目的:探讨食品添加剂苯甲酸钠(NAB)是否通过苯甲酰化(Kbz)修饰途径诱导胰腺炎症和β细胞凋亡。方法:体内实验：C57BL/6J雄性小鼠(8周龄、18～20 g)分为正常对照组(双蒸水饲喂)、NAB喂水组(1 g/kg NAB溶液饲喂)，检测血糖，20周后处死，ELISA法检测空腹血清胰岛素、白细胞介素(IL)-18、IL-1β和苯甲酰辅酶A水平，胰腺免疫组化检测Bax、IL-18、泛苯甲酰化(Pan-Kbz)和泛乙酰化(Pan-Kac)。体外实验：培养β-TC-6细胞，NAB(6 mmol/L)或苯甲酰辅酶A(100 μmol/L)作为刺激因子，以酰基转移酶P300抑制剂A485(10 μmol/L)作为干预因子，24 h后行qRT-PCR、ELISA和Western blotting检测细胞炎症、凋亡、胰岛素分泌和Pan-Kbz水平。结果:体内实验中，与正常对照组相比，NAB组小鼠糖耐量受损、空腹胰岛素水平降低，血清苯甲酰辅酶A浓度明显升高，胰腺IL-1β、IL-18、Bax蛋白表达相对增高，Pan-Kbz水平升高，而Pan-Kac水平下调(均 P<0.05)。体外实验中，NAB浓度依赖性抑制胰岛素分泌，促进Pan-Kbz和炎症因子IL-18、肿瘤坏死因子(TNF)-α释放，抑制Bcl-2表达、上调Bax表达。A485逆转NAB诱导的Pan-Kbz修饰，改善NAB诱导的炎症和凋亡，促进胰岛素分泌(均 P<0.05)。 结论:NAB可能通过Kbz修饰途径诱导胰腺炎症、β细胞凋亡并损害胰岛素分泌功能。

目的:富集裸鼠乳腺癌移植瘤中的乳腺癌干细胞并进行分选。方法:将人乳腺癌MDA-MB-231细胞接种于20只裸鼠右侧腋窝皮下，观察肿瘤的生长情况，30 d后剥离肿瘤，对组织进行HE染色，并从组织中分离出肿瘤细胞。用含血清的DMEM培养液培养分离出的移植瘤细胞，观察移植瘤细胞的形态及生长情况；应用流式细胞分选仪检测移植瘤细胞中干细胞（CD44 + CD24 -/low细胞）比例。用含表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和B27细胞培养添加剂的无血清DMEM培养液培养移植瘤细胞，获得细胞微球体；应用流式细胞分选仪检测培养第10天微球体中干细胞比例，并根据细胞表面标志分选出干细胞。 结果:20只裸鼠皮下注入MDA-MB-231细胞9 d后，17只皮下出现肿瘤，肿瘤组织实质细胞多，间质少，瘤细胞呈条索样排列，细胞体积大，胞质丰富，细胞核大小不一，深染，核分裂象多见，核仁清晰，多形性明显。用含血清的DEME培养液培养移植瘤细胞24 h后，细胞开始贴壁，3 d后贴壁率达60%，7 d后细胞增殖加快，细胞形态更趋于一致，多呈梭形，和MDA-MB-231细胞形态无明显差异，其中干细胞比例为（0.10±0.02）%。用含细胞培养添加剂的无血清培养液培养移植瘤细胞后，细胞呈球样生长，第10天微球体中干细胞比例为（70.47±2.03）%。结论:裸鼠皮下接种MDA-MB-231细胞能建立裸鼠乳腺癌异位移植瘤模型，分离出的移植瘤细胞经无血清培养能富集移植瘤中的乳腺癌干细胞，从而能分选出更多乳腺癌干细胞，为研究乳腺癌干细胞生物学特性提供基础。

随着全球环境变化，饮食与生活习惯和结构改变，各种食品添加剂的广泛使用，室内装修材料的更迭换代，由此引发的各种过敏性疾病逐年增加，给患者家庭和个人造成了严重的伤害。过敏性疾病的病因复杂多样，医学实验室常较难明确过敏原种类，给临床治疗和疾病预防及控制造成很多困扰。为了明确过敏原种类并及时避免与之接触，去除病因，除了询问病史、观察临床表现外，过敏原检测成为辅助诊断过敏性疾病的重要手段。

随着塑料制品在全球的大量使用,塑料污染日趋严重,由塑料破碎形成的塑料颗粒近年来受到广泛关注.塑料颗粒的来源多种多样,可以通过呼吸道吸入、消化道摄入、皮肤直接接触等方式进入人体,再通过氧化应激、炎症反应等机制对人体多个系统造成影响;另外,塑料颗粒还可与添加剂、重金属、细菌、病毒等有毒污染物共暴露,对人体产生影响.文章从塑料颗粒的定义、来源、进入人体的方式、检测方法以及对人体各个系统的影响进行总结,为后续防治塑料污染以减少塑料颗粒对人体的有害影响提供思路.

目的 探索常见试剂红细胞添加剂中糖类物质和金属离子螯合剂成分对双花扁豆凝集素(Dolichos Biflorus Agglutinin,DBA,又称抗-A1)与A1红细胞间血清学反应凝集强度的影响,为减少临床检测假阴性结果和凝集素功能特性研究提供数据支持,也为当前实验室A1抗原鉴定质控实验提出改进方案.方法 以生理盐水为基础红细胞稀释液,在反应体系中分别加入梯度稀释的糖溶液(葡萄糖、蔗糖、甘露醇)和棋盘滴定的强金属离子螯合剂(EDTA-Na2)和二价金属阳离子(Ca2+、Mg2+),对不同反应条件下DBA-A1红细胞凝集强度进行评估.结果 在DBA-A1红细胞反应体系中CEDTA-Na2＞0.6 mM时出现了明显的凝集抑制现象,提高CCa2+或CMg2+可减弱高浓度EDTA-Na2对DBA-A1红细胞凝集强度的影响;另一方面,体系中糖类物质浓度的增高也使DBA-A1红细胞凝集强度产生明显减弱,加入0.6%～5%葡萄糖溶液,1.3%～10%蔗糖溶液或5%甘露醇溶液时,DBA-A1红细胞凝集明显减弱.结论 红细胞添加剂中的EDTA-Na2和糖类物质对-A1红细胞反应存在凝集抑制,是血型血清学检测中植物凝集素制剂使用的重要干扰因素.

目的 了解北京市中小学生尿液中5种食品添加剂的内暴露水平.方法 2016年9月,在北京2个区的中小学收集900份学生尿液样本,采用液相色谱-串联质谱法测定5种食品添加剂(苯甲酸、安赛蜜、甜蜜素、糖精和4-己基间苯二酚)含量,按照年龄组计算每日估计摄入量(EDI),并评估其存在的健康风险.结果 全部尿液样本中均检测到甜蜜素和糖精,96.3％的样本中检测到安赛蜜.甜蜜素的中位浓度(4788.5 ng/mL)明显高于其他4种食品添加剂(苯甲酸235.9 ng/mL,安赛蜜92.6ng/mL,糖精84.1 ng/mL,4-己基间苯二酚7.6 ng/mL).7～12岁学生尿液中苯甲酸浓度极显著高于13～17岁年龄组的学生(P＜0.001);13～17岁年龄组学生尿液中安赛蜜、糖精和4-己基间苯二酚浓度极显著高于7～12岁学生(P＜0.001);13～17岁年龄组女生尿液中糖精浓度极显著高于同年龄组男生(P＜0.001).5种食品添加剂的中位EDI分别为:苯甲酸3.48 μg/kg·BW/d、安赛蜜1.36 μg/kg·BW/d、甜蜜素69.01 μg/kg·BW/d、糖精1.22μg/kg·BW/d、4-己基间苯二酚0.11 μg/kg·BW/d.结论 本研究中北京市中小学生广泛暴露于5种食品添加剂,部分高暴露儿童甜蜜素EDI高于每日允许摄入量(ADI),存在一定的健康风险,其他4种添加剂暴露水平远低于ADI,总体处于安全水平.

本研究利用代谢组学筛选抗性水稻中有活性的代谢物质,为开发控制褐飞虱Nilaparvata lugens的绿色植物源农药开拓思路.基于水稻品种对褐飞虱有抗性的差异,采用生长发育和存活率比较方法,验证了水稻品种Mudgo和TN1对褐飞虱的抗性差异;通过代谢组学分析抗褐飞虱水稻Mudgo和感褐飞虱水稻TN1代谢物的不同,筛选了品种间有显著差异的物质β-谷甾醇和无显著差异的物质豆甾醇作为褐飞虱生测物质,进行存活率和适合度功能验证,明确其对褐飞虱的功能效应.褐飞虱在Mugdo和TN1两种水稻品种上的生命参数间存在显著差异,在Mudgo水稻上发育历期延长,体重、体长和存活率降低.代谢组学分析共检测到69种差异代谢物,主要为脂质(36％)、碳水化合物(23％)、氨基酸(19％)、次生代谢物质(14％)、核酸(6％)及其他物质(1％)等6大类物质.褐飞虱人工饲料添加剂生测数据显示,褐飞虱取食20.0 μg/mL和500.0 μg/mL浓度β-谷甾醇,雌虫体重显著降低;取食500.0 μg/mL浓度β-谷甾醇,雄虫体重显著降低.此外,取食不同浓度豆甾醇对褐飞虱体重均无显著性影响.β-谷甾醇对褐飞虱的存活率有显著降低作用,而豆甾醇只有在4.0 μg/mL、100.0 μg/mL和500.0 μg/mL浓度下有降低作用.确认了水稻品种Mudgo对褐飞虱有显著的抗性,可显著降低存活率,抑制生长.代谢组学筛选到的69种差异代谢物可作为抗褐飞虱绿色植物源农药的备选库;其中,差异显著的代谢物质β-谷甾醇对褐飞虱体重和存活率有显著降低作用,可作为防治褐飞虱的植物源农药.

目的 探讨糖尿病肾病(DN)大鼠原代肾小管上皮细胞(RTECs)的提取及体外培养方法.方法 取SD雄性大鼠25只,随机分为正常组(n=5)和模型组(n=20).对模型组大鼠构建DN大鼠模型,不给予正常组任何处理.获取两组大鼠双肾组织,一部分组织用于HE染色及Masson染色以观察肾组织结构,另一部分用于RTECs的提取及培养.RTECs的提取、培养方法:将肾皮质组织在80目筛网上研磨,经100目筛网过滤、Ⅰ型胶原酶消化25 min后,使用含10％胎牛血清、1％胰岛素-转铁蛋白-硒-乙醇胺添加剂和1％青链霉素双抗溶液的DMEM/F-12完全培养基培养细胞.用免疫荧光染色法检测细胞角蛋白18的表达情况以鉴定所获得的细胞.结果 (1)建模后模型组大鼠出现多饮、多食、多尿、体重下降、血糖升高等特征,尿蛋白定性呈阳性,肾组织病理检测提示肾小球结构不完整且出现明显缺损,RTECs明显肿胀、变性,肾小管管腔萎缩,肾小管间质纤维化严重.(2)培养72h后,两组RTECs均已经贴壁并呈岛屿状聚集生长,培养5～8d后细胞呈多边鹅卵石样.模型组RTECs高表达细胞角蛋白18,阳性率＞95％.结论 采用在80目筛网上研磨、100目筛网过滤、Ⅰ型胶原酶消化25 min的方法可以得到数量较多、活性良好、纯度较高的DN大鼠模型RTECs,且在形态与贴壁情况方面与正常大鼠RTECs无明显差异.

目的 探讨白细胞介素33(IL-33)介导M2巨噬细胞在口腔黏膜上皮-间充质转化(EMT)中的相关作用机制.方法 将25只雄性BALB/c小鼠分为口腔黏膜成纤维化(OSF)组(20只)和对照组(5只).OSF组通过槟榔碱刺激建立OSF小鼠模型,对照组使用PBS注射液在相同部位给药.观察口腔黏膜组织巨噬细胞表型、IL-33以及转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad通路表达水平;培养人口腔黏膜细胞并与M2巨噬细胞相互作用体外模型,使用IL-33添加剂和TGF-β受体抑制剂,观察EMT标志物表达水平.结果 HE染色和Masson染色证实了口腔黏膜纤维化模型建立成功,与对照组比较,OSF组口腔黏膜组织中E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平降低,波形蛋白(Vimentin)表达水平升高(均P＜0.05).此外,观察到IL-33和TGF-β水平升高以及TGF-β1/Smad通路激活,巨噬细胞在口腔黏膜组织中聚集且表型为M2巨噬细胞.与空白对照组比较,IL-33组E-cadherin水平降低,Vimentin的表达增高(均P＜0.05);LY-2109761+IL-33 组与 IL-33 组相比,E-cadherin 的表达增高,Vimentin 的水平降低(均 P＜0.05).Western blot 检测TGF-β、p-Smad2和Smad2的表达水平提示,与IL-33组相比,LY2109761+IL-33组IL-33对TGF-β有促进作用(P＜0.05);IL-33组与空白对照组相比,p-Smad2水平显著提高(P＜0.05);LY-2109761+IL-33组与IL-33组相比,p-Smad2水平显著降低(P＜0.05).结论 IL-33通过介导M2巨噬细胞调控TGF-β1/Smad通路促进口腔黏膜上皮间质转化.

纳米金具有良好的生物相容性和独特的光学性质,可与生物和有机分子结合,形成功能化的纳米金.基于这些特性,纳米金在食品安全检测方面有着广泛的应用.本文综述了纳米金在食源性致病菌、生物毒素、重金属离子、药物残留、食品添加剂及非法添加物和其他食品有害因子检测中的应用实例,并对纳米金在食品安全检测方面的应用进行了展望.