目的 构建负载黄芩素的双网络水凝胶并对其促进创面愈合的机制进行研究.方法 将黄芩素(baicalein)、聚乙二醇二丙烯酸酯(polyethylene glycol diacrylate,PEGDA)、羧甲基壳聚糖(carboxym-ethyl chitosan,CMCS)等材料,通过紫外光交联及浸泡等方式,构建负载黄芩素的双网络水凝胶(PEGDA/CMCS@B),将实验分为PEGDA/CMCS、PEGDA/CMCS@B0.5 和PEGDA/CMCS@B1.0 3 组,运用扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)观察其形态.选用大肠杆菌(E.coli)和金黄色葡萄球菌(S.aureus)两种细菌,采用抑菌圈实验探究双网络水凝胶的抑菌性能.将L929 细胞与3 种不同水凝胶共培养48 h,运用活/死染色试验和CCK-8 检测,验证水凝胶的细胞相容性.在大鼠背部建立全皮层缺损创面模型,通过不同材料治疗,运用Image J软件分析 15 天创面修复情况.结果 SEM结果显示,PEGDA/CMCS@B双网络水凝胶具有丰富的孔隙结构.抑菌实验证明PEGDA/CMCS@B水凝胶具有更为出色的抑菌作用(P＜0.001).大鼠全层创面模型实验证实PEGDA/CMCS@B水凝胶可显著促进创面愈合.结论 负载黄芩素的双网络水凝胶可有效促进创面愈合.

目的 建立顶空-气相色谱法测定中药到手香提取物中苯、丙烯腈、甲基丙烯酸甲酯、甲苯、1,2-二氯乙烷、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、氯苯、苯乙烯和二乙烯苯11种溶剂残留的分析方法.方法 供试品经顶空进样器85℃平衡45 min,分流比10∶1(V∶V),采用DB-WAX聚乙二醇为固定相的弹性石英毛细管柱(长 30 m,内径 0.32 mm,膜厚 0.5 μm),FID氢火焰离子化检测器进行分析.结果 11种挥发性有机物分离效果较好,在0.22～23.86 μg·mL-1 的浓度范围内线性关系良好(r≥0.99);方法 定量限为0.008 4 μg·mL-1≤LOQ≤0.543 2 μg·mL-1;低、中、高水平下各成分的平均回收率为84%～103%之间;相对标准偏差≤10%(n=6),经方法学验证后该方法符合实验要求.3批样品中甲苯、间二甲苯、邻二甲苯及二乙烯基苯有检出,低于定量限,均未超标.结论 该方法易于操作,结果可靠,可用于中药到手香提取物中的残留溶剂检测,亦为其他中药提取物中残留溶剂分析提供方法参考,确保用药安全.

目的 观察两性离子(含磺酸甜菜碱甲基丙烯酸酯,SBMA)水凝胶敷料对大鼠压疮创面愈合的影响.方法 取24只SD大鼠,根据压疮缺血再灌注原理制作压疮模型.按随机数字表法将模型大鼠分为NS组、PEG组和SBMA组,每组8只,去除创面坏死组织后,分别采用生理盐水、含聚乙二醇甲基丙烯酸酯(PEG)水凝胶和两性离子水凝胶敷料处理创面,干预后第4、7、10、14天观察创面面积,干预后第7、14天观察组织结构及胶原沉积情况、免疫组织化学观察CD31、VEGF、Ki67、CK10表达.结果 SBMA组创面愈合率在各时间点显著高于其他两组(均P＜0.05),且PEG组高于NS组(均P＜0.05);干预后第7天SBMA组CD31、VEGF表达水平最高(P＜0.05),第14天CD31、VEGF表达水平有所下降;上皮组织Ki67表达水平逐渐上升,SBMA组上升最快,PEG组次之,NS组最慢;三组均在第14天出现创面上皮化,相较于其他两组,SBMA组表皮分化程度最高.结论 两性离子水凝胶敷料在促进压疮创面血管生成和再上皮化方面具有一定优势,能促进压疮创面愈合.

运用表面引发原子转移自由基聚合反应(SI-ATRP)在玻璃表面构建甲基丙烯酸聚乙二醇酯(PEGMA)-甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)的二元嵌段共聚物(PEGMA-GMA),然后利用GMA中丰富的环氧基团将内皮细胞选择性多肽精氨酸-谷氨酸-天冬氨酸-缬氨酸(REDV)通过开环反应固定在PEGMA-GMA聚合物刷的末端.采用静态水接触角、X射线光电子能谱(XPS)以及原子力显微镜(AFM)等对聚合物刷的结构和亲水性能进行了表征,结果证明在玻璃基材表面成功构建了REDV多肽修饰的二元嵌段共聚物刷;同时利用紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)对表面固定的REDV进行了定量表征.最后采用复钙化凝血时间和血小板黏附实验对涂层的血液相容性进行表征,结果显示聚合物涂层具有良好的血液相容性.这种修饰多肽的聚乙二醇生物活性涂层为后续表面内皮化研究奠定了良好的前期基础.

目的 开发一种奥曲肽(Oct)修饰的具有肿瘤靶向功能的新型聚合物纳米磁共振(MR)造影剂.方法 利用可逆加成链转移(RAFT)的活性自由基聚合方法,以寡聚乙二醇甲基丙烯酸酯,聚乙二醇甲基丙烯酸酯与含1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸三叔丁酯结构的共聚物进行聚合,并进一步偶联Oct,合成了Oct修饰的新型支化聚合物纳米颗粒.进一步与钆离子螯合,制备了新型肿瘤靶向的支化聚合物磁共振成像纳米造影剂P(DO3A-Gd)-Oct.表征产物的核磁共振氢谱、动态光散射粒径分布(DLS)和透射电子显微镜(TEM)形貌分析.初步测试P(DO3A-Gd)-Oct的稳定性,溶血绿,细胞毒性和体内安全性.利用临床3.0T磁共振成像仪进行磁共振弛豫率的测试,以及H22肝癌荷瘤小鼠的体内磁共振成像.结果 DLS和TEM数据显示P(DO3A-Gd)-Oct纳米颗粒的水合粒径为20 nm.100 μg/ml时溶血率仅为0.34％,且无显著的细胞毒性,尾静脉注射后与正常小鼠相比主要脏器的病理结构和主要生化指标均无显著差异.该产物的纵向弛豫率r1为8.33 mM-1s-1.尾静脉注射60与120 min后,荷瘤小鼠的横断位T1加权图像中可见肿瘤区域显著的磁共振信号增强,与非靶向的对照组相比,肿瘤部位的钆离子浓度显著提高.结论 P(DO3A-Gd)-Oct具有良好的生物相容性以及优异的磁共振成像性能,有望提高肝癌等恶性肿瘤磁共振诊断的灵敏度和准确度.

目的 制备具有良好生物相容性的地塞米松聚合物胶束,为血管炎症提供一种高效的治疗方法.方法 以聚己内酯-聚乙二醇载体和聚己内酯-聚甲基丙烯酸乙酯阳离子载体为材料制备地塞米松载药聚合物胶束.对所制备的载药聚合物胶束的形态、粒径、PDI、Zeta电位、包封率及载药量进行表征.以人脐静脉内皮细胞为细胞模型,采用噻唑蓝法考察载药胶束对HUVECs的细胞毒性并通过流式细胞术测定HUVECs对胶束的摄取情况.结果 制备的载药胶束为椭球形,粒径约161 nm,Zeta电位为17.0±0.9 mV,包封率为83.87％±1.28％,载药量为15.06％±0.28％.为使载地塞米松胶束对细胞的毒性降到最低,其胶束浓度应不高于400μg·mL-1.细胞摄取结果证实了阳离子载体具有加速细胞摄取的作用,当阳离子载体含量为50％时,其细胞摄取量为游离组的2.3倍.结论 成功制备了相容性好且包封率高的地塞米松载药胶束,可加速药物进入内皮细胞,更好地达到治疗血管炎症的效果.

背景:水凝胶是一类有弹性的生物材料,表面光滑,含水量高,有望成为软骨再生的候选材料.目的:文章综述了仿生水凝胶在软骨组织工程中的最新研究成果和进展.方法:由第一作者检索Web of Science和PubMed数据库1986-2021年发表的文献,英文检索词为"hydrogel,cartilage regeneration,cartilage defect,cartilage tissue engineering".初检文献3 665篇,筛选后对86篇文献进行分析总结.结果与结论:①用于合成仿生水凝胶的天然聚合物包括蛋白质基材料(如明胶、胶原蛋白和丝素蛋白等)和多糖材料(如透明质酸、壳聚糖和藻酸盐等),合成聚合物包括聚乙烯醇、聚乙二醇、聚乳酸、聚丙交酯-乙交酯共聚物等,这些材料具有各自的优缺点,通过交联这一方式可以使合成仿生水凝胶在具备更多的优势同时规避一些原材料的不足.②当前阶段已研究的仿生水凝胶材料各有优劣,例如通过紫外光交联的硫酸软骨素-聚乙二醇材料具有一定的抗炎特性,也可促进软骨组织再生,然而其促进软骨细胞的增殖和成熟能力有待加强;通过紫外光交联合成的明胶-羟基磷灰石材料细胞接种效率高,生物相容性较好,但是尚未有实验将人骨髓间充质干细胞接种于其上并进行实验观察,实验环境复杂性不足且观测周期较短,仍需进一步验证;酶促交联合成的聚乙二醇-二甲基丙烯酸能促进软骨基质形成,压缩模量变化范围大,然而其在改善软骨基质形成过程中也存在相应副反应.③因此,仿生水凝胶是软骨组织工程中具有较大优越性及应用潜力的新材料,目前仍然未出现较为完美的可应用于临床治疗软骨缺损的仿生水凝胶材料,未来还需进一步研究出性能更加完备的仿生水凝胶材料.

目的:研究仿细胞膜结构聚合物2甲基丙烯酰氧乙基磷酰胆碱/对硝基苯氧羰基聚乙二醇甲基丙烯酸酯/多巴胺(PMNC)涂层对醋酸纤维素膜(CA)透析器生物相容性的影响.方法:将PMNC聚合物涂敷在CA膜表面,通过体外蛋白质吸附实验和动物体外循环(ECC)实验观察膜表面对纤维蛋白原吸附、血小板、补体和白细胞的黏附及激活的作用.结果:与无涂层CA膜相比,PMNC聚合物涂层CA膜对牛血清白蛋白和纤维蛋白原的吸附量分别下降了81％和82％.在ECC过程中,无涂层组血小板、白细胞计数及纤维蛋白原浓度均出现明显下降,同时β血小板球蛋白、白细胞介素8、凝血酶-抗凝血酶复合物、补体片段5a和凝血酶原片段1+2浓度显著上升,而PMNC聚合物涂层组上述指标均没有明显变化.ECC 120 min后无涂层组透析器凝血现象明显,而PMNC聚合物涂层组透析器均未发生凝血.结论:PMNC聚合物涂层能够显著提高CA膜透析器的生物相容性,本研究为进一步将PMNC聚合物涂层应用于医疗器械的表面改性提供了重要的实验依据.

为了解决纯角蛋白多孔材料力学性能差的问题,利用巯基-烯点击化学反应制备聚乙二醇二甲基丙烯酸酯(PEGDMA)改性角蛋白,在此基础上,将改性角蛋白与海藻酸钠(SA)共混得到角蛋白多孔材料,并利用交替矿化法对多孔材料进行仿生矿化,最终制备了仿生矿化角蛋白多孔材料.红外(FTIR)测试显示,PEGDMA成功接枝到角蛋白上,经过改性的角蛋白,其多孔材料弹性得到明显提高.扫描电子显微镜(SEM)、红外以及X射线衍射(XRD)测试结果均显示,HAP成功沉积于多孔材料表面,多孔材料表面形貌变得粗糙.经过矿化,角蛋白多孔材料性能得到全面提升,其屈服点应力达到3.1 MPa,生物相容性提升至117.86％,对Cu2+的吸附量高达159.0 mg/g.这对拓展角蛋白多孔材料的应用具有较好的启示意义.

目的 建立一种简便快速的一步式心血管疾病标志物蛋白质即时检测(POCT)芯片系统.方法 利用光化学反应,在环烯烃共聚物薄片(COC)上合成具有抗非特异性吸附的聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯(PEGMEMA)层,在接枝后的表面进行非接触式的喷墨打印,形成抗体微阵列.使用紫外光进行引发,探索了不同光照时间和不同聚合物单体浓度下改性COC薄片表面的接触角角度以及聚合物接枝密度的变化.利用原子力显微镜和红外光谱仪表征了光化学反应改性后COC薄片表面的微观形貌和化学结构,并对比了光化学反应改性前后薄片表面的非特异性蛋白吸附情况.进一步探索了合适的抗体喷墨打印浓度及辅剂条件,并在接枝后的表面打印了心血管损伤生物标志物生长刺激表达基因2蛋白(ST2)的固定型捕获抗体和荧光标记的可溶解型抗体.结果 当聚合物单体的质量分数为30％,光照时长为4 min 时,接触角降到最低为38.5°,接枝密度达到最大为68.47 μg/cm2.原子力显微镜和红外光谱仪表征均证明了PEGMEMA层的成功引入.表面接枝PEGMEMA层降低了COC 薄片的非特异性蛋白吸附量.当固定型捕获抗体为80 mg/L 时,固定效率最高.与不同相对分子质量的聚乙二醇(PEG)相比,海藻糖作为辅剂时可溶解型检测抗体与固定型捕获抗体的识别效率更高.当ST2 为10 mg/L 时,可以观察到溶解后固定斑处有检测抗体结合.结论 通过光化学反应,在COC 薄片表面接枝了抗非特异性吸附的PEGMEMA,在接枝后的薄片表面喷墨打印检测所需的抗体试剂,用简易快捷的方法制备形成了一种能够实现一步式检测的蛋白质芯片,可灵活应用于多种场景下心血管疾病标志物蛋白的快速检测,助力心血管精准医学发展.