目的 探究箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum(Sieb.et Zucc.)Maxim.叶片不同发育时期黄酮类成分变化与元素积累的规律,揭示其黄酮类成分的形成机制.方法 以箭叶淫羊藿叶片为研究对象,将其按照不同发育时期分为t1～t6共6个时期,高效液相色谱(HPLC)测定4种黄酮类成分含量,紫外分光光度法测定总黄酮醇苷含量;实时荧光定量法(RT-qPCR)测定17个与黄酮类成分合成关键酶基因的相对表达量;电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定25种元素含量;皮尔逊(Pearson)相关性分析黄酮类成分与元素的关系.结果 淫羊藿苷含量呈现先上升后下降的趋势,朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C、总黄酮醇苷的含量显著降低,但是5种黄酮类成分总量却显著升高,在t4和t5时期大量积累.大部分黄酮类成分合成关键酶基因表达量在t4和t5时期显著上调,在t2时期显著下调,不同基因的表达量随叶片发育而变化;叶片中元素Mg、Ca、Ti、Mn、Fe、Sr和Ba元素含量显著升高,元素K和Co含量显著降低;元素P、K、V、Cu的含量与箭叶淫羊藿中黄酮类成分含量呈显著性正相关.结论 箭叶淫羊藿叶片中黄酮类成分形成过程受到叶片发育程度及相关基因表达的影响,黄酮类成分在叶片发育后期大量积累.

目的 探究秦岭箭叶淫羊藿(EPI)对骨质疏松(OP)大鼠骨代谢及胫骨骨微结构的影响.方法 2023年8月—2024年1月于西安迪赛生物医药有限责任公司实验室进行实验,将50只大鼠随机分为Sham组、Model组、EPI低剂量(EPI-L)组、EPI高剂量(EPI-H)组、EPI-H+YC-1[缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)抑制剂)]组;除Sham组外,其余组采用双侧卵巢切除术构建OP大鼠模型.ELISA检测大鼠血清白介素10(IL-10)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血钙(Ca)、血磷(P)、骨保护素(OPG)、骨钙素(OCN)、碱性磷酸酶(ALP);双能X射线骨密度仪检测大鼠胫骨密度(BMD);Micro-CT检测胫骨骨微结构;HE染色观察胫骨组织形态;Western blot检测骨形成蛋白(BMP-2)、Runt相关转录因子2(Runx2)、半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)蛋白水平.结果 与Sham组比较,Model组大鼠胫骨骨微结构和骨组织形态明显受损,血清IL-6、TNF-α、ALP水平、胫骨骨表面积与体积比、骨小梁分离度和胫骨骨组织cleaved caspase-3蛋白表达水平显著升高(P均＜0.05),血清IL-10、OPG、OCN、Ca和P水平、胫骨BMD、骨小梁厚度、胫骨骨组织BMP-2、Runx2、HIF-1α、VEGF、VEGFR-2蛋白表达水平显著降低(P均＜0.05);与Model组比较,EPI-L组和EPI-H组大鼠胫骨骨微结构和骨组织形态受损明显减轻,血清IL-6、TNF-α、ALP水平、胫骨骨表面积与体积比、骨小梁分离度、胫骨骨组织cleaved caspase-3蛋白表达水平显著降低(P均＜0.05),血清IL-10、OPG、OCN、Ca和P水平、胫骨BMD、骨小梁厚度、胫骨骨组织 BMP-2、Runx2、HIF-1α、VEGF、VEGFR-2 蛋白表达水平显著升高(P 均＜0.05);与 EPI-H 组比较,EPI-H+YC-1 组上述指标均被部分逆转(P均＜0.05).结论 EPI可降低OP大鼠炎性反应,调节骨代谢平衡,改善胫骨骨微结构,可能与激活HIF-1α/VEGF/VEGFR-2信号通路有关.

目的:建立超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用(UHPLC-Q Exactive Orbitrap/MS)结合多元统计分析技术对5种不同基原淫羊藿化学成分差异分析的方法.方法:对5种基原30批淫羊藿样品的UH-PLC-Q Exactive Orbitrap/MS全扫描数据进行多元统计分析.利用SIMCA软件进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA).结果:5种基原淫羊藿的化学成分具有差异性,根据相关参考文献及谱图信息,共鉴定出27种化学成分.所建立的OPLS-DA模型具有良好的数据描述能力和预测能力.柔毛淫羊藿化学成分具有显著性差异,而朝鲜淫羊藿与箭叶淫羊藿,淫羊藿与巫山淫羊藿之间的化学成分及含量具有相似性.经过筛选与分析,确定8种差异化学成分.结论:建立的方法可分析出5种基原淫羊藿化学成分的差异性,操作简便,方法准确,可为不同基原淫羊藿的质量控制及开发应用提供理论依据.

目的 通过UPLC-Q-TOF-MS技术,探讨不同基原淫羊藿和巫山淫羊藿的药材体外化学成分的差异,为淫羊藿及巫山淫羊藿药材鉴定及质量控制奠定基础.方法 采用Agilent SB-C18(2.1 mm×100 mm,2.7 μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液-甲醇(+)及水-甲醇(-)为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL·min-1.质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在正、负离子模式下进行数据采集.通过保留时间、相对分子质量及二级碎片离子对巫山淫羊藿、淫羊藿、柔毛淫羊藿、箭叶淫羊藿及朝鲜淫羊藿药材中的化学成分进行鉴定,并基于所鉴定出的化合物对不同基原淫羊藿及巫山淫羊藿药材的化学成分通过SIMCA软件进行差异分析.结果 不同基原淫羊藿及巫山淫羊藿药材中共鉴定出朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C、淫羊藿苷等 37 种化学成分,经过对比发现不同基原的淫羊藿及巫山淫羊藿药材中淫羊藿定L、2''-鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ、木兰花碱等12 种成分的相对含量具有明显差异,差异化合物经鉴定主要为黄酮类化合物.结论 本试验所发现的差异化合物可以作为区分不同基原淫羊藿及巫山淫羊藿药材的指标,这5种药材的鉴别和质量控制奠定基础.

淫羊藿为常用补肝益肾中药材,目前仍以野生资源为主.近年来随着用量猛增,其资源在不断减少,市场品种的使用情况也在不断发生变化.该文在已有研究基础上,深入产区调研收集准确基原的植物标本和样品,总结概括了药典品5种基原(淫羊藿Epimedium brevicornu、箭叶淫羊藿E.sagittatum、柔毛淫羊藿E.pubescens、朝鲜淫羊藿E.koreanum和巫山淫羊藿E.wushanense)的产销现状,并对药典中淫羊藿药材基原规定进行了讨论;同时应用实体显微、光学显微及体式荧光显微等技术进行观察和比较,参考叶结构及解剖相关文献,归纳了药典品较为专属且实用的鉴别特征,从而为临床用药、市场监督、日常检验、标准起草等工作提供有益的参考.

目的:通过大田试验研究,比较箭叶淫羊藿不同采收时期产量和质量,确定适宜的采收期.方法:每月采样,测定地上部分生物量;HPLC测定不同采收期淫羊藿叶4种黄酮成分朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷的含量.结果:箭叶淫羊藿3月底含量最高,8月底产量最高.结论:根据箭叶淫羊藿不同采收期的综合评价结果确定其适宜采收期为8月31日前后.

淫羊藿为小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicomu、箭叶淫羊藿E.sagittatum、柔毛淫羊藿E.pubescens或朝鲜淫羊藿E.koreanum的干燥叶,在我国有着几千年的用药历史,具有补肾阳、强筋骨、祛风湿等功效.现代研究表明宝藿苷Ⅰ在淫羊藿中含量较低,但却有着广泛的药理作用,如抗骨质疏松、抗肿瘤、改善认知功能障碍、脑缺血再灌注损伤保护、神经保护等.鉴于宝藿苷Ⅰ诸多的生物学活性及药理作用,对其制备方法和药理作用的研究越来越成为关注的热点.该文对近年来宝藿苷Ⅰ的制备方法及药理作用的相关研究进行了汇总和整理,为更好的大量制备宝藿苷Ⅰ及合理开发利用提供参考.

目的 基于斑马鱼代谢-效/毒(M-Act/Tox)联合评价箭叶淫羊藿代谢、抗骨质疏松效应及毒性.方法 用受精后1～6d(1～6 dpf)斑马鱼评价箭叶淫羊藿(生药质量浓度200、500、1 000、1 500、2 000 μg/mL)的安全性,观察鱼脏器形态、计数死亡数并计算斑马鱼半数死亡浓度(LC50);用5 dpf斑马鱼暴露于箭叶淫羊藿(生药250 μg/mL)24 h,分析6个代表性黄酮成分朝藿定A (EA)、朝藿定B(EB)、朝藿定C(EC)、淫羊藿苷、箭藿苷C(SC)与宝藿苷I(BI)变化;用25 μmol/L泼尼松龙诱导斑马鱼骨质疏松模型,采用茜素红对培养至8 dpf的各组斑马鱼幼鱼骨骼染色,进行显微检测、数码成像,并用图像软件定量分析骨骼染色区域来评价箭叶淫羊藿抗骨质疏松活性.结果 箭叶淫羊藿在500 μg/mL及以上质量浓度时致斑马鱼中毒(脏器变形或死亡),毒性与给药质量浓度和时间相关;经斑马鱼作用后,EA、EB、EC及淫羊藿苷几近全部转化,代谢物以SC与BI为主;箭叶淫羊藿在一定质量浓度(6.25、12.5、25 μg/mL)具显著的抗泼尼松龙诱导斑马鱼骨丢失作用.结论 用斑马鱼有效评价了箭叶淫羊藿的代谢、抗骨质疏松效应与毒性.斑马鱼M-Act/Tox联合法有机整合了斑马鱼代谢方法、骨质疏松模型及毒性评价法的优势,实现基于体内过程的效应/毒性评价,为抗骨质疏松中药筛选提供新思路与方法.

目的 对淫羊藿的生境适宜性开展评价,为种植区域选取和优质淫羊藿药材资源合理利用提供依据.方法 使用最大熵模型与地理信息系统(GIS)技术,结合生态环境数据和淫羊藿4个基原(淫羊藿、柔毛淫羊藿、箭叶淫羊藿和朝鲜淫羊藿)的实际地理分布信息,预测淫羊藿全国适宜生境的空间分布并进行等级划分.结果 降水量是影响不同基原淫羊藿生境适宜性最重要的生态因子,地域间不同的气候节律导致降水量影响不同基原淫羊藿的时间不同;淫羊藿和柔毛淫羊藿适宜生境面积最大的地区为四川省,分别为251.33×103 km2和302.22×103 km2,这2种基原在分布范围上也存在重合,主要集中于甘肃、陕西和四川省的低海拔林区;朝鲜淫羊藿作为特有种,仅分布在与朝鲜接壤的辽宁和吉林部分地区;箭叶淫羊藿较上述3个种的适宜分布范围有所南移,集中于浙江和安徽交界一带.结论 淫羊藿4个基原种虽归于同属药用植物,但对生境要求各不相同,导致其适宜生境地理分布存在空间差异,因此在引种栽培和种植规划时需对不同基原进行鉴别和区分.

淫羊藿具有补肾阳、强筋骨和祛风湿的功效,是临床常用中药.然而近年来淫羊藿及其中成药如仙灵骨葆胶囊、壮骨关节丸的不良反应报告逐渐增多,淫羊藿毒性引发越来越多的关注.该文通过全面系统的文献分析方法,对淫羊藿古今文献进行溯源考证,根据2015年版《中国药典》记载,淫羊藿为小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicomu、箭叶淫羊藿E.sugittutum、柔毛淫羊藿E.pubescens或朝鲜淫羊藿Ekoreuuum的干燥叶,《中国药典》同时收录了巫山淫羊藿E.wushanense,与淫羊藿同为小檗科植物,研究发现5种淫羊藿在地理分布、成分含量、毒性等方面均存在差异.该文同时阐述了淫羊藿毒性机制及增效减毒研究,报告其不良反应病例,并通过现代含淫羊藿中成药仙灵骨葆胶囊与壮骨关节丸的毒性回顾性对比研究,认为淫羊藿具有心血管系统、神经毒性、肝毒性、长期毒性、急性毒性、遗传毒性及特殊毒性,安全用药因素包括患者证候、医生因素、药物因素、炮制及配伍因素,并提出提高患者安全用药意识教育、规范淫羊藿品种及质量监管及深入淫羊藿毒性研究等策略,以期引起广大学者对淫羊藿安全性的重视,提高淫羊藿安全用药水平,防止不良反应事件发生.