒,体温36.8℃,疲乏,口干,纳差,偶有咳嗽,有痰色白,难排出,舌淡、苔薄白,左脉沉、右脉弦.证属阳虚水饮,方用麻黄附子细辛汤加减:麻黄3g,制附子、泽泻各6g,细辛2g,干姜、五味子各1g,炒莱菔子、僵蚕、炒苍术各12g,蝉蜕9g.3剂.服法同上.药后水疱完全结痂,诸证消失,遂停药.
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编辑人员丨2023/8/6
