目的:了解枸杞多糖（LBP）对经历孕期慢性应激的母鼠及其子代肠道菌群的改善作用，为改善应激对肠道的影响提供新思路。方法:于2019年7至10月，选择24只SPF级雌性SD成年大鼠，分为对照组、应激组、应激+LBP组，每组8只。建立孕期慢性不可预知温和刺激模型（21 d），并于应激第8天行40 mg/kg LBP溶液灌胃干预。分别在应激前1天和第1、7、14、21天取母鼠内眦静脉血，测定皮质醇并计算皮质酮浓度。收集应激结束后母鼠和出生后20 d子鼠的新鲜粪便，运用Illumina Miseq测序技术、Alpha多样性、群落组成等分析肠道菌群的多样性与结构变化。结果:在应激第7、14天，应激组和应激+LBP组母鼠血浆皮质酮浓度水平高于对照组（ P<0.05）。母鼠Alpha多样性中应激组Ace指数低于对照组（ P<0.05）；肠道菌群结构分析显示，在种水平下，应激+LBP组毛螺菌科、乳杆菌占比高于应激组和对照组；在目水平下，应激+LBP组梭菌目占比高于应激组、低于对照组，而乳杆菌目占比高于应激组和对照组。子鼠组Alpha多样性中应激+LBP子鼠组Shannon指数、Ace指数和Chao指数均高于应激子鼠组（ P<0.05）；肠道菌群结构在种水平下，应激+LBP子鼠组乳杆菌占比高于对照子鼠组和应激子鼠组，应激+LBP子鼠组毛螺菌科和瘤胃菌科占比高于应激子鼠组；在目水平下，应激+LBP子鼠组拟杆菌目占比低于应激子鼠组，应激+LBP子鼠组梭菌目占比高于应激子鼠组和对照子鼠组。 结论:LBP的干预可能改善孕期应激对母鼠及子代肠道菌群多样性、丰富度和菌群结构的改变，从而维持肠道菌群的平衡。

目的:探究枸杞多糖（Lycium barbarum polysaccharides，LBP）对七氟烷麻醉诱导的雄性大鼠生殖毒性的作用，分析其对细胞外信号调节激酶（extracellular-signal-regulated kinase，ERK）/核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2）-抗氧化反应元件（antioxidant response element，ARE）信号通路的影响。方法:取SD雄性大鼠按计算机随机生成数字法分为空白对照组、模型组、LBP低剂量组、LBP高剂量组和阳性对照组，除空白对照组外其余均以七氟烷麻醉诱导，同时腹腔注射给药，空白对照组和模型组予以等体积生理盐水，LBP低、高剂量组分别予以100 mg/kg、200 mg/kg LBP，每天1次，阳性对照组予以10 mg/kg维生素E，隔天1次，14 d后处死。计算各组大鼠睾丸与附睾的脏器指数；检测睾丸组织标志酶酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）含量；HE染色观察大鼠睾丸组织病理学；检测睾丸组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量；TUNEL染色观察大鼠睾丸组织细胞凋亡率；Western blotting检测大鼠睾丸组织内Bax、Bcl-2及ERK/Nrf2-ARE通路蛋白表达。结果:LBP低、高剂量组和阳性对照组睾丸脏器指数［（0.39±0.04）%、（0.47±0.05）%、（0.62±0.05）%］和附睾脏器指数［（0.08±0.01）%、（0.11±0.01）%、（0.14±0.02）%］均比模型组［（0.33±0.03）%，（0.05±0.01）%］高（均 P<0.001），ACP［（122.13±5.39）U/g、（115.37±4.45）U/g、（109.74±4.73）U/g］、LDH含量［（260.43±15.18）U/g、（245.17±8.13）U/g、（236.19±10.23）U/g］均比模型组［（129.98±6.17）U/g、（279.89±18.41）U/g］低（均 P<0.001），AKP含量［（224.41±11.69）U/g、（247.59±12.17）U/g、（266.74±13.78）U/g］、SOD活性［（3.11±0.12）U·mg/蛋白、（4.05±0.14）U·mg/蛋白、（4.78±0.15）U·mg/蛋白］均比模型组［（200.48±10.48）U/g、（2.02±0.09）U·mg/蛋白］高（均 P<0.001），MDA含量［（14.86±1.41）nmol·mg/蛋白、（10.39±1.22）nmol·mg/蛋白、（5.25±0.47）nmol·mg/蛋白］均较模型组［（18.36±1.99）nmol·mg/蛋白］低（均 P<0.001），睾丸细胞凋亡率均较模型组低（均 P<0.001），且呈LBP剂量依赖性（均 P<0.001）。模型组大鼠生精小管变薄，生精细胞明显减少，部分曲精管内仅残留少量精原细胞；给药后，LBP低、高剂量组和阳性对照组生精小管结构比较完整，各级生精细胞排列有序，数量增多，空泡减少。模型组大鼠睾丸组织中Bcl-2、p-ERK1/2、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平较空白对照组高，Bax蛋白水平较空白对照组低（均 P<0.05）；LBP低、高剂量组Bcl-2、p-ERK1/2、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白水平较模型组高，Bax蛋白水平较模型组低（均 P<0.05），且呈LBP剂量依赖性（ P<0.05）。 结论:LBP对七氟烷麻醉诱导的雄性大鼠生殖毒性有拮抗作用，可能与抑制ERK/Nrf2-ARE通路有关。

目的:探讨枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide，LBP)对大鼠背部任意皮瓣存活状态及术后炎性因子、凋亡因子的影响。方法:取84只SD雄性大鼠，随机平均分成4组，在大鼠背部依照样布设计4.5 cm 2的任意皮瓣。对照组术后采用生理盐水灌胃(LBP0组)，实验组术后用200、400、800 mg/(kg·d)LBP灌胃，分别为LBP200、LBP400、LBP800组，持续时间为2周。记录各组大鼠皮瓣术后的一般情况，包括炎性渗出、水肿、皮瓣张力、皮温及坏死。各组分别于术后0.5、1、3、5、7、10及14 d随机选取3只大鼠测算皮瓣存活面积。切取皮瓣组织样本，采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测皮瓣组织中TNF-α、Caspase-3因子的mRNA表达。 结果:大鼠背部任意皮瓣造模后3 d，各组皮瓣创面均可见不同程度渗血及肿胀，部分皮瓣逐步出现暗红至青紫，术后7 d皮瓣坏死逐渐显现，术后10 d坏死边界渐清晰，术后2周坏死区域结痂翘起。各组大鼠术后1周内，皮瓣存活面积差异无统计学意义( P>0.05)。术后3 d，LBP800与LBP0组相比，TNF-α因子mRNA表达差异有统计学意义( P<0.05)，且在术后10 d差异更明显( P<0.01)。术后5 d，LBP400与LBP0组相比，TNF-α因子mRNA表达量也存在差异( P<0.05)；LBP800与LBP0组相比，Caspase-3因子mRNA表达量存在差异( P<0.05)，且术后14 d两组差异更明显( P<0.01)。术后7 d，LBP400与LBP0组相比，Caspase-3因子mRNA表达量存在明显差异( P<0.05)。 结论:适宜浓度的LBP干预可显著降低皮瓣炎性反应因子及凋亡因子的mRNA表达，有助于降低皮瓣组织坏死的风险，改善皮瓣存活微环境。

外伤性视神经病变和青光眼可引起视神经退行性改变，进而导致视力显著下降，严重影响患者的生活质量。近年来，通过对哺乳动物视神经损伤模型的研究发现，视神经损伤涉及细胞凋亡、炎症反应和氧化应激等病理生理过程。研究人员对视神经损伤的相关机理和调控信号通路进行了深入探索，并且在对抗视网膜神经节细胞(RGC)凋亡、新型药物治疗、基因治疗、干细胞移植以及天然提取物等方面进行了视神经损伤的保护研究。研究表明热休克蛋白70家族的成员葡萄糖调节蛋白75以及人体视网膜中自然分泌的褪黑素可能在RGC凋亡调控中起重要作用。人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)可能通过直接激活内在的G-CSF受体和下游信号通路而起到保护RGC的作用。另外，基因治疗因具有很高的靶向性，有望成为视神经损伤后修复和再生的有效疗法。脂肪干细胞移植能够抵抗大鼠模型中视网膜细胞的凋亡。此外，枸杞多糖可以延迟轴突的继发变性，可能成为延缓视神经损伤继发性变性有前景的天然提取物。本文将对视神经损伤的相关机制、调控及保护途径作一综述。

黄芪、人参、橘皮、香橼、佛手、橘红、姜黄、栀子、甘草、葛根、马齿苋、枸杞子、荜茇等药食同源中药对预防和治疗糖尿病心肌病有显著作用。其中所含的黄芪多糖、黄芪甲苷、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、柚皮苷等有效成分可通过抗炎、抗氧化应激、抑制凋亡、调节自噬、抗纤维化、调节能量代谢等作用机制，防治糖尿病心肌损伤。

目的:探讨枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide，LBP)干预雪旺细胞(Schwann cells，SCs)联合异种神经移植体(acellular nerve xenograft，ANX)修复大鼠坐骨神经缺损的效果。方法:取大鼠的坐骨神经SCs，行原代培养，培养至第三代。将0、50、100、150、200、250、500 mg/L的LBP与SCs混合培养，分成七组。在培养皿中培养后第1、3、5、7和9天，用CCK-8法检测各组SCs生物学活性，通过rt-PCR检测各组脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)，神经生长因子(nerve growth factor，NGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)的表达水平，筛选干预SCs的LBP最适浓度。在无菌条件下制备10 mm坐骨神经缺损的大鼠模型，选取兔的胫神经制作ANX，将SD大鼠分为三组，每组10只：ANX组、ANX-SCs组和ANX-LBP-SCs组。术后8周，通过检测坐骨神经功能指数(sciatic nerve function index，SFI)、神经传导速度(motor nerve conduction velocity，MCV)，应用rt-PCR检测再生神经内凋亡因子(Caspase-3)的表达水平，另通过透射电镜比较三组模型的神经移植体内的神经纤维及髓鞘再生。结果:利用CCK-8测定各孔不同时间点SCs活性。在第2～4天，七组的活性差异无统计学意义( P>0.05)，第6～8天150～250 mg/L LBP-SCs组增殖活性强于其他浓度组，差异有统计学意义( P<0.05)。通过q-PCR检测200 mg/L LBP-SCs组中BDNF、NGF及bFGF的mRNA表达量高，与其他组相比差异有统计学意义( P<0.05)。移植术后8周，发现ANX-LBP-SCs组热刺痛实验、SFI检测、神经传导速度数据更优，且Caspase-3表达量最低。透射电镜检测结果显示ANX-LBP-SCs组髓鞘水肿程度及神经纤维再生情况优于其他组。 结论:LBP浓度为200 mg/L时，可促进SCs的增殖，并分泌大量神经营养因子。含有LBP干预的SCs培养体系联合ANX移植可显著促进周围神经再生。

目的 探究枸杞多糖(LBP)通过调控细胞铁死亡对胆囊癌细胞(NOZ和SGC-996)增殖和转移的影响.方法 不同剂量的LBP处理体外培养NOZ和SGC-996细胞;将细胞分为对照组(Control)、20 μmol/L LBP组、40 μmol/L LBP组、60 μmol/L LBP组、80 μmol/L LBP组、LBP+Fer-1组.用MTT法检测细胞活力;EdU法检测细胞增殖能力;Tran-swell检测细胞侵袭能力;比色法检测Fe2+的水平,BODIPYTM 581/591 C11分子探针测定活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的水平;Western blot检测铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)酰基辅酶a合成酶长链家族成员4(ACSL4)、β-catenin和Wnt3A蛋白表达.结果 与对照组比较,40 μmol/L LBP组、60 μmol/L LBP组细胞活力、增殖、侵袭能力显著降低(均P＜0.05),Fe2+水平、ROS、MDA活性明显增加(均P＜0.05),GPX4、β-catenin和Wnt3A蛋白表达显著减少,ACSL4蛋白表达明显增加(均P＜0.05).与LBP组比较,LBP+Fer-1组细胞活力、增殖、侵袭能力显著提高(均P＜0.05).结论 LBP通过诱导胆囊癌细胞铁死亡进而抑制其细胞的增殖和转移.

目的 探讨枸杞多糖(LBP)对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)诱导的视网膜光感受器细胞损伤的保护作用,及其可能的作用机制.方法 实验分为正常组、模型组、对照组和低、中、高剂量实验组.低、中、高剂量实验组分别给予0.01、0.50、2.00 mg·mL-1 LBP;对照组给予 10 μmol·L-1 MK-801 溶液;正常组和模型组均给予等体积的完全培养基.用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法观察细胞存活率,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,用钙成像观察胞内钙离子浓度,用蛋白质印迹法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bel-2相关X蛋白(Bax)的表达水平.结果 中剂量实验组、对照组、模型组和正常组的细胞存活率分别为(85.92±6.21)％、(72.33±5.45)％、(37.92±2.31)％和(97.12±5.11)％,凋亡率分别为(13.80±0.52)％、(15.22±0.51)％、(38.10±0.67)％和(5.34±0.46)％,加入NMDA后30 s钙离子相对浓度分别为3.00±0.37、4.65±0.24、27.24±0.96和1.02±0.32,Bel-2蛋白相对表达水平分别为0.80±0.05、0.78±0.02、0.30±0.04和 1.00±0.05,Bax 蛋白相对表达水平分别为 1.57±0.04、1.91±0.05、5.18±0.06 和 1.00±0.04.中剂量实验组和对照组的上述指标与模型组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 LBP可减缓NMDA对视网膜光感受器细胞的损伤,其作用机制可能与抑制钙离子内流及下调Bax表达、上调Bel-2表达有关.

目的 本研究旨在通过对LBP1C-2靶向Kvβ.2构效关系的探索,阐明LBP1C-2靶向Kvβ.2的活性结构域,为开发具有潜在抗早老痴呆活性的创新药物提供科学依据.方法 枸杞多糖LBP1C-2经部分酸水解得到不同的结构片段后,对其进行单糖组成和分子量分析.通过蛋白芯片挑选出潜在靶蛋白,再用表面等离子体共振(SPR)技术验证各结构片段的靶向性.蛋白质免疫印迹以及细胞免疫荧光测试验证其生物学功能.结果 通过HuProtTM人类蛋白质组芯片高通量筛选到LBP1C-2的潜在靶蛋白Kvβ.2.SPR实验表明LBP1C-2与Kvβ.2蛋白有较强结合,其结合常数KD为1.9×10-7 M.而LBP1C-2的化学降解后各结构片段与靶蛋白Kvβ.2有不同强度结合.其中含鼠李糖和半乳糖醛酸摩尔比为1:1的片段LBP1C-2-1I(18.1 kDa)与原多糖LBP1C-2对Kvβ.2结合强度相近为3.3×10-7 M.对LBP1C-2-1I结构解析表明其有1,2-Rha与1,4-GalA交替连接组成.而该片段对应的酸水解外液部分LBP1C-2-1O与Kvβ.2也有结合,但与其他片段与该蛋白解离相比,更容易解离.从BV2小胶质细胞中敲减KCNAB2基因(Kvβ.2)后,BV2细胞中Aβ的降解被抑制,表明蛋白Kvβ.2可能是早老痴呆发生发展中的一个功能蛋白.结论 LBP1C-2靶向Kvβ.2的主要活性结构域为1,2-Rha与1,4-GalA交替连接组成的主链核心骨架结构.本研究为深化了解LBP1C-2潜在的抗早老痴呆活性提供了重要线索,为基于枸杞多糖抗早老痴呆靶向性药物的设计和开发提供了证据.

目的 多糖是枸杞中主要的活性成分,各产地间枸杞多糖的结构和含量均有差异.目前枸杞多糖的质量控制方法大多都通过单糖组成构建指纹图谱,但仅通过单糖指纹图谱对枸杞多糖进行质量控制,并不能系统地对不同产地的枸杞多糖进行质量控制.因此,我们在单糖指纹图谱的基础上,利用Needs甲基化法确定枸杞多糖的糖残基连接方式,建立Needs甲基化法枸杞多糖指纹图谱,实现对不同产地枸杞的质量控制.方法 通过水提醇沉法获得枸杞多糖,并采用Needs甲基化、完全酸水解、硼氢化钠还原及乙酰化等方法结合GC-MS测定枸杞多糖的糖残基连接方式.结果 将18批枸杞多糖的糖残基连接方式色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2004版)构建出指纹图谱,并结合多种化学计量法评价不同产地间枸杞多糖的差异.相似度计算结果发现,除西藏自治区三批枸杞多糖相似度0.551-0.569,其余15批样品相似度均0.929以上.糖残基连接方式色谱图共标定了16个共有峰,指认了其中10个共有峰,分别为T-Arap、T-Araf、T-Xylp、1,2-Arap、1,3-Rhap、1,5-Araf、T-Glcp、T-Galp、1,4-Glcp、1,6-Galp.HCA、PCA和PLS-DA分析结果将18批次不同产地的枸杞多糖分为3类,并筛选出了3个标志性成分,分别为T-Araf、1,5-Araf和T-Glcp,以此来判断不同产地间枸杞多糖的差异性.结论 首次建立了18批枸杞多糖的Needs甲基化法指纹图谱,为枸杞多糖质量控制提供实验数据参考,进一步证明了多糖在中药质量控制中的作用.