目的:探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3（TIM-3）与干扰素γ（IFN-γ）在肺腺癌的表达情况及其意义。方法:以广州医科大学附属肿瘤医院的36例肺腺癌患者作为研究对象，收集患者肺组织及其外周血，密度梯度离心法分离外周血单核细胞，实时荧光定量PCR技术测定TIM-3与IFN-γ的mRNA相对表达量；免疫印迹和免疫组织化学技术测定蛋白表达量。结果:肺腺癌患者癌组织TIM-3 mRNA与蛋白表达量均高于癌旁组织和正常组织（均 P<0.05）；伴有淋巴结转移肺腺癌患者的TIM-3呈高表达（ P<0.05）。肺腺癌患者癌组织IFN-γ mRNA与蛋白表达量均低于癌旁组织及正常组织（均 P<0.05）；在正常组织与癌旁组织中，伴有淋巴结转移肺腺癌患者的IFN-γ表达量高于未转移者（ P<0.05）。癌组织中TIM-3、IFN-γ的mRNA与蛋白表达均呈负相关（ r=-0.254， P=0.040； r=-0.312， P=0.010）。 结论:肺腺癌中TIM-3呈现相对高表达，且可能通过下调IFN-γ的表达而促进肺腺癌的生长和转移，这可能是肺腺癌治疗的潜在靶点之一。

报道2例EB病毒（EBV）阳性弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）伴HAVCR2突变患者。2例患者均无免疫缺陷病史，发病后均出现机会性感染，外周血T细胞绝对计数明显减少，T细胞和肿瘤组织高表达T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域-3（TIM-3）；二代测序检出甲型肝炎病毒细胞受体2（HAVCR2）基因突变。1例患者接受了R-COP方案（利妥昔单抗、环磷酰胺、长春新碱、泼尼松）治疗效果欠佳，T细胞计数和功能未恢复，EBV未清除，总生存仅为7个月；另一例患者接受程序性死亡受体1（PD-1）抑制剂联合CHOP样方案（环磷酰胺、表柔比星、长春新碱、地塞米松）治疗获得完全缓解持续时间超过6个月，T细胞计数和功能恢复正常，EBV被清除。结合文献复习提示HAVCR2突变导致TIM-3过表达继发T细胞耗竭，获得性免疫缺陷导致EBV再激活可能与EBV阳性DLBCL的发生、发展密切相关；提示尽早使用免疫检查点抑制剂恢复免疫功能可能改善疗效。

目的:寻找内毒素耐受（ET）的潜在关键基因，为脓毒症的治疗提供理论和实验依据。方法:①实验1（基因芯片与生物信息分析）：从基因表达数据库（GEO）中下载ET相关基因数据集GSE47783，该数据集由脂多糖（LPS）刺激小鼠巨噬细胞建立脓毒症模型（LPS组）和ET模型（ET组）后进行实验获得；利用IDEP 0.92软件筛选数据集中两组差异表达基因（DEG），同时进行基因本体（GO）分析，并定位DEG主要富集的功能和信号通路。利用基因与蛋白质相互作用检索数据库（STRING），针对DEG构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络，筛选出核心基因甲型肝炎病毒细胞膜蛋白受体2（HAVCR2）进行后续验证研究。②实验2（小鼠巨噬细胞株RAW264.7模型制备）：体外培养RAW264.7细胞，通过LPS刺激制备ET模型（ET组，用10 μg/L的LPS培养24 h后，再用100 μg/L的LPS培养4 h）和脓毒症模型（LPS组，用100 μg/L的LPS培养4 h）；磷酸盐缓冲液（PBS）组给予等体积溶媒PBS培养4 h。采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）和蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测细胞HAVCR2的mRNA及蛋白表达。③实验3（HAVCR2慢病毒载体转染RAW264.7细胞）：为进一步明确HAVCR2是否参与ET形成，用慢病毒短发夹RNA（shRNA）技术敲低RAW264.7细胞中的HAVCR2后，再制备ET模型（HAVCR2 --ET组），并设非敲低HAVCR2的对照组（ET组）。采用RT-qPCR法检测细胞中巨噬细胞极化关键基因〔精氨酸酶1（ARG1）、CD206、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、一氧化氮合酶2（NOS2）〕的mRNA表达。 结果:①实验1：共获得1 013个DEG；与LPS组比较，ET组有521个上调基因，492个下调基因；这些DEG的功能主要为增加生物合成、抑制炎症反应，主要富集于Janus激酶/信号转导与转录激活因子（JAK/STAT）、NOD样受体、Toll样受体（TLR）、TNF、缺氧诱导因子-1（HIF-1）等信号通路。选择ET组第一个表达上调的膜蛋白HAVCR2作为验证研究的目标。②实验2：体外实验结果显示，经大剂量LPS处理后，RAW264.7细胞中HAVCR2 mRNA表达较PBS组明显下调；而ET组HAVCR2 mRNA表达明显高于LPS组（2 -ΔΔCT：1.10±0.10比0.60±0.10， P<0.05）；Western blotting检测结果与RT-qPCR结果一致。③实验3：与ET组相比，HAVCR2 --ET组细胞ARG1和CD206的mRMA表达明显降低〔ARG1 mRNA（2 -ΔΔCT）：0.50±0.10比1.00±0.10，CD206 mRNA（2 -ΔΔCT）：0.73±0.10比1.00±0.10〕，下游因子TNF-α和IL-1β的mRNA表达明显升高〔TNF-α mRNA（2 -ΔΔCT）：2.20±0.10比1.00±0.10，IL-1β mRNA（2 -ΔΔCT）：9.00±0.10比1.00±0.10〕，差异均有统计学意义（均 P<0.05）；两组NOS2 mRNA表达差异无统计学意义。 结论:HAVCR2参与脓毒症下游炎性因子的调节，参与ET的形成，有望成为脓毒症新的治疗靶点。

目的 研究戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)感染人肝癌细胞HepG2前后,HepG2细胞的相关基因表达变化,为初步探索HEV在宿主细胞内感染机制及致病机理奠定基础.方法 对HEV感染组HepG2细胞和对照组HepG2细胞的RNA进行高通量测序(RNA-seq技术),利用生物信息学方法对测序数据进行分析,对感染组和对照组的差异表达基因进行筛选、功能注释和通路富集分析.结果 以基因表达差异倍数在2倍及以上为标准,从感染组与对照组共筛选出差异表达基因132个,其中,感染组相比于对照组,上调表达基因127个,下调表达基因5个.Gene Ontology(GO)功能富集分析注释结果显示,差异表达基因主要富集在病毒防御反应、固有免疫应答、病毒基因组复制的负调控及干扰素应答等过程;主要行使RNA结合、蛋白结合、调节解旋酶活性、NAD+ ADP-核糖基转移酶的活性等分子功能.利用KEGG数据库作为参考,这些基因主要参与甲型流感、单纯疱疹感染、麻疹、C型肝炎、RIG-I样受体信号通路、病毒致癌、乙型肝炎、Toll样受体信号通路、胞质DNA传感通路、趋化因子信号转导通路和细胞凋亡等通路.结论 通过功能及通路筛选,发现DDX58、STAT1、CXCL8、STAT2、TLR3、CXCL10、EIF2AK2、IRF9和IFIH1等基因可能在HEV感染抗病毒免疫过程中发挥重要作用.

目的 分析母血及羊水中T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(TIM-3)、GATA结合蛋白3(GATA-3)水平对胎膜早破(PROM)合并宫内感染的诊断价值.方法 选择PROM患者89例作为研究对象,发生宫内感染者42例作为感染组,未发生宫内感染者47例作为未感染组,并选择同期正常足月孕妇45例作为对照组.根据宫内感染严重程度将PROM合并宫内感染患者分成轻度组16例、中度组17例、重度组9例.检测血、羊水中TIM-3、GATA-3 mRNA及蛋白水平,比较对照组、未感染组、感染组和不同感染程度孕妇血、羊水中TIM-3、GATA-3 mRNA及蛋白水平,受试者工作特征曲线分析血清及羊水中TIM-3、GATA-3蛋白单独及联合诊断PROM孕妇发生宫内感染的效能.结果 对照组、未感染组、感染组血及羊水中TIM-3 mRNA、蛋白水平依次升高(P<0.05),GATA-3 mRNA、蛋白水平依次降低(P<0.05);轻度组、中度组、重度组血及羊水中TIM-3 mRNA、蛋白水平依次升高(P<0.05),GATA-3 mRNA、蛋白水平依次降低(P<0.05);血清TIM-3、GATA-3蛋白单独及联合,羊水TIM-3、GATA-3蛋白单独及联合诊断PROM孕妇发生宫内感染的曲线下面积分别为0.854、0.813、0.937,0.834、0.850、0.922.结论 PROM合并宫内感染患者母血及羊水中TIM-3呈高表达,GATA-3呈低表达,两者均对PROM孕妇发生宫内感染有一定的诊断价值,联合诊断效能更高.