目的:构建荷载第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶（PTEN）基因的溶瘤腺病毒验证其在前列腺癌中表达水平及靶向抗肿瘤效果。方法:挖掘公开数据库和利用Galaxy在线工具处理本中心去势抵抗性前列腺癌（CRPC）标本基因测序数据，分析PTEN基因在前列腺癌组织中的表达差异。收集2019年3月至2022年8月徐州医科大学附属医院79例前列腺癌患者的病理样本和临床信息，免疫组织化学法检测前列腺癌组织及癌旁组织中PTEN蛋白的表达。同源重组法构建溶瘤腺病毒ZD55-PTEN，细胞计数试剂盒（CCK-8）法、Hoechst-33258和划痕实验检测其靶向抗肿瘤效果。分别采用卡方检验和 t检验对定性资料和定量资料进行统计分析，不满足正态分布的数据采用Mann-Whitney U检验；Spearman分析PTEN表达水平与临床病理特征的关系。 结果:前列腺癌组织中PTEN表达水平明显低于癌旁组织，差异有统计学意义（501例比52例， Z＝－19.25， P<0.05）；PTEN的mRNA表达水平与淋巴结转移（ n＝425， rs＝－0.98， P<0.05）和Gleason评分（ n＝497， rs＝－1.25， P<0.05）呈负相关。CRPC阶段PTEN缺失明显高于激素敏感性前列腺癌（HSPC）阶段（79例比125例， Z＝－0.89， P<0.05）。前列腺癌组织的PTEN蛋白缺失率高于癌旁组织（45.6%比16.5%， t＝10.98， P<0.01），术前血清PSA水平（ n＝79， rs＝－0.47， P<0.01）和术后Gleason评分（ n＝79， rs＝－0.31， P<0.05）与PTEN的表达呈负相关。PTEN缺失的前列腺癌患者，确诊时PSA水平（36例比43例， χ2＝12.22， P<0.05）和根治术后Gleason评分（36例比43例， χ2＝6.92， P<0.05）显著高于PTEN蛋白完整患者。成功构建溶瘤腺病毒ZD55-PTEN，ZD55-PTEN组细胞存活率低于对照组[ZD55-EGFP组（49.67±4.19）%、ZD55-PTEN组（29.33±3.84）%， t＝8.68， P<0.05]；细胞凋亡率高于对照组[PBS组（12.86±5.23）%、ZD55-EGFP组（48.18±4.22）%、ZD55-PTEN组（68.93±5.88）%， t＝5.90， P<0.05]；划痕愈合率低于对照组[PBS组（79.13±3.98）%、ZD55-EGFP组（61.02±4.73）%、ZD55-PTEN组（47.92±5.97）%， t＝6.34， P<0.05]。 结论:PTEN基因低表达于前列腺癌组织中，且具有抑制DU145细胞的增殖、迁移并诱导凋亡的功能。

胰腺癌预后较差，被称为"癌中之王"。目前，其治疗手段多样，从最初闻名世界的Whipple术，到联合化疗、新辅助放化疗，再到新兴的免疫检查点抑制剂等，但各种治疗方法都有一定的局限性。近几十年来，胰腺癌的总体生存率未有明显改善。随着对肿瘤免疫的深入研究，肿瘤免疫治疗逐渐成为肿瘤治疗的焦点。而溶瘤病毒疗法作为一种新颖的免疫治疗理念，其安全性和有效性正在逐渐被学者接受。溶瘤病毒可以特异性地感染并裂解肿瘤细胞，不仅可依靠自身复制直接裂解肿瘤细胞，还能通过裂解肿瘤细胞释放免疫分子和肿瘤抗原，在不损伤正常组织的情况下进一步增强人体对肿瘤的免疫杀伤作用。此外，通过基因编辑技术可使溶瘤病毒表达丰富的外源性目的基因，进一步可加强溶瘤病毒的抗肿瘤效应。由于胰腺癌微环境的复杂性，溶瘤病毒单一疗法效果有限，联合治疗已显示出良好的临床应用前景。相对于其他肿瘤免疫疗法，溶瘤病毒疗法具有杀伤效率高、靶向性好、不良反应小、多种杀伤肿瘤途径避免耐药性和成本低廉等诸多优点，有望成为理想的肿瘤治疗新方法。笔者综合国内外相关研究和临床试验结果，对溶瘤病毒疗法的发展、相关溶瘤病毒的治疗机制及其在胰腺癌中的治疗进展进行综述。

目的:观察荷载精子相关抗原9(SPAG9)基因短发卡RNA(shRNA)的溶瘤腺病毒ZD55-SPAG9联合放疗对前列腺癌LNCaP细胞的治疗作用并初步探讨其机制。方法:将前列腺癌LNCaP细胞分为4组，分别为磷酸盐对照组(PBS组)、放疗组(10 GY)、病毒组[ZD55-SPAG9，10感染复数(MOI)]、联合组(ZD55-SPAG9＋放疗，5 MOI＋5 GY)；细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组LNCaP细胞增殖能力的变化；Hoechst-33258染色法检测各组细胞的凋亡；Transwell迁移及侵袭实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力；蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞SPAG9蛋白、凋亡相关蛋白及侵袭相关蛋白的表达。两组间差异的比较采用独立样本 t检验，多组间差异比较采用One-way ANOVA分析。 结果:CCK-8结果显示，联合组LNCaP细胞的存活率为(46.02±2.20)%、病毒组为(56.83±2.40)%( t＝12.855， P<0.01)、放疗组为(64.12±2.23)%( t＝22.389， P<0.01)、PBS组为(99.63±2.72)%( t＝59.407， P<0.01)，各治疗组的细胞存活率均低于PBS组，差异有统计学意义( F＝1407.384， P<0.01)，联合组与单一治疗组比较，LNCaP细胞的存活率更低。Hoechst-33258染色实验结果显示，联合组LNCaP细胞的凋亡率为(55.80±1.49)%、病毒组为(36.42±1.78)%( t＝－32.295， P<0.01)、放疗组为(30.01±1.80)%( t＝－42.814， P<0.01)、PBS组为(9.30±1.53)%( t＝－84.343， P<0.01)，各治疗组的细胞凋亡率均高于PBS组，差异有统计学意义( F＝2 010.396， P<0.01)，联合组与单一治疗组比较，LNCaP细胞的凋亡更加明显。Transwell迁移和侵袭实验结果显示，(1)迁移实验：联合组迁移细胞数为(102.60±16.03)个、病毒组为(163.67±11.00)个( t＝12.166， P<0.01)、放疗组为(206.47±17.05)个( t＝17.192， P<0.01)、PBS组为(304.73±17.16)个( t＝33.345， P<0.01)，各治疗组迁移细胞数均少于PBS组，差异有统计学意义( F＝450.498， P<0.01)，联合组迁移细胞数明显少于单一治疗组；(2)侵袭实验：联合组侵袭细胞数为(90.93±13.91)个、病毒组为(145.33±15.31)个( t＝10.184， P<0.01)、放疗组为(191.33±13.32)个( t＝20.187， P<0.01)、PBS组为(295.47±19.00)个( t＝33.645， P<0.01)，各治疗组侵袭细胞数均少于PBS组，差异有统计学意义( F＝467.586， P<0.01)，联合组侵袭细胞数明显少于单一治疗组。Western blot实验结果显示，联合组、病毒组、放疗组、PBS组内，SPAG9蛋白相对表达量分别为0.41±0.07、0.81±0.13、1.41±0.17、1.98±0.10，各治疗组SPAG9的相对表达量均低于PBS组，差异有统计学意义( F＝98.785， P<0.01)，联合组内SPAG9表达明显低于单一治疗组，差异有统计学意义( t＝4.868、9.603， P<0.01)；凋亡相关蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-8在联合组、病毒组、放疗组、PBS组内相对表达量分别为1.51±0.11、1.26±0.05、1.11±0.07、0.64±0.10，各治疗组内Caspase-8的表达高于PBS组，差异有统计学意义( F＝56.728， P<0.01)，与单一治疗组比较，联合组内Caspase-8的上调更加显著，差异有统计学意义( t＝－3.713、－5.499， P<0.05)；侵袭相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)在联合组、病毒组、放疗组、PBS组内相对表达量分别为(1.44±0.05、0.26±0.06)、(1.23±0.05、0.56±0.01)、(0.91±0.06、0.79±0.07)、(0.25±0.04、1.21±0.07)，各治疗组内E-cadherin表达高于PBS组，Vimentin表达低于PBS组，差异有统计学意义( F＝287.276、138.020， P<0.01)，与单一治疗组比较，联合组内E-cadherin的上调和Vimentin的下调更加显著，差异有统计学意义( t＝－5.017、8.386， P<0.01； t＝－10.982、10.034， P<0.01)。 结论:ZD55-SPAG9联合放疗可以显著抑制LNCaP细胞的增殖、迁移和侵袭能力，并促进其凋亡，效果优于单一治疗；机制可能是上调Caspase-8诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤细胞的上皮-间充质转化进程有关。

目的:通过网络药理学研究半枝莲-党参药对治疗膀胱癌的作用机制。方法:查询中药系统药理学数据库分析平台（TCMSP）筛选半枝莲-党参药对的药物成分，使用Swiss Target Prediction预测药物成分的作用靶点；运用GeneCards获取膀胱癌的疾病靶点，利用venny 2.1获取交集靶点。使用STRING进行蛋白-蛋白相互作用分析并使用Cytoscape构建"药物-靶点-通路"网络，利用Metascape进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析。将裸鼠随机分为模型组和治疗组，建立膀胱癌小鼠模型。模型组小鼠灌胃等剂量溶剂，治疗组建模后第8天灌胃半枝莲-党参药对0.2 ml，剂量为342.86 mg/kg，2次/d。建模后第28天，测量裸鼠瘤体大小，并采用酶联免疫吸附试验法检测前列腺素G/H合成酶2（PTGS2）、PTGS1、核受体辅活化子2（NCOA2）、维甲酸X受体α（RXRA）、孕酮受体（PGR）、丝裂原活化蛋白激酶1（MAPK1）、网状内皮增生病毒癌基因同源物A（RELA）、蛋白激酶B1（Akt1）水平。结果:半枝莲-党参药对的45个药物成分通过多条通路直接作用于187个疾病靶点治疗膀胱癌，主要核心成分为槲皮素、木犀草素、汉黄芩素、7-甲氧基-2-甲基异黄酮、黄芩素、β-谷甾醇和豆甾醇等，关键靶点为PTGS2、PTGS1、NCOA2、RXRA、PGR、MAPK1、RELA和Akt1等。GO富集分析显示，生物过程主要涉及对激素的反应、细胞对脂质的反应、对外来刺激的反应、对细菌分子的反应等，细胞组分主要涉及转录调控复合体、膜筏、膜微区、RNA聚合酶Ⅱ转录调控复合物等，分子功能主要涉及转录因子结合、DNA结合转录因子结合、RNA聚合酶Ⅱ特异性DNA结合转录因子结合、核受体活性、配体激活的转录因子活性等。KEGG通路富集分析显示半枝莲-党参药对治疗膀胱癌的主要信号通路为晚期糖基化终产物及其受体（AGE-RAGE）、白细胞介素-17（IL-17）、磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B（PI3K-Akt）、肿瘤坏死因子（TNF）、MAPK、缺氧诱导因子-1（HIF-1）、细胞凋亡、p53、Toll样受体等。动物实验验证显示，半枝莲-党参药对能够明显改善裸鼠的瘤体大小，同时也能改善PTGS2、PTGS1、NCOA2、RXRA、PGR、MAPK1、RELA、Akt1表达水平。结论:半枝莲-党参药对主要通过调节AGE-RAGE、IL-17、PI3K-Akt、TNF、MAPK、HIF-1、细胞凋亡、p53、Toll样受体等信号通路的PTGS2、PTGS1、NCOA2、RXRA、PGR、MAPK1、RELA、Akt1等靶点治疗膀胱癌。

溶瘤腺病毒(OA)，也称为条件增殖型腺病毒，是经基因改造，只在肿瘤细胞中特异增殖的新一代腺病毒载体，此载体对正常细胞无影响。其能感染特定类型肿瘤细胞，通过复制、增殖、裂解并杀伤肿瘤细胞，同时利用其高效的转染效率携带治疗基因，以此提高抗肿瘤效果，利用肿瘤特异性启动子是构建OA的主要方法。本文概述了肿瘤特异性启动子在OA治疗泌尿系肿瘤中的研究进展。

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤。免疫治疗作为一种新型的治疗方法，在尿路上皮癌领域取得了巨大成功。溶瘤病毒作为免疫治疗的一项新兴研究热点，可以通过特异性破坏肿瘤细胞或激活特异性抗肿瘤免疫的双重作用机制来达到抗肿瘤效应。目前，溶瘤病毒在膀胱癌的治疗中取得了重大突破，特别是在非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌的治疗方面。包括腺病毒、柯萨奇病毒、牛痘病毒及单纯疱疹病毒等在内的溶瘤病毒，在膀胱灌注治疗膀胱癌的多项临床试验中显示出良好的安全性和有效性。特别是在重组腺病毒干扰素α治疗膀胱癌的Ⅲ期临床试验中，高达53%的患者3个月时获得完全缓解，且无Ⅳ/Ⅴ级不良反应。本文就溶瘤病毒在膀胱癌治疗中的研究现状和进展进行综述。

目的:探讨腺相关病毒(AAV)载体介导血红素加氧酶1( HO-1)基因过表达对视网膜色素变性(RP)模型大鼠的保护作用。 方法:选取健康雄性SD大鼠80只，体质量200～250 g，采用完全随机分组设计，将大鼠分为空白对照组、RP模型组、AAV-GFP组和AAV-HO-1-GFP组，每组20只。RP模型组、AAV-GFP组和AAV-HO-1-GFP组以剂量50 mg/kg的质量分数1%碘酸钠溶液进行尾静脉注射，制备碘酸钠诱导大鼠RP模型，再分别予以0.9%氯化钠溶液、AAV-GFP病毒、AAV-HO-1-GFP病毒视网膜下腔注射；空白对照组大鼠尾静脉仅注射等量0.9%氯化钠溶液。于造模后第14天摘出大鼠眼球。采用苏木精-伊红染色法检测各组大鼠视网膜结构及厚度；采用TUNEL法检测各组视网膜组织细胞凋亡情况；采用Western blot法测定各组大鼠视网膜组织中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(caspase 3)、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)、HO-1蛋白的表达水平。结果:苏木精-伊红染色结果显示，空白对照组大鼠视网膜结构正常，RP模型组和AAV-GFP组大鼠视网膜结构破坏明显，外核层呈波浪状改变，厚度变薄，AAV-HO-1-GFP组大鼠视网膜结构轻度破坏，外核层厚度轻度变薄。与空白对照组比较，RP模型组和AAV-GFP组大鼠视网膜外核层厚度明显变薄，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。RP模型组、AAV-GFP组和AAV-HO-1-GFP组HO-1蛋白相对表达量分别为0.76±0.21、0.76±0.16、0.92±0.05，明显高于空白对照组的0.48±0.25，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；AAV-HO-1-GFP组HO-1蛋白相对表达量高于RP模型组和AAV-GFP组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。各组细胞凋亡率、bcl-2和caspase 3蛋白相对表达量总体比较，差异均有统计学意义( F＝1 596.333、1 043.806、364.331，均 P<0.01)；与AAV-HO-1-GFP组比较，RP模型组和AAV-GFP组细胞凋亡率和caspase 3蛋白相对表达量增加，bcl-2蛋白相对表达量减少，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:AAV介导 HO-1基因过表达对RP模型大鼠的视网膜具有保护作用。

目的:观察荷载核基质结合区结合蛋白1(SATB1)短发卡RNA(shRNA)的溶瘤腺病毒(ZD55-SATB1)联合多西他赛(DTX)在体外对激素敏感前列腺癌LNcap细胞的影响，并探讨作用机制。方法:将LNcap细胞(购自上海中国科学院细胞库)分为5组进行干预，分别为磷酸盐缓冲液组(PBS)、多西他赛化疗药物组(DTX为2 μg/L)、病毒对照组[ZD55-EGFP为10感染复数(MOI)]、病毒治疗组(ZD55-SATB1为10 MOI)、病毒联合化疗药物组(ZD55-SATB1＋DTX为5 MOI＋1 μg/L)。Transwell检测细胞迁移和侵袭能力变化；脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡；蛋白质印迹法(Western blot)检测SATB1、腺病毒早期区1A基因(E1A)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8与bcl-2的表达。采用 t检验。 结果:Transwell迁移结果显示，ZD55-SATB1联合DTX组干预LNcap细胞24 h后的细胞穿膜数为(28.20±3.19)个，与ZD55-SATB1组[(39.60±4.98)个]( t＝4.309， P<0.01)、ZD55-EGFP组[(52.60±6.02)个]( t＝8.001， P<0.01)、DTX组[(65.50±5.12)个]( t＝13.710， P<0.01)、PBS组为(106.60±5.18)个( t＝28.820， P<0.01)比较，病毒与化疗药物治疗组穿膜细胞数显著降低，细胞迁移能力显著降低，差异有统计学意义；Transwell侵袭实验结果：联合组穿透Matrigel胶进入小室下层的细胞数为(23.60±3.58)个，与ZD55-SATB1组[(32.40±5.08)个]( t＝3.088， P<0.05)、ZD55-EGFP组[(39.60±2.70)个]( t＝7.610， P<0.01)、DTX组[(44.60±4.62)个]( t＝7.815， P<0.01)、PBS组为(98.20±4.32)个( t＝28.820， P<0.01)比较，细胞侵袭能力明显降低，差异有统计学意义。TUNEL结果显示，各治疗组细胞凋亡率均高于PBS对照组[(5.92±0.90)%]，但联合组[(34.48±4.25)%]与ZD55-SATB1组[(28.12±2.50)%]( t＝2.582， P<0.05)、ZD55-EGFP组[(23.30±3.03)%]( t＝4.752， P<0.01)、DTX组[(22.35±2.44)%]( t＝4.956， P<0.01)比较，细胞凋亡更加明显，差异有统计学意义。Western blot结果显示，联合组内SATB1蛋白表达下调，E-cadherin表达上调，Vimentin和MMP-2表达下调，Caspase-8和Caspase-3表达上调，bcl-2表达下调更为显著。E1A基因在联合组内正常表达，说明联合使用DTX不影响腺病毒复制增殖。 结论:ZD55-SATB1联合DTX在体外可以有效抑制LNcap细胞的迁移和侵袭能力，并诱导肿瘤细胞凋亡，效果优于单独使用ZD55-SATB1或DTX，其机制可能是通过上调E-cadherin同时下调Vimentin和MMP-2的表达抑制迁移侵袭能力，抑制了上皮-间充质转化(EMT)进程，并通过上调Caspase-8和Caspase-3，下调bcl-2诱导肿瘤凋亡。

胰腺癌是消化系统常见肿瘤之一，具有临床症状隐匿、侵袭性强且易转移等特点，致死率高。近年来，免疫治疗在实体瘤治疗中开启新时代，但受胰腺癌肿瘤微环境影响，其在胰腺癌中的应用受到限制。笔者系统分析胰腺癌肿瘤微环境，总结胰腺癌免疫治疗相关临床研究，探讨胰腺癌免疫治疗未来方向。

自身免疫性溶血性贫血和噬血细胞综合征常继发于病毒感染、血液系统恶性肿瘤及自身免疫病，特别是与B-淋巴瘤相关性噬血细胞综合征相比，T/NK-淋巴瘤相关性噬血细胞综合征发病率高、EB病毒颗粒检出率高，实体肿瘤合并自身免疫性溶血性贫血和噬血细胞综合征的报道也罕见。本文报道一例老年男性，入院时表现为自身免疫性溶血性贫血，给予糖皮质激素治疗，病情仍迅速进展，经病理证实同时患有小B淋巴细胞白血病和胰体部腺癌，并因反复黑便行肠镜及免疫组织化学（IHC）检查确诊为横结肠脾区EB病毒阳性弥漫大B细胞淋巴瘤，最终因消化道出血抢救无效。