目的:研究急性高眼压诱导小鼠视网膜缺血-再灌注损伤模型中血-视网膜外屏障的破坏情况。方法:选取SPF级雄性C57BL/6J小鼠57只，采用随机数表法将小鼠随机分为对照组和高眼压组，其中对照组25只，高眼压组32只，剔除建模失败或建模不佳的小鼠后，每组最终纳入20只，均选取左眼为实验眼。高眼压组采用质量分数0.9%氯化钠溶液前房灌注法建立小鼠急性高眼压诱导的视网膜缺血-再灌注损伤模型，对照组仅作前房穿刺。采用动物光相干断层扫描法检测视网膜厚度变化；采用免疫荧光染色法检测视网膜组织中紧密连接蛋白1(ZO-1)分布变化；采用胰蛋白酶消化法检测视网膜毛细血管退化程度；采用苏木精-伊红染色法观察视网膜炎性细胞浸润情况。结果:与对照组比较，高眼压组视网膜色素上皮(RPE)层结构紊乱，伴有明显渗出，局部神经上皮层脱离、隆起。高眼压组小鼠视网膜全层厚度为(235.8±5.3)μm，较对照组的(213.3±3.9)μm明显增厚，差异有统计学意义( t＝3.427， P＝0.009)。小鼠RPE层中ZO-1主要定位在细胞膜上，少部分在细胞质中，建模后2 d，高眼压组ZO-1出现明显内化，细胞膜上ZO-1减少，细胞质中ZO-1增多，整体分布紊乱。建模后7 d，高眼压组视网膜毛细血管出现退行性变，退化的毛细血管数量明显增加，高眼压组退化的毛细血管数量为(201.0±13.2)根，明显多于对照组的(11.2±1.7)根，差异有统计意义( t＝14.280， P<0.01)。苏木精-伊红染色结果显示，高眼压组小鼠视网膜中可见炎性细胞浸润，主要是嗜中性粒细胞，浸润的炎性细胞主要位于内界膜下。 结论:急性高眼压诱导小鼠视网膜缺血-再灌注损伤使视网膜外屏障受到破坏，引起外周循环中粒细胞的浸润及视网膜水肿，视网膜毛细血管退化。

目的:探讨细胞焦亡在瓦斯爆炸致大鼠急性肺损伤（ALI）中的作用及意义。方法:于2018年2月，选取SPF级雄性SD大鼠126只，按体重随机分为空白对照组（18只）和实验组（距起爆点40 m、80 m、120 m、160 m、200 m和240 m，每组18只）。实验组在巷道内进行瓦斯爆炸，构建ALI模型；对照组不实施瓦斯爆炸，其他条件与实验组一致。爆炸后24 h测定各组大鼠呼吸频率（f）、潮气量（TV）、每分通气量（MV）和气道狭窄指数（Penh）等呼吸功能指标；麻醉后每组处死大鼠5只，采用苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织病理学形态；免疫组织化学法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）含量；蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测肺组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）、Caspase-1、白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-18（IL-18）等细胞焦亡相关蛋白表达情况。结果:各实验组大鼠f、MV均高于对照组（ P<0.05）；除40 m、80 m组外，其他实验组大鼠TV均高于对照组（ P<0.05）；除40 m组外，其他实验组大鼠Penh均低于对照组（ P<0.05）。HE染色显示，不同距离点实验组大鼠肺组织均可见肺间质及肺泡明显水肿，肺泡腔大量红细胞、炎性细胞渗出，肺间质增厚，肺损伤评分增加（ P<0.05）。免疫组织化学结果显示，各实验组大鼠Caspase-1阳性表达均高于对照组（ P<0.05）。Western blotting结果显示，各实验组大鼠细胞焦亡相关蛋白表达均高于对照组（ P<0.05）。 结论:细胞焦亡参与了瓦斯爆炸致大鼠ALI的病理生理过程。

患者，男，41岁，因左眼视物不清2年伴耳鸣1个月余，于2021年4月19日至南京中医药大学附属南京中医院眼科就诊，眼科检查：左眼视力0.08，矫正视力0.8；双眼眼压均为18 mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)；左眼瞳孔正圆，瞳孔直径约5 mm，直接对光反射迟钝；右眼瞳孔正圆，瞳孔直径约3 mm，直接对光反射灵敏，余眼前节及眼底未见明显异常；双眼视野检查示可见生理盲点，全视野范围内各部位光敏感度正常。请神经外科医师会诊，头颅CT检查后诊断为头颈部腺样囊性癌，行肿瘤次全切除术及放射治疗。术后6个月，患者因左眼视物不清伴分泌物增多及左耳胀痛2周，再次就诊。眼科检查：左眼视力指数20 cm；眼压19 mmHg，球结膜中度充血，角膜中央可见4 mm×4 mm溃疡，荧光素钠染色阳性，前房可见积脓，眼后段结构窥不清(图1)。激光扫描角膜共焦显微镜示病灶内大量炎性细胞浸润(图2)。结膜囊分泌物培养未见细菌及真菌生长。角膜知觉检查显示左眼角膜知觉反射迟钝。耳鼻喉科医师会诊诊断为左中耳炎。临床诊断为左眼感染性角膜溃疡，左眼神经营养性角膜炎，左中耳炎。给予氧氟沙星眼膏(日本参天制药株式会社)1次/2 h点眼，头孢曲松钠3.0g 1次/d静脉滴注。治疗5 d后，患者眼部及耳部症状明显减轻，左眼角膜溃疡范围缩小至3 mm×3 mm(图3A、B)，前房积脓消失。停用全身抗感染药物，加用小牛血去蛋白提取物滴眼液(沈阳兴齐眼药股份有限公司)1次/2 h点眼并佩戴角膜绷带镜。持续治疗5 d后检查发现左眼角膜上皮缺损持续不愈，予利多卡因联合罗哌卡因1：1约0.2 ml球结膜下浸润麻醉后行左眼角膜羊膜覆盖术。术中将羊膜覆盖全角膜，于角膜缘进行间断缝合。术后1 d，羊膜贴敷紧密，角膜缘无渗出及分泌物(图4A)。术后1周羊膜贴敷紧密、无溶解，拆除缝线(图4B)。术后2周羊膜仍覆盖角膜，未见溶解迹象(图4C)。术后1个月检查发现溃疡病灶愈合并呈片状云翳，球结膜中度充血，角膜缘上方可见一新发1.5 mm×1.5 mm角膜溃疡灶，前房下方积脓(图4D)；压迫泪囊区可见大量脓性分泌物自下泪小点溢出，泪囊区皮肤无红肿和压痛；结膜囊分泌物培养结果为金黄色葡萄球菌。综合诊断为左眼泪囊炎、左眼感染性角膜溃疡、左眼神经营养性角膜炎、左中耳炎。给予全身头孢曲松钠3.0 g 1次/d静脉滴注，局部氧氟沙星眼膏、小牛血去蛋白提取物滴眼液1次/2 h点眼抗感染治疗，治疗5 d后行左泪囊鼻腔吻合术；术后随访1年角膜溃疡已形成角膜云翳(图5)，泪道冲洗通畅。

目的:探讨Krüppel样因子4（KLF4）在巨噬细胞炎症反应中的表达特点与作用及其对脓毒症小鼠炎症反应与脏器损伤的作用，为烧创伤脓毒症的靶向治疗奠定理论基础。方法:采用实验研究方法。取小鼠RAW264.7巨噬细胞与从10只6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠中提取的原代腹腔巨噬细胞（PM）进行实验。采用内毒素/脂多糖（LPS）分别处理RAW264.7巨噬细胞与PM 0（未处理）、1、2、4、6、8、12、24 h构建巨噬细胞炎症反应模型，采用实时荧光定量反转录PCR（RT-PCR）法检测白细胞介素1β（IL-1β）、IL-6、CC趋化因子配体2（CCL2）与肿瘤坏死因子α（TNF-α）mRNA表达，据此确定后续部分实验LPS处理时间。用LPS处理RAW264.7巨噬细胞0、8 h，采用免疫荧光法检测KLF4的定位与蛋白表达；利用高通量测序技术平台对细胞进行转录组测序，采用DESeq2软件筛选2种处理时间细胞间的差异表达基因（DEG）。采用LPS分别处理RAW264.7巨噬细胞与PM 0、1、2、4、6、8、12、24 h，分别用实时荧光定量RT-PCR法与蛋白质印迹法检测KLF4的mRNA与蛋白表达。将RAW264.7巨噬细胞按随机数字表法分为阴性对照组与KLF4过表达组，分别转染对应质粒后用LPS处理0、8 h，采用实时荧光定量RT-PCR法检测KLF4、IL-1β、IL-6、CCL2与TNF-α的mRNA表达，采用蛋白质印迹法检测KLF4蛋白表达。前述实验样本数均为3。将40只6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为KLF4过表达组和阴性对照组（每组20只），分别注射相应转染注射液后构建盲肠结扎穿孔脓毒症模型。采用随机数字表法从2组小鼠中各选取12只，观察建模后72 h内生存情况。于建模后8 h取2组分别剩余的8只小鼠，先行眼球取血，采用酶联免疫吸附测定法检测血清中IL-1β、IL-6水平，采用干化学法检测血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平；后取心脏、肺脏、肝脏组织，行苏木精-伊红染色后观察损伤情况。对数据行独立样本 t检验、Cochran&Cox近似 t检验、单因素方差分析、Dunnett检验、Brown-Forsythe和Welch单因素方差分析、Dunnett T3检验、log-rank（Mantel-Cox）检验。 结果:与LPS处理0 h比较，LPS处理6 h与8 h RAW264.7巨噬细胞中IL-1β mRNA表达、LPS处理4~12 h RAW264.7巨噬细胞中IL-6 mRNA表达、LPS处理8 h和12 h RAW264.7巨噬细胞中CCL2 mRNA表达以及LPS处理4~8 h RAW264.7巨噬细胞中TNF-α mRNA表达均显著上调（ P<0.05或 P<0.01），LPS处理4~8 h PM中IL-1β与CCL2 mRNA表达、LPS处理2~24 h PM中IL-6 mRNA表达以及LPS处理2~12 h PM中TNF-α mRNA表达均显著上调（ P<0.05或 P<0.01）。选取8 h作为后续部分实验的LPS处理时间。KLF4主要定位在RAW264.7巨噬细胞的细胞核中。与LPS处理0 h比较，LPS处理8 h RAW264.7巨噬细胞中KLF4蛋白表达明显减少；LPS处理8 h RAW264.7巨噬细胞中有1 470个差异表达显著的DEG，包括转录表达显著下调的 KLF4［错误发现率<0.05，log 2（差异倍数）=-2.47］。与LPS处理0 h比较，LPS处理6~24 h RAW264.7巨噬细胞中KLF4 mRNA表达、LPS处理1~24 h RAW264.7巨噬细胞与PM中KLF4蛋白表达以及LPS处理4~24 h PM中KLF4的mRNA表达均明显降低（ P<0.05或 P<0.01）。与阴性对照组比较，KLF4过表达组LPS处理0、8 h RAW264.7巨噬细胞中KLF4的mRNA（ t'值分别为17.03、8.61， P<0.05或 P<0.01）与蛋白表达均明显升高，LPS处理0 h RAW264.7巨噬细胞中IL-6、CCL2的mRNA表达均明显升高（ t值分别为6.29、3.40， P<0.05或 P<0.01），LPS处理8 h RAW264.7巨噬细胞中IL-1β、IL-6、CCL2、TNF-α的mRNA表达均显著下降（ t值分别为10.52、9.60、4.58、8.58， P<0.01）。KLF4过表达组小鼠建模后72 h内生存比例明显高于阴性对照组（ χ2=4.01， P<0.05）。建模后8 h，KLF4过表达组小鼠血清中IL-1β、IL-6与ALT、AST水平分别为（161±63）、（476±161）pg/mL与（144±24）、（264±93）U/L，明显低于阴性对照组的（257±58）、（654±129）pg/mL与（196±27）、（407±84）U/L（ t值分别为3.16、2.44与4.04、3.24， P<0.05或 P<0.01）。建模后8 h，与阴性对照组比较，KLF4过表达组小鼠心脏、肺脏、肝脏的组织结构紊乱减轻，炎性渗出明显减少，脏器实质细胞病理样改变明显减轻。 结论:KLF4在LPS诱导的巨噬细胞炎症反应中表达显著下降，显著抑制巨噬细胞炎症反应；KLF4显著提高脓毒症小鼠生存率并缓解炎症反应与脓毒症相关脏器损伤。

目的:观察外周5-羟色胺（5-HT）诱导中性粒细胞胞外诱捕网（NET）的生成对脓毒症小鼠肺损伤的影响。方法:选择6~8周龄野生型（WT型）和Tph1基因敲除（Tph1 KO）C57小鼠，按随机数字表法分为WT小鼠假手术组、WT小鼠脓毒症组和Tph1 KO小鼠假手术组、Tph1 KO小鼠脓毒症组。假手术组小鼠接受假手术处理（仅打开腹腔翻动盲肠但不结扎和穿刺，然后关腹）；脓毒症组小鼠接受盲肠结扎穿孔术（CLP）建立脓毒症模型。术后12 h处死小鼠，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）含量；同时收集小鼠肺组织标本，光镜下观察肺组织病理学改变，采用免疫荧光显微镜观察小鼠肺组织中NET生成情况。 结果:病理学结果提示：假手术组小鼠肺组织结构完好，未见渗出；而脓毒症组小鼠肺泡结构破坏，肺泡腔内可见明显渗出，肺泡壁增厚并伴有大量炎性细胞浸润，且WT小鼠脓毒症组肺损伤程度较Tph1 KO小鼠脓毒症组严重。ELISA结果显示：不同品系假手术组小鼠BALF中TNF-α和IL-6含量比较差异无统计学意义；而脓毒症组小鼠BALF中TNF-α和IL-6含量均较假手术组明显升高〔WT小鼠：TNF-α（μg/L）为158.20±28.46比14.00±3.28，IL-6（μg/L）为304.98±21.78比57.70±12.30；Tph1 KO小鼠：TNF-α（μg/L）为85.88±20.13比14.95±1.53，IL-6（μg/L）为169.50±45.61比55.05±12.68，均 P<0.01〕，且WT小鼠脓毒症组上述指标水平均明显高于Tph1 KO小鼠脓毒症组〔TNF-α（μg/L）：158.20±28.46比85.88±20.13，IL-6（μg /L）：304.98±21.78比169.50±45.61，均 P<0.01〕。免疫荧光染色显示：假手术组小鼠肺脏中均检测到极少量的NET生成；而脓毒症组小鼠肺组织中均检测到大量的NET生成，明显高于假手术组〔WT小鼠：（34.75±7.27）%比（1.75±0.96）%，Tph1 KO小鼠：（14.25±5.74）%比（2.50±1.29）%，均 P<0.01〕，且WT小鼠脓毒症组小鼠肺脏组织中NET生成量较Tph1 KO小鼠脓毒症组明显增多〔（34.75±7.27）%比（14.25±5.74）%， P<0.01〕。 结论:脓毒症时，小鼠肺组织中炎性因子产生增加导致肺损伤，其机制与外周5-HT介导的肺组织中NET的生成增加有关；抑制外周血中5-HT的产生可有效减少肺组织中NET生成，从而减轻肺损伤。

患者男，65岁，因“发现皮肤巩膜黄染半月余”入院。患者既往体健。术前MRI示：胆总管下段癌可能大，遂行胰十二指肠切除术（pancreatoduodenectomy，PD），术中使用导管对黏膜法行胰肠吻合，胆肠使用可吸收缝线连续吻合，术中出血量约300 ml。术后第1天血红蛋白：90.0 g/L。当晚无明显诱因下突发血压偏低，为88/53 mm Hg，心率：103次/min，腹软、无压痛及反跳痛，腹腔引流管均引出淡血性液体，胃管引出少量暗血性液体，急诊血常规示：血红蛋白：69.0 g/L，急诊CT示：部分肠腔扩张伴高密度内容物。考虑输入襻出血可能性大（图1），保守治疗1 h后复查血红蛋白：58.0 g/L。急诊手术探查止血。腹腔内无明显积液、感染。首先打开胃肠吻合口，发现大量暗血性积液和暗血性血凝块，胃腔内无明显出血点，考虑出血来源于输入襻。打开胆肠吻合口，可见输入襻内大量鲜血及血凝块，但无明显吻合口周围出血，胆道内无出血。判断出血在输入襻内，但原因不明。拆除胰肠吻合，未见吻合口出血，切除输入襻，于对系膜缘切开输入襻，见一长径约5 mm动脉管壁（图2）。按照Child法重建，胰肠吻合采用Blumgart法，胰管内置入引流管，导管对黏膜无法吻合，采用两侧荷包将胰管引流管固定，并行外引流；胆肠吻合采用5-0 PDS线连续吻合，置入T管，长臂至肝管前方另戳孔引出。术后病理示：肠管黏膜扎线处部分区黏膜缺失，缺失处黏膜层至肌层可见局部血管样组织增生伴退变、炎性渗出、出血坏死及大量炎症细胞浸润，周围部分肠黏膜腺体增生，黏膜下纤维及血管组织增生伴充血、出血及炎症细胞、淋巴细胞浸润；另见部分胃黏膜。术后出现胰瘘、胃排空延迟，无其他并发症，于初次术后第33天顺利出院。

目的:探讨枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide，LBP)对大鼠背部任意皮瓣存活状态及术后炎性因子、凋亡因子的影响。方法:取84只SD雄性大鼠，随机平均分成4组，在大鼠背部依照样布设计4.5 cm 2的任意皮瓣。对照组术后采用生理盐水灌胃(LBP0组)，实验组术后用200、400、800 mg/(kg·d)LBP灌胃，分别为LBP200、LBP400、LBP800组，持续时间为2周。记录各组大鼠皮瓣术后的一般情况，包括炎性渗出、水肿、皮瓣张力、皮温及坏死。各组分别于术后0.5、1、3、5、7、10及14 d随机选取3只大鼠测算皮瓣存活面积。切取皮瓣组织样本，采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测皮瓣组织中TNF-α、Caspase-3因子的mRNA表达。 结果:大鼠背部任意皮瓣造模后3 d，各组皮瓣创面均可见不同程度渗血及肿胀，部分皮瓣逐步出现暗红至青紫，术后7 d皮瓣坏死逐渐显现，术后10 d坏死边界渐清晰，术后2周坏死区域结痂翘起。各组大鼠术后1周内，皮瓣存活面积差异无统计学意义( P>0.05)。术后3 d，LBP800与LBP0组相比，TNF-α因子mRNA表达差异有统计学意义( P<0.05)，且在术后10 d差异更明显( P<0.01)。术后5 d，LBP400与LBP0组相比，TNF-α因子mRNA表达量也存在差异( P<0.05)；LBP800与LBP0组相比，Caspase-3因子mRNA表达量存在差异( P<0.05)，且术后14 d两组差异更明显( P<0.01)。术后7 d，LBP400与LBP0组相比，Caspase-3因子mRNA表达量存在明显差异( P<0.05)。 结论:适宜浓度的LBP干预可显著降低皮瓣炎性反应因子及凋亡因子的mRNA表达，有助于降低皮瓣组织坏死的风险，改善皮瓣存活微环境。

目的:探讨宫内节育器致纤维包裹结节伴大量宫腔积脓的诊断、治疗及预防。方法:对1例宫内节育器致纤维包裹结节伴大量宫腔积脓患者的诊治过程进行分析报道，并复习相关文献，分析病因及诊疗措施。结果:患者行全子宫+双附件切除术，术后病理提示子宫腔局部内膜组织缺失，见大量急慢性炎细胞浸润、淋巴滤泡形成伴炎性渗出及坏死，包裹节育器结节为纤维素性坏死物。患者术后恢复良好。结论:宫内节育器致纤维包裹结节伴大量宫腔积脓较为罕见，月经停止后6~12个月内建议取出宫内节育器以预防该疾病发生。

目的:探讨脓毒症急性肺损伤小鼠血液、肺组织、粪便肠道微生态结构变化及关联。方法:将12只健康雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为盲肠结扎穿孔术（CLP）组和假手术（Sham）组，每组6只。CLP组采用盲肠结扎穿刺法（cecal ligation punctual，CLP）制备脓毒症小鼠急性肺损伤模型；Sham组只开腹但不进行盲肠结扎穿孔。术后24 h取各组小鼠眼球血、肺组织、粪便。HE染色观察肺组织形态变化，16s核糖体RNA测序分析脓毒症小鼠各部位菌群微生态的结构变化并找出其中关联。结果:（1）HE染色显示，CLP组小鼠肺泡腔有渗出、肺组织结构紊乱、伴随大量的炎性细胞浸润，肺组织病理评分较Sham组增高，差异有统计学意义（ P<0.01）。（2）α多样性分析显示，Sham组与CLP组血液及粪便样本比较无统计学意义，肺组织样本中Ace指数、Chao指数、Simpson指数具有统计学意义( P<0.05)。（3） β多样性分析：Sham组与CLP组血液及粪便样本比较，组间差异均大于组内差异，分析Bray-curtis、Weighted、Unweighted指数具有统计学意义( P<0.05)。（4）在门水平，对比于Sham组，CLP组的变形菌门丰度逐渐增加，厚壁菌门及放线菌门丰度降低；在属水平，Sham组主要以不动杆菌属和杜氏杆菌属为主，而CLP组主要以大肠埃希菌和未分类的肠杆菌属为主。对比于粪便菌群，血液与肺组织菌群构成更为相似。 结论:脓毒症急性肺损伤小鼠血液、肺组织、以及肠道的菌群分布存在部分重合。

目的:探讨尼达尼布联合参附注射液对百草枯（PQ）中毒所致肺损伤的保护作用。方法:于2021年9月，将90只SD大鼠按随机数字表法分为对照组、PQ染毒组、参附注射液治疗组、尼达尼布治疗组和联合治疗组，每组各18只。对照组给予生理盐水灌胃，其余四组以20% PQ 80 mg/kg灌胃，参附注射液治疗组（12 ml/kg参附注射液）、尼达尼布治疗组（60 mg/kg尼达尼布）和联合治疗组（12 ml/kg参附注射液+60 mg/kg尼达尼布）于染毒6 h后开始每日一次药物干预。分别检测各组大鼠1、3、7 d时血清中转化生长因子β1（TGF-β1）、白介素-1β（IL-1β）水平，观察各组大鼠7 d时的肺组织病理学改变、肺组织湿重/干重比（W/D），观察超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）在肺组织中的含量变化，Western印迹法检测肺组织中成纤维细胞生长因子受体1（FGFR1）、血小板衍化生长因子受体α（PDGFRα）以及血管内皮生长因子受体2（VEGFR2）的表达水平。结果:各染毒组大鼠染毒后血清TGF-β1、IL-1β含量先上升后下降，联合治疗组1、3、7 d大鼠血清TGF-β1、IL-1β含量均明显低于同时间点PQ染毒组、参附注射液治疗组和尼达尼布治疗组（ P<0.05）；经药物治疗后第7天，肺组织病理切片显示参附注射液治疗组、尼达尼布治疗组和联合治疗组大鼠肺泡腔内出血、渗出、炎性细胞浸润程度均较PQ染毒组减轻，以联合治疗组大鼠肺损伤病变最轻；与对照组比较，PQ染毒组大鼠肺组织W/D升高，MDA含量升高，SOD含量降低，FGFR1、PDGFRα、VEGFR2蛋白表达水平升高（ P<0.05）；与PQ染毒组、参附注射液治疗组和尼达尼布治疗组比较，联合治疗组大鼠肺组织W/D明显降低，肺组织中MDA含量降低、SOD含量升高，FGFR1、PDGFRα、VEGFR2蛋白表达水平降低（ P<0.05）。 结论:尼达尼布联合参附注射液可减轻PQ中毒大鼠急性肺损伤，可能与二者联合应用可以更好地抑制TGF-β1的激活及抑制FGFR1、PDGFRα、VEGFR2在大鼠肺组织的表达相关。