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TRPC3对OIR小鼠视网膜和人视网膜血管内皮细胞生物学行为的调控作用
编辑人员丨6天前
目的:探讨瞬时受体电位阳离子通道亚家族C成员3(TRPC3)对氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜和人视网膜血管内皮细胞(HREC)生物学行为的调控作用。方法:选取健康SPF级7日龄C57BL/6小鼠32只,采用随机数字表法分为对照组和OIR组,每组16只,其中对照组不做特殊处理,OIR组小鼠诱导OIR模型。出生后第17天(PN17)采用视网膜铺片免疫荧光染色验证模型构建是否成功。将体外培养HREC分为正常对照组、转染试剂组和si-TRPC3组,其中正常对照组不做特殊处理,转染试剂组和si-TRPC3组分别采用转染试剂和转染试剂+si-TRPC3转染。采用实时荧光定量PCR法检测TRPC3 mRNA相对表达量;采用Western blot法检测TRPC3、转录因子NF-E2相关因子(Nrf2)和超氧化物歧化酶(SOD)蛋白相对表达量。另将HREC分为正常对照组、血管内皮生长因子(VEGF)组、si-TRPC3组和Pyr3(TRPC3通道抑制剂)组,分别用完全培养基、含有20 ng/ml VEGF重组蛋白的培养基、含有20 ng/ml VEGF重组蛋白的培养基(si-TRPC3转染72 h)和含有20 ng/ml VEGF重组蛋白+1 μmol/L Pyr3的培养基培养48 h,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测HREC增生能力;分别采用细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞横向和纵向迁移能力。结果:PN17时OIR组小鼠视网膜出现病理性新生血管团簇强荧光染色。OIR组小鼠视网膜TRPC3 mRNA和蛋白相对表达量分别为2.057±0.244和1.517±0.290,明显高于对照组的0.983±0.033和0.874±0.052,差异均有统计学意义( t=6.165、3.094,均 P<0.05)。si-TRPC3组TRPC3 mRNA和蛋白相对表达量明显低于正常对照组和转染试剂组,Nrf2和SOD蛋白相对表达量明显高于正常对照组和转染试剂组,差异均有统计学意义(均 P<0.05)。CCK-8实验结果显示,VEGF组细胞吸光度( A)值明显高于正常对照组,si-TRPC3组和Pyr3组细胞 A值明显低于VEGF组,差异均有统计学意义(均 P<0.05)。细胞划痕实验结果显示,VEGF组细胞横向迁移率高于正常对照组,si-TRPC3组和Pyr3组细胞横向迁移率低于VEGF组,差异均有统计学意义(均 P<0.05)。Transwell实验结果显示,VEGF组染色细胞数明显多于正常对照组,si-TRPC3组和Pyr3组染色细胞数明显少于VEGF组,差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:OIR模型小鼠视网膜中TRPC3表达水平升高,下调TRPC3可抑制HREC增生和迁移能力,其机制与Nrf2氧化应激通路激活有关。
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编辑人员丨6天前
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瞬时受体电位锚蛋白1在炎症性疾病发生发展中作用的研究进展
编辑人员丨6天前
炎症性疾病是由异常的免疫反应引起的,其特征是炎症介质和细胞的失衡。目前的抗炎治疗仍有所限制,抗炎治疗仍是一大热点。瞬时受体电位锚蛋白1(TRPA1)是通道TRP超家族的成员,其被激活导致炎症反应。已有多项研究表明,TRPA1参与慢性阻塞性肺疾病、支气管哮喘、结肠炎、动脉粥样硬化、皮肤神经性炎症、胰腺炎等疾病的炎症调控。但目前缺乏对于TRPA1在各系统炎症性疾病中的作用作一总结,本综述系统地描述了TRPA1对炎症性疾病的治疗潜力,并讨论了其可能的机制,为以TRPA1为靶点的药物的开发与应用提供新方向。
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编辑人员丨6天前
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一个Ⅱ型糖尿病合并恶性肿瘤发生家系的基因变异分析
编辑人员丨6天前
目的:对一个Ⅱ型糖尿病(T2DM)合并恶性肿瘤复杂家系进行基因变异分析,筛选其候选致病/易感基因。方法:用全外显子组测序(WES)技术对T2DM合并恶性肿瘤复杂家系的11名成员进行DNA测序,用生物信息学方法筛选候选致病/易感突变,并用Sanger测序对候选突变进行验证。结果:该家系共21人,其中11人诊断为T2DM,7人诊断为乳腺癌、胃癌、胰腺癌或脑瘤。对11名家系成员(7人诊断为T2DM,两人诊断为乳腺癌)进行了WES测序分析,筛选出6个候选糖尿病相关突变,其中功能丢失型(TOF)突变1个为瞬时受体电位阳离子M亚家族成员1(TRPM1) c.G4240T p.E1414X;非LOF突变5个,涉及腺苷酸激酶7(AK7)、CROCC、溶质载体家族15成员1(SLC15A1)、丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)、Teashirt锌指同源异型盒2(TSHZ2)基因。同时还筛选得到4个肿瘤相关遗传位点(rs3184504、rs1053338、rs11894115和rs11552449)。结论:TRPM1 c.G4240T变异可能是导致该家系糖尿病合并肿瘤发生的关键候选变异;而rs3184504、rs1053338、rs11894115和rs11552449遗传位点可能为该家系乳腺癌易感性位点。
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编辑人员丨6天前
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瞬时受体电位通道在黑素细胞中的作用及相关疾病研究
编辑人员丨6天前
瞬时受体电位通道(TRP通道)是位于细胞膜或细胞器膜上的一种特殊类型的非选择性阳离子通道家族,在黑素细胞中显著表达。本文综述近年来TRP通道在黑素细胞中的生理功能及其参与色素性皮肤病及黑素瘤病理过程的相关研究进展,为黑素相关疾病的防治提供新的理论基础。
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编辑人员丨6天前
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原发性低镁血症伴继发性低钙血症的临诊应对
编辑人员丨6天前
原发性低镁血症伴继发性低钙血症(HSH)是甲状旁腺功能减退的罕见病因之一。现报道近期本科诊治的1例原发性HSH患者,并在此基础上探讨该病的诊治策略。患者为26岁男性,以反复四肢麻木、抽搐为主要表现,生化检测提示存在低镁血症、低钙血症、低钾血症及甲状旁腺功能减退,后经基因检测证实存在瞬时受体电位阳离子通道-M亚家族-成员6(TRPM6)基因突变。经规律口服补镁治疗后,患者症状明显缓解。随访患者症状无再发,血电解质正常。原发性HSH多呈常染色体隐性遗传,因TRPM6基因突变导致肠道及肾脏的镁吸收障碍,进而引起系列临床表现,经补镁治疗通常可明显缓解相关症状。
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编辑人员丨6天前
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瞬时受体电位通道蛋白A1在疼痛中的研究进展
编辑人员丨6天前
疼痛是一种与组织损伤或潜在组织损伤相关的感觉、情感、认知和社会维度的痛苦体验。近年来很多报道表明瞬时受体电位阳离子通道家族(transient receptor potential cation channel, TRPs)中的瞬时受体电位通道蛋白A1(transient receptor potential channel A1, TRPA1)通道参与温度、机械、炎症刺激等引起的不同类型疼痛反应,并且通过多种路径发挥作用。文章从TRPA1的分子结构、表达部位、其激动及拮抗物质的角度出发,探讨其参与不同类型疼痛的机制,对目前关于TRPA1在疼痛治疗中的研究进展进行综述,为开发新的镇痛药物提供参考依据。
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编辑人员丨6天前
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辣椒素受体在心肌缺血/再灌注损伤中保护作用的研究进展
编辑人员丨6天前
瞬时感受器电位香草酸受体1(transient receptor potential vanilloid 1, TRPV 1)又称辣椒素受体或香草样受体1,它是瞬时受体电位蛋白组的一个亚家族,在多种脏器缺血/再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)诱导的损伤中起着关键作用。在心肌I/R的过程中(离体或在体模型中),TRPV 1通道在各种条件因素下被激活后,可以通过一系列的信号级联机制增加降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide, CGRP)和P物质(substance P, SP)的释放,从而减轻心肌损伤。文章从糖尿病鼠、预处理和后处理以及参与的信号级联机制几方面来综述TRPV 1通道在心肌I/R损伤中的心肌保护作用,以期未来更合理地将TRPV 1这一靶点在临床上应用于心肌缺血患者。
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编辑人员丨6天前
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介导寒冷温度感觉的角膜瞬时受体电位通道研究进展
编辑人员丨6天前
角膜寒冷感觉的传导依赖于寒冷觉温度感受器。目前发现瞬时受体电位(TRP)离子通道蛋白超家族参与了寒冷感觉的传导过程,其中最经典的是TRPM8通道。TRPM8通道在寒冷觉感受器神经元末梢的电活动中发挥了重要作用,并参与了基础泪液分泌的调控等一系列活动。不仅如此,寒冷觉温度感受器在包括角膜感觉、疼痛、泪液分泌、眨眼反射以及干眼的发生发展等方面发挥作用,可能会为缓解疼痛、治疗干眼病及潜在的其他眼表病变带来新的靶点。现笔者对寒冷觉温度感受器的分类、特点、临床意义以及未来应用等方面进行综述。
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编辑人员丨6天前
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TRPV3基因突变导致表皮功能障碍和角质细胞异常分化的作用机制研究
编辑人员丨6天前
目的:运用生物信息学方法筛选与瞬时感受器电位香草素受体亚家族3(transient receptor potential vanillin 3, TRPV3)突变密切相关的一组基因和信号通路,探讨 TRPV3突变对局灶型掌跖角化症和Olmsted综合征表皮功能和角质细胞增殖分化的影响。 方法:对转染 TRPV3突变体的HEK293T细胞进行Sanger DNA测序。筛选与 TRPV3突变相关的差异基因,利用加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)筛选与样本特征相关性最大的模块,两者取交集后得到差异共表达基因,并进行富集和功能注释。基于STRING数据库构建蛋白质相互作用网络,利用多算法筛选出与 TRPV3突变相关的关键基因。 结果:用野生型或 TRPV3突变体转染HEK293T细胞24 h后,发现各细胞系的活细胞数减少,尤其是Gly573Cys、Gly573Ser和Trp692Gly。综合WGCNA和差异分析筛选得到共30个与 TRPV3突变相关的差异共表达基因,其中GO显示其主要富集在RNA聚合酶Ⅱ对转录的正调控和核酸模板转录的正调控等功能;京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路分析发现主要富集在丝裂原活化蛋白激酶信号通路、TRP通道的炎症介质调节、细胞衰老和鞘脂代谢等途径。将CytoHubba 4种算法的结果进行交叉,共鉴定出4个关键靶基因,包括 FOS、 EGR1、 ATF3、 EGR2。 结论:本研究发现 TRPV3突变抑制细胞活性,与Olmsted综合征和局灶型掌跖角化病等皮肤角化性疾病密切相关,并通过生物信息学方法筛选得到与 TRPV3突变相关的差异共表达基因,可为后续研究 TRPV3突变引起相关疾病的发病机制和治疗提供参考依据。
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编辑人员丨6天前
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穴位贴敷对支气管哮喘小鼠皮肤、肺组织TRPV1表达及IFN-γ、IL-4水平的影响
编辑人员丨6天前
目的:观察穴位贴敷对支气管哮喘(bronchial asthma,BA)小鼠皮肤、肺组织中瞬时受体电位阳离子通道香草酸亚家族成员1(TRP cation channel subfamily V member 1,TRPV1)表达及血清中IFN-γ、IL-4水平的影响,探讨穴位贴敷治疗哮喘的机制。方法:将75只BALB/c小鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、穴位贴敷组、假贴敷组、地塞米松组,每组15只。采用屋尘螨滴鼻法制备BA小鼠模型。造模结束后,取小鼠双侧“肺俞”“心俞”“膈俞”进行穴位贴敷,穴位贴敷组贴敷药物为芥子、延胡索、细辛、甘遂药物组方,假贴敷组给予凡士林贴敷,1次/d,共贴敷14次;地塞米松组灌胃10 g/kg地塞米松,1次/d,连续干预14 d。运用EMKA-WBP肺功能检测系统检测小鼠气道阻力;天狼星红染色法、HE染色法观察小鼠肺组织病理形态改变,免疫组化法检测肺组织、皮肤组织中TRPV1表达,ELASA法检测肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-4水平。结果:在浓度为12.5、25.0、50.0 mg/ml的氯化乙酰甲胆碱溶液激发后,与模型组比较,穴位贴敷组、地塞米松组小鼠气道高阻力Penh值下降( P<0.05);肺组织HE染色和天狼猩红染色显示气管内炎性浸润和胶原纤维增生情况改善( P<0.05);与模型组比较,穴位贴敷组、地塞米松组肺组织TRPV1[(0.28±0.06)、(0.28±0.05)比(0.31±0.08)]表达降低( P<0.05);肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-4水平降低( P<0.05)。 结论:穴位贴敷可通过诱发皮肤反应治疗哮喘,其作用机制可能与激活肺组织、皮肤组织中TRPV1,降低IFN-γ、IL-4水平有关。
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编辑人员丨6天前
