目的:探讨稀土氧化钕（Nd 2O 3）致小鼠肺纤维化过程中miR-29a对转化生长因子-β1（TGF-β1）/Smad同源物3（Smad3）通路的调控作用。 方法:于2021年3月，选择SPF级C57/BL6J雄性小鼠72只，随机分为对照组、Nd 2O 3组、Nd 2O 3+miR-29a干预剂（agomir）组、Nd 2O 3+NC agomir组，每组18只。Nd 2O 3组、Nd 2O 3+miR-29a agomir组、Nd 2O 3+NC agomir组采用非暴露式气管滴注法染毒，染尘浓度为250 mg/ml，染尘体积为0.1 ml，对照组给予同体积生理盐水。染尘后，每3天Nd 2O 3+miR-29a agomir组小鼠尾静脉注射0.1 ml（5 nmol）miR-29a agomir，Nd 2O 3+NC agomir组小鼠尾静脉注射0.1 ml NC agomir。染尘后第7、14、28天每组各处死6只小鼠，取小鼠肺组织，HE染色观察小鼠肺组织病理状况；ELISA法检测TGF-β1、结缔组织生长因子（CTGF）含量；qRT-PCR检测TGF-β1 mRNA的表达量；免疫荧光法检测小鼠肺组织中Smad3的表达量，利用TargetScan7、miRDB等网站工具预测miR-29a靶基因。计量资料满足正态分布时用 ± s表示，组间比较用两独立样本 t检验，两两比较方差齐时用 LSD法检验。 结果:HE染色显示，Nd 2O 3组小鼠肺组织初期出现明显的炎症细胞浸润、肺泡结构紊乱，28 d时，小鼠肺组织胶原纤维增多且肺组织呈纤维化蜂窝状变，Nd 2O 3+miR-29a agomir组小鼠肺组织纤维化程度明显减轻；与Nd 2O 3+NC agomir组比较，Nd 2O 3+miR-29a agomir组小鼠肺组织中TGF-β1、CTGF的含量较低，小鼠肺组织中TGF-β1 mRNA的相对表达量较低，细胞核中Smad3表达水平较低，差异均有统计学意义（ P<0.05）。miR-29a相关下游靶基因有152个，其中FBN1、MAP2K6、KPNB1、COL1A2、SNIP1、LAMC1、SP1可能与TGF-β1/Smad3通路的调控有关。 结论:miR-29a可能通过调节TGF-β1/Smad3信号通路影响稀土Nd 2O 3暴露所致的小鼠肺纤维化，过表达miR-29a可能抑制TGF-β1/Smad3信号通路而减轻小鼠肺纤维化程度。

目的:探讨Keap1/Nrf2/HO-1信号通路在氧化钕（Nd 2O 3）致小鼠肝损伤中的作用。 方法:于2021年3月，选取48只SPF级健康成年雄性C57BL/6J小鼠，随机分为对照组（0.9% NaCl）、低剂量组（62.5 mg/ml Nd 2O 3）、中剂量组（125.0 mg/ml Nd 2O 3）和高剂量组（250.0 mg/ml Nd 2O 3），每组12只。各剂量组小鼠采用非暴露式气管滴注法给予Nd 2O 3悬浊液进行染毒，于染尘后35 d处死。称量各组小鼠肝脏重量，计算脏器系数；电感耦合等离子体质谱法检测肝组织中Nd 3+含量；HE染色和免疫荧光观察炎症变化及入核情况；qRT-PCR法检测小鼠肝组织中Keap1、Nrf2和HO-1 mRNA表达水平；Western blotting法检测Keap1和HO-1蛋白表达水平；比色法检测肝组织中过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）活力；ELISA法检测白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量。数据用 ± s表示，组间比较用两独立样本 t检验，多组比较用单因素方差分析。 结果:与对照组比较，中、高剂量组小鼠肝脏脏器系数增大，各剂量组小鼠肝组织中Nd 3+蓄积量均明显增多（ P<0.05）。病理学显示，高剂量组小鼠肝脏肝小叶结构有些许紊乱，肝细胞出现气球样病变，肝细胞索排列紊乱，炎症渗出较明显。与对照组比较，各剂量组小鼠肝组织中IL-1β、IL-6水平均升高，高剂量组小鼠肝组织中TNF-α水平升高（ P<0.05）；与对照组比较，高剂量组Keap1 mRNA及蛋白表达水平均明显降低，Nrf2 mRNA、HO-1 mRNA及蛋白表达水平均明显升高（ P<0.05），Nrf2被成功激活进入核内；与对照组比较，高剂量组的CAT、GSH-Px、T-SOD活力均明显降低（ P<0.05）。 结论:Nd 2O 3在雄性小鼠肝脏中大量蓄积，可能通过激活Keap1/Nrf2/HO-1信号通路，发生氧化应激并引发炎症反应。提示Keap1/Nrf2/HO-1信号通路可能是Nd 2O 3暴露致小鼠肝脏发生损伤的机制之一。

目的:探讨稀土颗粒物Nd 2O 3暴露对C57 BL/6J雄性小鼠性激素分泌及胆固醇侧链裂解酶（CYP11A1）、减数分裂前精子发生标志物早幼粒细胞白血病锌指蛋白（PLZF）和视黄酸刺激基因（STRA8）蛋白表达的影响。 方法:于2021年3月，将48只6~8周龄雄性C57 BL/6J小鼠分为对照（Control）组和Nd 2O 3低、中、高剂量组（染毒剂量分别为62.5、125.0、250.0 mg/ml Nd 2O 3），每组12只。采用一次性非暴露式气管滴注法对Nd 2O 3组小鼠灌注0.1 ml不同剂量的Nd 2O 3混悬液，对照组灌注等体积的生理盐水。染毒后28 d称量小鼠体重、睾丸及附睾的重量，并计算脏器系数；取两侧附睾制成精子悬液测定精子数量、存活率、畸形率；采用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法检测小鼠睾丸组织中Nd的含量；HE染色检测睾丸组织病理形态学改变并做量化分析；酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组小鼠血清促黄体生成素（LH）、促卵泡生成素（FSH）和睾酮（T）的含量；Western blot法检测睾丸组织中CYP11A1、PLZF和STRA8的表达水平。 结果:与对照组比较，随着染毒剂量的升高，小鼠睾丸内Nd含量呈现升高趋势，精子存活率和LH呈现降低趋势，精子畸形率呈现升高趋势（ P<0.05）；病理学结果显示，Nd 2O 3中、高剂量组睾丸组织生精小管内精子数量明显减少，出现生发上皮解体、上皮内空泡化、生精细胞和支持细胞剥落的现象；随着染毒剂量升高，其生发上皮高度明显降低，受损伤的生精小管所占百分比呈现升高趋势（ P<0.05）；Nd 2O 3中、高剂量组小鼠血清中FSH和T水平，睾丸组织中CYP11A1、PLZF和STRA8的蛋白水平随剂量的升高呈现下降趋势（ P<0.05）。 结论:稀土颗粒物Nd 2O 3可能通过干扰CYP11A1、PLZF和STRA8蛋白的表达，导致体内性激素分泌紊乱、精原细胞的维持及减数分裂过程受阻，引起生殖功能损伤。

根据GB3102.8-93《物理化学和分子物理学的量和单位》的规定,现将化学元素和核素符号书写的规范要求介绍如下:①元素或核素的单字母符号均用正体大写,双字母符号首字母正体大写,第二个字母用正体小写.②核素的核子数(质子数)应标注在元素符号的左上角,例如:60Co、2P、99Te、125I等;把核子数标注在元素符号右上角的写法是错误的,例如:N14、Co60等.③离子价态的字符应标注在元素符号的右上角,例如:H+,Cl-,O2-,Mg2+,Al3+,PO43-等,不应写成O-2,O--,Mg+2,Mg++,Al+++,PO4-3等.④激发态的字符(电子激发态用*;核子激发态用正体m,也可用*)标注在元素或核素符号的右上角,例如:110Agm,110Ag*,He*,NO*等.⑤分子中核素的原子数标注在核素符号右下角,例如:H2,FeSO4等.⑥质子数(原子序数)标注在元素符号左下角,例如:82Pb,26Fe等.⑦对于形状相似的元素符号、化合物的化学式符号,书写时应注意区分,如:Co(钴)-CO(一氧化碳);No(锘)-NO(一氧化氮);Ba(钡)-Ra(镭);Nb(铌)-Nd(钕)-Np(镎);HF(氟化氢)-Hf(铪)等.

[背景]职业和环境颗粒物可引起机体纤维化,并伴随RNA的m6A修饰改变,氧化钕(Nd2O3)可导致小鼠肺部发生纤维化,里面含有大量成纤维细胞.[目的]探讨Nd2O3 引起人胚肺成纤维细胞(HELF细胞)纤维化过程中肿瘤坏死因子受体相关蛋白 6/核因子-κB(TRAF6/NF-κB)信号通路的m6A修饰变化,并确定TRAF6的关键m6A修饰位点.[方法]不同浓度的Nd2O3(0、1.563、3.125、6.25、12.5、25、50、100、200 mg?L-1)染毒HELF细胞24、48 h,检测细胞活力,确定染毒时间及剂量.检测纤维化指标[羟脯氨酸(HYP)、转化生长因子-β1(TGF-β1)]、m6A甲基化水平、甲基化转移酶(METTL3和METTL14)、去甲基化酶(FTO和ALKBH5)、阅读蛋白(YTHDC2和YTHDF2)、纤维化相关基因[Ⅰ型胶原蛋白(collagen-Ⅰ)、波形蛋白(vimentin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]、信号通路相关蛋白(TRAF6、NFKB1、P65、P-P65)等蛋白和基因表达情况.采用RNA甲基化免疫共沉淀-实时荧光定量PCR(MeRIP-qPCR)法检测TRAF6 mRNA中m6A的富集情况.[结果]通过检测细胞活力,确定实验染毒剂量为 6.25、12.5、25 mg?L-1,染毒时间为 48 h.暴露48 h后,相较于对照组,25 mg?L-1 Nd2O3 组HYP的含量升高,6.25、12.5、25 mg?L-1 Nd2O3组TGF-β1的含量均升高(P＜0.05);HELF细胞 12.5、25 mg?L-1 Nd2O3 组总体m6A甲基化的含量升高(P＜0.05);在mRNA水平上,甲基化转移酶METTL3、METTL14(6.25、12.5、25 mg?L-1 Nd2O3 组)的mRNA表达升高(P＜0.05);阅读蛋白YTHDF2(6.25、12.5、25 mg?L-1 Nd2O3 组)的mRNA表达升高(P＜0.05),而YTHDC2(25 mg?L-1 Nd2O3 组)的mRNA表达降低(P＜0.05);去甲基化酶FTO(12.5、25 mg?L-1 Nd2O3 组)和ALKBH5(25 mg?L-1 Nd2O3 组)的mRNA表达降低(P＜0.05);纤维化相关基因 vimentin、α-SMA、collagen-Ⅰ(6.25、12.5、25 mg?L-1 Nd2O3)的mRNA表达升高(P＜0.05);通路相关基因TRAF6(25 mg?L-1 Nd2O3 组)、NFKB1(12.5、25 mg?L-1 Nd2O3 组)的mRNA表达升高(P＜0.05);在蛋白水平上,相比于对照组,甲基化转移酶METTL3(25 mg?L-1 Nd2O3 组)和METTL14(12.5、25 mg?L-1 Nd2O3 组)升高(P＜0.05);阅读蛋白YTHDF2(12.5、25 mg?L-1 Nd2O3 组)升高,而YTHDC2(25 mg?L-1 Nd2O3 组)降低(均P＜0.05);去甲基化酶FTO(25 mg?L-1 Nd2O3 组)降低(P＜0.05);纤维化相关蛋白vimentin在Nd2O3 浓度为25 mg?L-1时升高,α-SMA、collagen-Ⅰ的蛋白相对表达量在Nd2O3 浓度为 12.5、25 mg?L-1 时升高(均P＜0.05);TRAF6和P-P65在Nd2O3 浓度为 25 mg?L-1 时升高(均P＜0.05).MeRIP-qPCR结果显示,相较于对照组,Nd2O3 暴露组的m6A富集比例明显增加(P＜0.05).[结论]HELF暴露于Nd2O3 后,细胞发生纤维化相关指标改变,使得部分m6A甲基化酶表达上升,去甲基化酶表达下降,从而使m6A甲基化上升,并可能通过激活TRAF6/NF-κB信号通路,促进纤维化的进展.

目的 探讨氧化钕颗粒物对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞毒性作用及氧化损伤作用.方法 将处于对数生长期的NR8383细胞,暴露于终浓度为0、3.125、6.25、12.5、25和50μg/ml氧化钕混悬液6、12和24h后,采用MTT法检测NR8383细胞抑制率;终浓度为0、3.125、6.25、12.5、25和50μg/ml氧化钕混悬液暴露24h后,测定细胞培养液上清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的浓度.结果 与对照组比较,各浓度氧化钕暴露不同时间后NR8383细胞的抑制率均较高,差异有统计学意义(P＜0.05);与对照组比较,稀土氧化钕暴露NR8383细胞24h后,12.5、25和50μg/ml染毒组随着染毒剂量增加,LDH水平逐渐升高;50μg/ml染毒组的T-AOC水平和12.5、25和50μg/ml染毒组的SOD水平低于对照组,25和50μg/ml染毒组MDA水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 氧化钕颗粒物暴露可致细胞毒性作用和氧化损伤作用.

氧化钕是最重要的稀土氧化物,随着使用量日益增多,其可能产生的毒性已经引起了人们的关注.本文介绍了氧化钕的体内代谢过程、体内外毒性作用以及可能作用机制等的研究进展,提出了现阶段研究的不足,并对今后氧化钕的毒性研究进行了展望.

目的 探讨纳米氧化钕染毒对小鼠中枢神经系统的毒性效应.方法 无特定病原级雌性ICR小鼠随机分为对照组、低剂量组和高剂量组,每组12只.采用滴鼻染毒法,低和高剂量组小鼠分别予剂量为80、160 mg/(kg·d)体质量的纳米氧化钕染毒,对照组予等体积0.9％氯化钠溶液,连续染毒30 d.采用水迷宫实验和跳台实验检测小鼠的空间学习和记忆能力,取大脑海马作苏木素-伊红(HE)染色和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化染色,采用酶标仪检测脑组织中丙二醛(MDA)水平和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力.结果 与对照组比较,低和高剂量组小鼠的逃避潜伏期均延长(P＜0.05),跳台潜伏期均缩短(P＜0.05).各组小鼠大脑海马HE染色均未见明显的病理改变.免疫组化染色结果显示,低、高剂量组小鼠海马星形胶质细胞GFAP蛋白表达均较对照组增加,以高剂量组增加更明显.与对照组比较,低和高剂量组小鼠脑组织中MDA水平均升高(P＜0.05),SOD水平均下降(P＜0.05).结论 纳米氧化钕滴鼻染毒可降低小鼠的学习记忆能力,并可导致海马星形胶质细胞GFAP表达增加,其机制可能与氧化应激有关.

目的 研究稀土氧化钕致人支气管上皮细胞(16HBE)炎症反应中circRNA表达变化.方法 以CCK-8法测定不同剂量氧化钕(0、40、60、80、100、120 μg/ml)混悬液分别处理16HBE细胞24 h和48 h后,检测细胞生存率.以ELISA测定不同剂量氧化钕(0、40、60、80、100、120 μg/ml)混悬液处理16HBE细胞48 h后,炎症因子IL-1β和IL-8的表达变化.以80 μg/ml稀土氧化钕颗粒混悬液处理16HBE细胞48 h,以微阵列检测其circRNA表达改变,以荧光定量PCR验证10种明显差异表达circRNA.结果 与对照组相比,氧化钕混悬液分别处理16HBE细胞24 h和48 h后,细胞生存率均明显降低(P＜0.01).与对照组相比,氧化钕混悬液处理48h后IL-1β和IL-8分泌明显增加(P＜0.01).ELISA检测结果发现与对照组相比,氧化钕混悬液处理48h后IL-1β和IL-8分泌明显增加(P＜0.01).基因微阵列结果显示有1263种circRNA表达发生改变,其中上调circRNA有247种,下调有1 016种.与对照组比较,hsa_circRNA_0080083相对表达量下调了53.48％(P＜0.01).不同剂量氧化钕(0～ 120.μg/ml)混悬液处理16HBE细胞后,hs a_c ircR_ NA _008008表达量和氧化钕染毒剂量呈负相关性(r=-0.968,P＜0.001).结论 稀土氧化钕致16HBE细胞炎症反应中,circRNA表达谱发生改变,其中hsa_circRNA _0080083下调明显,且有剂量-效应关系.

目的 研究稀土纳米氧化钕致16HBE细胞炎症反应中lncRNA表达的变化.方法 以不同剂量纳米氧化钕(0、5、10、20、40、80、160、320μg/ml)处理16HBE细胞24、48和72 h,以CCK-8法测定细胞存活率,以ELISA测定IL-6和IL-8的表达;以10μg/ml纳米氧化钕处理16HBE细胞48 h,以微阵列检测其lncRNA表达,以荧光定量PCR验证10种差异表达明显的lncRNA.结果 与对照组相比,纳米氧化钕分别处理16HBE细胞24、48和72 h后,0、5、10、20、40、80 μg/ml剂量组细胞存活率无明显改变(P＞0.05),160、320 μg/ml剂量组细胞存活率均明显降低(P＜0.01).ELISA检测结果发现与对照组相比,纳米氧化钕处理48和72 h后IL-6和IL-8分泌明显增加(P＜0.01).基因微阵列结果显示有925种lncRNA表达发生改变,其中上调lncRNA有326种,下调有599种.与对照组比较,LOC105373796相对表达量上调到206％(P＜0.01),且胞浆胞核定位显示该基因主要位于细胞核中表达.结论 纳米氧化钕致16HBE细胞炎症反应中,lncRNA表达谱发生改变,其中LOC105373796上调明显,可能发挥促炎作用.