目的:总结河南人群瓜氨酸血症Ⅰ型的发病率及基因变异特点，为瓜氨酸血症Ⅰ型的早期诊断、治疗和遗传咨询提供依据。方法:横断面研究。回顾性分析2016年1月至2022年12月在郑州大学第三附属医院应用串联质谱法完成的河南省814 625例新生儿的遗传代谢病筛查结果。采用二代高通量测序法对瓜氨酸血症Ⅰ型筛查阳性患儿进行 ASS1基因变异分析及父母基因验证。对新检测到的 ASS1基因变异使用罕见外显子组变体集成学习器(REVEL)方法分析表型-基因型相关性，并构建蛋白质三维结构模型进行生物信息学分析。 结果:814 625例新生儿中共确诊8例(1/101 828)瓜氨酸血症Ⅰ型患儿。8例患儿均有特异性瓜氨酸水平增高。基因测序共检出12种变异，均为错义突变，其中包括5种新发现的变异：c.552C>A(p.N184K)、c.140C>T(p.A47V)、c.173A>G(p.K58R)、c.920G>A(p.R307H)和c．790G>A(p.G264S)，其中c.552C>A检出率最高，占18.75%(3/16)。REVEL分析预测这5种变异均为有害性，ASS蛋白三维结构模型显示c.140C>T(p.A47V)和c.920G>A(p.R307H)未发生氨基酸残基间氢键数量的变化，而c.552C>A(p.N184K)、c.173A>G(p.K58R)和c.790G>A(p.G264S)导致氢键减少，可能会影响到ASS蛋白的功能。结论:河南省新生儿瓜氨酸血症Ⅰ型发病率为1/101 828。新发现了5种变异，丰富了人类 ASS1基因变异谱，为瓜氨酸血症Ⅰ型的早期诊断、治疗和遗传学研究提供了重要依据。

目的:探讨新生儿期发病的特发性胆汁淤积症患儿的基因型特点。方法:选择2015年11月至2018年11月首都儿科研究所附属儿童医院新生儿内科收治的特发性胆汁淤积症并完成全外显子测序检查的患儿进行回顾性分析，根据患儿基因检测结果分为病因明确组和病因未明组，分析两组患儿基因检测结果，并比较两组患儿1岁时胆红素水平。结果:共纳入特发性胆汁淤积症患儿62例，均为汉族，男43例（69.4%）；均在新生儿期发病，起病日龄<7 d 39例，7~14 d 9例，>14 d 14例。病因明确组16例，其中希特林蛋白缺乏症4例，Alagille综合征2例，进行性家族性胆汁淤积症1型和2型、半乳糖血症、瓜氨酸血症Ⅰ型、巨大舌-脐膨出综合征、关节挛缩-肾功能不全和胆汁淤积综合征、Menkes病、先天性胆汁酸合成障碍、D-双功能蛋白缺乏症、Dubin-Johnson综合征各1例；病因未明组46例。随访至1岁时，病因明确组胆红素异常比例高于病因未明组，差异有统计学意义（ P=0.001）。 结论:全外显子测序可明确部分特发性胆汁淤积症患儿的病因，诊断结果有助于判断预后。胆汁淤积症患儿的遗传学病因较分散，希特林蛋白缺乏症、Alagille综合征及进行性家族性胆汁淤积症占比较高。

本文报道了1例产后发病并确诊的瓜氨酸血症Ⅰ（citrullinemia typeⅠ, CTLNⅠ）型并最终死亡的产妇。患者28岁，孕1产1，孕39周 +2阴道分娩一女活婴。以“产后4 d，发作性意识模糊伴头晕3 d”为主诉于2020年1月11日从当地医院转诊至河南省人民医院。患者产后10 h间断出现意识模糊，查血氨、血瓜氨酸浓度高，脑水肿，最终因脑疝在自行出院当日死亡，经单基因遗传病基因检测发现 ASS1基因的2个致病突变，包括c.422T>G(p.Val141Gl;Het)和c.431C>G (p.Pro144Arg; Het)，诊断为CTLNⅠ型。CTLNⅠ型常发生于新生儿及婴幼儿，孕期及产后发病罕见，病情凶险，易漏诊和误诊，临床诊断和处理较为棘手。因此对于妊娠期或产后出现神经系统症状且血氨升高的患者要考虑有该病的可能。

瓜氨酸血症属于一种常染色体隐性遗传性疾病,临床多表现为血瓜氨酸浓度升高,导致系列尿素循环障碍性疾病.目前,临床上对于瓜氨酸血症发病机制尚未阐明,可分为Ⅰ型、Ⅱ型基因突变位点两种,且二者存在明显差异性.无论Ⅰ型、Ⅱ型瓜氨酸血症均表现为血清瓜氨酸水平异常升高,临床症状、发病时间存在明显差异,婴儿期发作多出现胆汁淤积性黄疸,可伴有肝脏轻度肿大;成人发作多表现为消瘦、饮食偏好等,严重者会引起记忆力障碍、意识混乱等,成为我国居民死亡的原因之一.而瓜氨酸血症临床多采用饮食治疗、对症治疗及肝脏移植等,不同治疗方法各有优缺点,多数患者能从中获益.因此,本综述分析瓜氨酸血症的发病机制、临床表现,探讨瓜氨酸血症的早期筛查方法、治疗方法及不同方法对预后的影响.

目的 探讨新生儿型氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ缺乏症(CPSⅠD)的临床特点及实验室分析结果.方法 收集1例CPSⅠD患者的临床资料及基因测序结果,并结合相关文献进行分析.结果 患儿出生2 d即出现吮奶差,随后出现精神反应差,拒奶,嗜睡,昏迷和高氨血症,1个月后开始出现贫血;患儿外周血及其父母外周血染色体核型均显示正常,基因测序结果显示患儿为2个CPSⅠ基因变异,均位于2号染色体,分别源于父方和母方,其中c.2359(exon19)C>T是致病突变位点,c.3389(exon27)C>A基因突变位点临床意义不明;地中海贫血血红蛋白电泳检测结果Bart's2.9,基因型诊断为SEA杂合,血串联质谱瓜氨酸显著降低.结论新生儿疾病筛查技术结合基因测序有利于疾病的早发现早诊断,新生儿起病迅速,常规治疗未见明显改善时应高度怀疑遗传代谢性疾病,并进行相应的筛查和精准确诊.

目的 应用高分辨率熔解曲线(high resolution melting curve analysis,HRM)和DNA测序的方法对1例瓜氨酸血症1型患儿及其父母进行快速的基因诊断.方法 抽取患儿、患儿父母及100名正常体检者的外周血,采用HRM分析技术针对ASS1基因的16个外显子进行全外显子扫描,并对曲线异常的区域进行DNA测序.随后采用逆转录-PCR对ASS1基因的mRNA进行分析.最后,采用PolyPhen-2和SIFT Blink软件分别对ASS1基因中的突变位点进行同源性和生物学功能分析.结果 血液生化检测结果显示患儿外周血中血氨达到286 μmol/L,超过正常参考值的5倍以上,串联质谱结果显示患儿外周血中瓜氨酸浓度高达487.69 μmol/L,CIT/ARG达148.66,均远高于正常范围.HRM的结果发现在ASS1基因第6外显子和第8外显子的区域(包含部分相邻内含子)中患儿及其父母的HRM曲线与正常对照不一致.DNA测序结果证实,在患儿第6外显子中发生了c.380G＞A的纯合突变,该突变会导致ASS1蛋白p.R127Q的改变.而在第8内含子中则发生了IVS8+60G＞A的纯合变异.患儿的父母中这两个位点均为杂合变异.100名正常对照样本中均未检出变异.逆转录-PCR结果表明ASS1基因第8内含子中IVS8+60G＞A的变异不会导致RNA剪接的异常.结构分析结果表明p.R127Q位点在45种脊椎动物中保守性非常高,它是ASS1蛋白中与瓜氨酸结合的位点,对于ASS1蛋白功能的行使非常重要.结论 在中国大陆人群中发现了ASS1基因第6外显子的c.380G＞A及第8内含子的IVS8+ 60G＞A复合纯合突变,其中c.380G＞A纯合突变可能是引起患儿尿素循环障碍的致病突变.

1临床病例患儿,女,2月龄,现存活,汉族,出生28天时因“新生儿疾病筛查异常提示瓜氨酸血症”入院.患儿为第3胎第2产,足月剖宫产出,出生体重35009,Apgar评分10分,否认出生时窒息及抢救史.门诊以“瓜氨酸血症待排”收住入院.患儿自起病以来精神食奶可,入睡可,大小便正常.父亲年龄42岁,母亲年龄37岁,均体健,非近亲结婚,否认家族遗传疾病史及特殊病史.入院体查:T 36.7℃,P135次/min,R 35次/min.

目的 建立宁夏地区新生儿遗传代谢病串联质谱筛查中氨基酸、有机酸、脂肪酸切值(cut-off值)的范围,为本地新生儿遗传代谢病的筛查提供理论依据.方法 利用串联质谱技术非衍生法,使用两个批次的试剂盒和美国CDC质控品做质控,对宁夏地区符合筛查纳入标准的45 602例活产新生儿进行多种遗传代谢病检测;采用百分位数法制定宁夏地区氨基酸、有机酸、脂肪酸的cut-off值,第1百分位数(P1)为低值阳性,第99百分位数(P99)为高值阳性;Wilcoxon秩和检验比较宁夏地区串联质谱切值与上海新华医院的差异.结果 串联质谱筛查新生儿45 602例,确诊阳性病例31例,其中高苯丙氨酸血症20例,枫糖尿症1例,高甲硫氨酸血症2例,瓜氨酸血症Ⅰ型1例,甲基丙二酸血症3例,异戊酸血症1例,短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症1例,中链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症1例,肉碱棕榈酰转移酶Ⅱ缺乏症1例.宁夏地区新生儿串联质谱切值与上海新华医院相比,精氨酸(ARG)、甘氨酸(GLY)、酪氨酸(TYR)、鸟氨酸(ORN)、亮氨酸(LEU)、缬氨酸(VAL)、异戊酰肉碱(C5)、十二碳酰肉碱(C12)、C0/(C16+ C18)等检测指标差距较大.结论 随着筛查数量的不断增加及筛查范围的不断扩大,逐步积累筛查经验和阳性预测值,对宁夏地区新生儿遗传代谢病串联质谱筛查的cut-off值进行相应调整.

目的 了解怀化市新生儿氨基酸代谢病的发病率.方法 回顾性分析怀化市2015年3月～ 2018年2月应用串联质谱技术进行筛查的新生儿85 604例,其中男性45 969例,女性39 635例,并对其中确诊的16例新生儿氨基酸代谢病筛查结果及临床表现进行分析.结果 在85 604例新生儿中筛查并诊断氨基酸代谢病16例,发病率为1/5350,分别为高苯丙氨酸血症6例(37.5％),高甲硫氨酸血症4例(25％),瓜氨酸血症Ⅰ型3例(18.75％),希特林蛋白缺乏症2例(12.5％),高脯氨酸血症Ⅰ型1例(6.25％).结论 怀化市新生儿期高苯丙氨酸血症最常见,其次为高甲硫氨酸血症、瓜氨酸血症Ⅰ型,希特林蛋白缺乏症,高脯氨酸血癌Ⅰ型.串联质谱技术在氨基酸代谢病早期诊断方面有重要应用价值.

目的 对一例临床怀疑瓜氨酸血症Ⅰ型患儿进行分子遗传学研究,明确致病突变,并对其相关的临床特点、转归进行总结.方法 收集患儿的临床资料,提取患儿外周血DNA,应用高通量捕获测序确定患儿ASS1基因突变情况,并用Sanger测序验证测序结果以及ASS1基因的家系分析.结果 患儿生后第6天出现体温不升、呻吟、喂养困难、惊厥,血氨明显升高(1240 μmol/L),血串联质谱(MS/MS)分析提示血瓜氨酸显著升高(1979.03 μmol/L),尿气相色谱/质谱(GC/MS)提示乳清酸升高,予限制蛋白饮食、精氨酸治疗后血氨恢复正常,神经系统损害持续加重,头颅MRI提示脑萎缩、脑软化明显,随访至12月时死亡.基因序列分析发现患儿ASS1基因存在c.910C＞T和c.1087C＞T复合杂合突变,其中c.910C＞T突变来源于父亲、c.1087C＞T突变来源于母亲.c.910C＞T突变导致第304号氨基酸由精氨酸变异为色氨酸,c.1087C＞T突变导致第363号氨基酸由精氨酸变异为色氨酸,为错义突变.结论 通过高通量捕获测序和Sanger测序确定了一例瓜氨酸血症Ⅰ型患儿的致病基因,随访发现该复合杂合突变引起的瓜氨酸血症患儿临床表现重,预后极差.