目的 实验室评价灭螺酯的杀螺效果,并观察经灭螺酯处理的钉螺酶活性的变化,探讨灭螺酯杀螺机制.方法 采用实验室浸杀法,浸泡24、48、72 h后取活螺用考马斯亮蓝法进行蛋白含量测定及紫外分光光度法作酶活性检测.结果 灭螺酯在5.00 mg/L浓度下浸杀钉螺效果明显,死亡率达96.67%.经1.25 mg/L灭螺酯浸泡24 h的钉螺软组织的NOS、AChE、ACP和AKP的酶活性较溶剂对照组均有显著降低,差异具统计学意义(P均<0.01);而SDH和LDH的酶活性相较溶剂对照组无显著性变化(P均>0.05).结论 灭螺酯对钉螺的杀灭作用很可能是通过影响钉螺的神经介质传导、扰乱需NO参与的循环、代谢和运动功能、并阻碍其消化、吸收、运输营养物质,从而使钉螺多项生理生化功能紊乱,最终导致钉螺死亡.

目的 了解单核-巨噬细胞和中性粒细胞抗问号钩端螺旋体(简称钩体)感染能力及吞噬溶酶体形成是否存在差异.方法 人THP-1单核细胞和HL-60细胞分别用佛波酯(PMA)和全反式维甲酸(ATRA)预处理,使其分化为单核-巨噬细胞和中性粒细胞.采用激光共聚焦显微镜法检测THP-1-PMA单核-巨噬细胞和HL-60-ATRA中性粒细胞吞噬问号钩体能力.采用透射电镜法检测胞内钩体形态.采用激光共聚焦显微镜法和荧光分光光度法检测胞内问号钩体活力和死亡率.采用激光共聚焦显微镜法检测不同吞噬细胞内吞噬溶酶体形成率.结果 THP-1-PMA单核-巨噬细胞和HL-60-ATRA中性粒细胞均能吞噬问号钩体,但前者吞噬问号钩体能力显著强于后者(P<0.05).胞内问号钩体都以吞噬泡的形式存在于上述两种吞噬细胞内.THP-1-PMA单核-巨噬细胞杀灭胞内问号钩体能力显著强于HL-60-ATRA中性粒细胞(P<0.05).THP-1-PMA单核-巨噬细胞内问号钩体与溶酶体共定位率显著高于相应的HL-60-ATRA中性粒细胞(P<0.05).结论 单核-巨噬细胞而非中性粒细胞作为主要的吞噬细胞在吞噬、杀灭入侵问号钩体过程中起着重要作用.中性粒细胞内较低的吞噬溶酶体形成率可能是导致其杀灭问号钩体能力较低的原因.

湖北钉螺是日本血吸虫的唯一中间寄主,药物灭螺是控制血吸虫病传播的有效手段.现有研究结果表明,药物灭螺机制主要包括:(1)通过影响钉螺体内乙酰胆碱酯酶、一氧化氮合酶等调控神经信号转导和传递的关键酶活性,进而使得钉螺的神经系统功能失调而致死.(2)通过影响琥珀酸脱氢酶、乳酸脱氢酶等与糖代谢和能量供应过程相关的酶活性,使钉螺体内能量代谢途径发生紊乱,最终造成钉螺死亡.(3)通过影响转氨酶、磷酸酶、酯酶同工酶等与肝脏解毒功能相关的酶活性,使肝脏防御系统瘫痪甚至肝脏衰竭,造成钉螺中毒死亡.该文主要从灭螺药物对钉螺肝脏等重要器官的超微结构及其中多种关键酶酶活性两方面的影响出发,系统阐述灭螺药物对钉螺的作用机制,以期为新型灭螺药物的研发提供参考.

阿奇霉素(Azithromycin)是一类半合成的十五元大环内酯类抗生素,具有抗菌谱广、半衰期长、组织穿透性好、组织分布广泛、细胞内药物浓度高(包括吞噬细胞)、免疫调节作用显著等特点.目前已广泛应用于治疗各种呼吸道、性传播疾病及眼部相关疾病[1].阿奇霉素能够杀灭葡萄球菌、链球菌(尤其是肺炎链球菌)、淋球菌、大肠杆菌、流感嗜血杆菌、嗜血杆菌、铜绿假单胞菌、军团菌、空肠弯曲杆菌、幽门螺杆菌、刚地弓形虫、隐孢子虫和疟原虫等病原微生物[1-2].近年来,由于其对宿主防御反应、人类慢性疾病的具有补充作用和免疫调节作用而受到越来越多的关注[2].早期阿奇霉素在眼科疾病中主要应用于沙眼及一些有眼部症状的全身疾病,主要给药方式是口服.2007年,阿奇霉素滴眼液(阿奇霉素 1.0％)被美国食品药品监督管理局(FDA)批准用于微生物敏感株引起的细菌性结膜炎[3].

肝硬化腹水是肝硬化失代偿期最突出的临床表现之一,是肝功能减退和门脉高压共同作用的结果[1],其发病机制与门脉高压、低白蛋白血症、有效循环血量不足、肝脏对醛固酮和抗利尿激素灭能作用减弱、淋巴回流受阻有关.门静脉高压是腹水形成的主要原因和始动因素,也是腹水形成的决定性因素.目前西医的治疗方法分主要体现在病因治疗、合理限盐、应用利尿药物(螺内酯和/或呋塞米)及缩血管活性药物、肝移植、腹水浓缩回输或肾脏替代治疗、腹腔α-引流泵或腹腔静脉Denver分流等方面.利尿剂是临床上治疗肝硬化腹水的主要方法,不同的利尿剂其不良反应迥异.

目的 探究柚皮挥发性有机化合物(PVOC)与牛乳铁蛋白(BLF)相互作用分子机制及指纹图谱.方法 利用顶空固相微萃取气相色谱-质谱(HS-SPME/GC-MS)技术分别获得琯溪蜜柚、南非葡萄柚和以色列青柚(S1～S9)PVOC物质组与BLF间相互作用指纹图谱并筛选活性PVOC物质组.通过分子对接技术建立PVOC物质组与BLF间结合的分子模型,结合荧光发射、同步荧光、圆二色性光谱及三维荧光光谱技术和动力学模拟交叉验证PVOC物质组与BLF相互作用的分子机制.结果 通过HS-SPME/GC-MS技术共鉴定出S1～S9中21种共有成分,并鉴定出D-柠檬烯(Dt)、乙酸芳樟酯(La)和圆柚酮(Nt)为活性特征成分.PVOC物质组与BLF的分子对接模型表明,Dt上的双键及环己烯与BLF上的Trp560和Ala558联合产生交叉疏水作用,同时周围还存在Thr636,Thr527和Arg531等氨基酸残基通过范德华力与之结合.La分子被包裹在BLF由Trp560,Thr636,Ser519,Thr527,Leu639,Gly525,Tyr524,Gly528,Glu521,Lys522,Arg531及Ala558形成的疏水口袋中;Nt分子被包裹在由Asp509,Glu521,Asp508,Trp560,Ser519,Lys520,Gly528,Thr527,Lys637,Glu635,Thr636,Ala558,Arg531,Glu353及Lys522形成的疏水口袋中.光谱结果表明,PVOC物质组能够引起BLF内源荧光猝灭,Dt和La在BLF中存在独立结合位点与BLF形成复合物,是静态猝灭机制,Nt在BLF中则有多个结合位点且存在协同关系;Dt,La,Nt和柚皮PVOC物质组与BLF间的作用为非辐射能量转移,BLF二级结构改变,α-螺旋松动和β-折叠结构增多.计算结果表明,BLF与PVOC物质组中含量最少的Nt亲和性最强,但结合力不强,对La的亲和性最弱,对含量最多的Dt亲和性较弱,但结合力最强,结合率54.66％.结论 BLF与柚皮PVOC物质组的选择结合强度取决于PVOC分子的结构与含量,BLF更倾向选择结合含有羰基氧结构的醛酮类PVOC分子.PVOC物质组导入后引起BLF二级结构的松动、伸展,构象改变是范德华力、疏水力和氢键共同作用的结果.

梅毒是我国最常见的性传播疾病之一，神经梅毒为最严重、最常见的梅毒并发症。中国疾病预防控制中心性病控制中心报告2014年至2019年中国梅毒发病率由2014年的30.93/10万增长至2019年的38.37/10万，呈逐年上升趋势；神经梅毒的发病率也随之增长。神经梅毒是梅毒螺旋体侵入神经系统所引起的脑、脊髓及周围神经损害的慢性感染性疾病，可出现于各期梅毒病程，一般认为，未经治疗的梅毒患者约20%可发展为无症状神经梅毒，后者中10%可进展为有症状神经梅毒。目前神经梅毒诊断尚无金标准，需依据患者病史、症状、体征、实验室、电生理、神经心理及神经影像等进行综合分析。目前用于治疗神经梅毒的抗菌药物包括β-内酰胺类、四环素类及大环内酯类，以青霉素为首选。神经梅毒药物治疗能否成功主要取决于抗菌药物在脑脊液中的有效浓度及维持时间，杀灭梅毒螺旋体所需脑脊液中青霉素浓度应> 0.018 mg/L。神经梅毒推荐方案：青霉素1 800~2 400万U/d，静脉滴注（300~400万U/次，1次/4 h），连续10~14 d，继以苄星青霉素，240万U/周、肌肉注射、连用3次；或普鲁卡因青霉素240万U/d、肌肉注射、1次/d，同时口服丙磺舒，0.5 g/次、4次/d、共10~14 d，继以苄星青霉素，240万U/周、肌肉注射、连用3次。多学科协作治疗可有效改善患者精神症状及全身症状，对神经梅毒患者康复具有重要意义。糖皮质激素是否适合神经梅毒治疗，有待商榷；丙种球蛋白治疗神经梅毒的适应证、用药频次及疗效尚待进一步探讨。