目的:探讨稀土颗粒物Nd 2O 3暴露对C57 BL/6J雄性小鼠性激素分泌及胆固醇侧链裂解酶（CYP11A1）、减数分裂前精子发生标志物早幼粒细胞白血病锌指蛋白（PLZF）和视黄酸刺激基因（STRA8）蛋白表达的影响。 方法:于2021年3月，将48只6~8周龄雄性C57 BL/6J小鼠分为对照（Control）组和Nd 2O 3低、中、高剂量组（染毒剂量分别为62.5、125.0、250.0 mg/ml Nd 2O 3），每组12只。采用一次性非暴露式气管滴注法对Nd 2O 3组小鼠灌注0.1 ml不同剂量的Nd 2O 3混悬液，对照组灌注等体积的生理盐水。染毒后28 d称量小鼠体重、睾丸及附睾的重量，并计算脏器系数；取两侧附睾制成精子悬液测定精子数量、存活率、畸形率；采用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法检测小鼠睾丸组织中Nd的含量；HE染色检测睾丸组织病理形态学改变并做量化分析；酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组小鼠血清促黄体生成素（LH）、促卵泡生成素（FSH）和睾酮（T）的含量；Western blot法检测睾丸组织中CYP11A1、PLZF和STRA8的表达水平。 结果:与对照组比较，随着染毒剂量的升高，小鼠睾丸内Nd含量呈现升高趋势，精子存活率和LH呈现降低趋势，精子畸形率呈现升高趋势（ P<0.05）；病理学结果显示，Nd 2O 3中、高剂量组睾丸组织生精小管内精子数量明显减少，出现生发上皮解体、上皮内空泡化、生精细胞和支持细胞剥落的现象；随着染毒剂量升高，其生发上皮高度明显降低，受损伤的生精小管所占百分比呈现升高趋势（ P<0.05）；Nd 2O 3中、高剂量组小鼠血清中FSH和T水平，睾丸组织中CYP11A1、PLZF和STRA8的蛋白水平随剂量的升高呈现下降趋势（ P<0.05）。 结论:稀土颗粒物Nd 2O 3可能通过干扰CYP11A1、PLZF和STRA8蛋白的表达，导致体内性激素分泌紊乱、精原细胞的维持及减数分裂过程受阻，引起生殖功能损伤。

[背景]职业和环境颗粒物可引起机体纤维化,并伴随RNA的m6A修饰改变,氧化钕(Nd2O3)可导致小鼠肺部发生纤维化,里面含有大量成纤维细胞.[目的]探讨Nd2O3 引起人胚肺成纤维细胞(HELF细胞)纤维化过程中肿瘤坏死因子受体相关蛋白 6/核因子-κB(TRAF6/NF-κB)信号通路的m6A修饰变化,并确定TRAF6的关键m6A修饰位点.[方法]不同浓度的Nd2O3(0、1.563、3.125、6.25、12.5、25、50、100、200 mg?L-1)染毒HELF细胞24、48 h,检测细胞活力,确定染毒时间及剂量.检测纤维化指标[羟脯氨酸(HYP)、转化生长因子-β1(TGF-β1)]、m6A甲基化水平、甲基化转移酶(METTL3和METTL14)、去甲基化酶(FTO和ALKBH5)、阅读蛋白(YTHDC2和YTHDF2)、纤维化相关基因[Ⅰ型胶原蛋白(collagen-Ⅰ)、波形蛋白(vimentin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]、信号通路相关蛋白(TRAF6、NFKB1、P65、P-P65)等蛋白和基因表达情况.采用RNA甲基化免疫共沉淀-实时荧光定量PCR(MeRIP-qPCR)法检测TRAF6 mRNA中m6A的富集情况.[结果]通过检测细胞活力,确定实验染毒剂量为 6.25、12.5、25 mg?L-1,染毒时间为 48 h.暴露48 h后,相较于对照组,25 mg?L-1 Nd2O3 组HYP的含量升高,6.25、12.5、25 mg?L-1 Nd2O3组TGF-β1的含量均升高(P＜0.05);HELF细胞 12.5、25 mg?L-1 Nd2O3 组总体m6A甲基化的含量升高(P＜0.05);在mRNA水平上,甲基化转移酶METTL3、METTL14(6.25、12.5、25 mg?L-1 Nd2O3 组)的mRNA表达升高(P＜0.05);阅读蛋白YTHDF2(6.25、12.5、25 mg?L-1 Nd2O3 组)的mRNA表达升高(P＜0.05),而YTHDC2(25 mg?L-1 Nd2O3 组)的mRNA表达降低(P＜0.05);去甲基化酶FTO(12.5、25 mg?L-1 Nd2O3 组)和ALKBH5(25 mg?L-1 Nd2O3 组)的mRNA表达降低(P＜0.05);纤维化相关基因 vimentin、α-SMA、collagen-Ⅰ(6.25、12.5、25 mg?L-1 Nd2O3)的mRNA表达升高(P＜0.05);通路相关基因TRAF6(25 mg?L-1 Nd2O3 组)、NFKB1(12.5、25 mg?L-1 Nd2O3 组)的mRNA表达升高(P＜0.05);在蛋白水平上,相比于对照组,甲基化转移酶METTL3(25 mg?L-1 Nd2O3 组)和METTL14(12.5、25 mg?L-1 Nd2O3 组)升高(P＜0.05);阅读蛋白YTHDF2(12.5、25 mg?L-1 Nd2O3 组)升高,而YTHDC2(25 mg?L-1 Nd2O3 组)降低(均P＜0.05);去甲基化酶FTO(25 mg?L-1 Nd2O3 组)降低(P＜0.05);纤维化相关蛋白vimentin在Nd2O3 浓度为25 mg?L-1时升高,α-SMA、collagen-Ⅰ的蛋白相对表达量在Nd2O3 浓度为 12.5、25 mg?L-1 时升高(均P＜0.05);TRAF6和P-P65在Nd2O3 浓度为 25 mg?L-1 时升高(均P＜0.05).MeRIP-qPCR结果显示,相较于对照组,Nd2O3 暴露组的m6A富集比例明显增加(P＜0.05).[结论]HELF暴露于Nd2O3 后,细胞发生纤维化相关指标改变,使得部分m6A甲基化酶表达上升,去甲基化酶表达下降,从而使m6A甲基化上升,并可能通过激活TRAF6/NF-κB信号通路,促进纤维化的进展.

目的 探讨氧化钕颗粒物对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞毒性作用及氧化损伤作用.方法 将处于对数生长期的NR8383细胞,暴露于终浓度为0、3.125、6.25、12.5、25和50μg/ml氧化钕混悬液6、12和24h后,采用MTT法检测NR8383细胞抑制率;终浓度为0、3.125、6.25、12.5、25和50μg/ml氧化钕混悬液暴露24h后,测定细胞培养液上清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的浓度.结果 与对照组比较,各浓度氧化钕暴露不同时间后NR8383细胞的抑制率均较高,差异有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,稀土氧化钕暴露NR8383细胞24h后,12.5、25和50μg/ml染毒组随着染毒剂量增加,LDH水平逐渐升高;50μg/ml染毒组的T-AOC水平和12.5、25和50μg/ml染毒组的SOD水平低于对照组,25和50μg/ml染毒组MDA水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 氧化钕颗粒物暴露可致细胞毒性作用和氧化损伤作用.

目的 研究稀土氧化钕致人支气管上皮细胞(16HBE)炎症反应中circRNA表达变化.方法 以CCK-8法测定不同剂量氧化钕(0、40、60、80、100、120 μg/ml)混悬液分别处理16HBE细胞24 h和48 h后,检测细胞生存率.以ELISA测定不同剂量氧化钕(0、40、60、80、100、120 μg/ml)混悬液处理16HBE细胞48 h后,炎症因子IL-1β和IL-8的表达变化.以80 μg/ml稀土氧化钕颗粒混悬液处理16HBE细胞48 h,以微阵列检测其circRNA表达改变,以荧光定量PCR验证10种明显差异表达circRNA.结果 与对照组相比,氧化钕混悬液分别处理16HBE细胞24 h和48 h后,细胞生存率均明显降低(P＜0.01).与对照组相比,氧化钕混悬液处理48h后IL-1β和IL-8分泌明显增加(P＜0.01).ELISA检测结果发现与对照组相比,氧化钕混悬液处理48h后IL-1β和IL-8分泌明显增加(P＜0.01).基因微阵列结果显示有1263种circRNA表达发生改变,其中上调circRNA有247种,下调有1 016种.与对照组比较,hsa_circRNA_0080083相对表达量下调了53.48％(P＜0.01).不同剂量氧化钕(0～ 120.μg/ml)混悬液处理16HBE细胞后,hs a_c ircR_ NA _008008表达量和氧化钕染毒剂量呈负相关性(r=-0.968,P＜0.001).结论 稀土氧化钕致16HBE细胞炎症反应中,circRNA表达谱发生改变,其中hsa_circRNA _0080083下调明显,且有剂量-效应关系.