目的:探讨不同生产工艺对人用狂犬病疫苗(人二倍体细胞)可能存在的致敏反应的影响。方法:在4种不同生产工艺人用狂犬病疫苗免疫后的临床血清中随机选取360份血清样本，ELISA法检测不同生产工艺疫苗和不同采血时间点血清样本中的总IgE水平，采用SPSS19.0软件进行统计学分析。结果:总IgE检测结果显示，4种疫苗免疫后的血清总IgE阳性率均为20% (6/30)，总IgE的均值最低为9 IU/ml，最高为210 IU/ml，重复测量的方差分析显示不同时间采血检测的总IgE水平差异无统计学意义( P＝0.284)，多步浓缩纯化的人二倍体细胞疫苗的总IgE水平明显低于Vero细胞疫苗( P＝0.024)。 结论:免疫剂量的增加不会导致总IgE水平的升高，人用狂犬病疫苗(人二倍体细胞)的生产工艺能够对可能的致敏性杂质进行去除，具有良好的安全性。

纯化Vero细胞狂犬病疫苗(purified Vero cell rabies vaccine, PVRV)在狂犬病预防中的应用已历经40余年。对近年来国内外PVRV在狂犬病预防中的相关研究进行综述显示，在简化的Zagreb免疫方案中，PVRV具有与在标准Essen方案中相似的免疫原性和安全性。PVRV与纯化鸡胚细胞狂犬病疫苗(purified chicken embryo cell rabies vaccine, PCECV)、人二倍体细胞狂犬病疫苗(human diploid cell rabies vaccine, HDCV)具有相似的免疫原性和安全性。在疾病等特殊人群中，PVRV也同样具有良好的免疫原性和安全性。此外，PVRV与吸附无细胞百白破灭活脊髓灰质炎联合疫苗(acellular diphtheria, tetanus, pertussis and inactivated poliomyelitis combined vaccine, DTP-IPV)等的联合接种并未发现免疫干扰现象，这为儿童在接种免疫规划疫苗同时进行狂犬病疫苗接种提供了可行性。PVRV与马狂犬病免疫球蛋白联合应用也可获得较好的预防效果。PVRV在预防狂犬病方面发挥着重要的作用，其广泛应用将为实现世界卫生组织提出的2030年消除犬传人狂犬病目标作出积极贡献。

目的:评价纯化Vero细胞狂犬病疫苗(purified vero cell rabies vaccine, PVRV)Zagreb和Essen方案接种后的免疫原性和免疫持久性。方法:前瞻性研究：在广西壮族自治区疾病预防控制中心(广西CDC)犬伤门诊招募初次狂犬病暴露的Ⅱ级以下暴露者，随机分成Zagreb(2-1-1)方案组和Essen(1-1-1-1-1)方案组，全程接种同厂家同批号的PVRV，免疫后第45天、1年、2年及3年时各采静脉血3 ml分离血清，用快速荧光灶抑制试验(rapid fluorescent focus inhibition test, RFFIT)检测狂犬病病毒中和抗体(rabies virus neutralizing antibody, RVNA)，分析RVNA阳性率和几何平均滴度(geometric mean titer, GMT)随时间推移而衰减情况。回顾性研究：查阅广西CDC犬伤门诊的狂犬病疫苗接种知情同意书，筛选3年内首次注射PVRV(同厂家但批号不限)且未使用被动免疫制剂的暴露者，分免疫满1年组、2年组及3年组，各组内又分Zagreb和Essen方案组，采集静脉血3 ml分离血清，用RFFIT法检测RVNA。结果:前瞻性研究：Zagreb和Essen方案组全程免疫后的第45天、1年、2年及3年其RVNA阳性率分别为100%、95%、85%、80%和98.25%、89.47%、89.47%、85.96%，同一时间点两方案组的RVNA阳性率差异均无统计学意义( P>0.05)；RVNA GMT分别为11.32 IU/ml、1.69 IU/ml、1.30 IU/ml、1.30 IU/m和13.18 IU/ml、2.13 IU/ml、1.87 IU/ml和1.84 IU/ml，同一时间点两方案组的RVNA GMT差异无统计学意义( F＝1.971, P＝0.164)；两方案组RVNA GMT随时间推移而衰减的趋势一致(时间*组别 F＝0.702, P＝0.435)。回顾性研究：Zagreb和Essen方案组在满1年组、2年组及3年组的RVNA阳性率分别为100%、95%、91.43%和94.73%、86.21%、87.5%，同一时间点两方案组的RVNA阳性率差异均无统计学意义( P>0.05)；RVNA GMT分别为2.65 IU/ml、2.03 IU/ml、1.57 IU/ml和3.2 IU/ml、2.58 IU/ml、2.45 IU/ml，同一时间点两方案组的RVNA GMT差异均无统计学意义( t＝0.534, P>0.05; t＝0.401, P>0.05; t＝1.419, P>0.05)。 结论:PVRV采用Zagreb和Essen方案接种均具有同等良好的免疫原性和免疫持久性。

本研究对三种人用狂犬病疫苗进行了综合评价和比较。系统搜索了七个电子数据库。使用Cochrane手册v5.1.0评估偏倚风险。个体发病率采用随机效应模型进行整合，成对比较采用网络荟萃分析。共收录了27篇文章，共有18 630名参与者。HDCV总不良反应的合并发生率显著低于PCECV。HDCV导致局部疼痛、发热和乏力的发生率低于PVRV。HDCV引起局部疼痛和发热的发生率低于PCECV。在第7天的血清转化率或第14天的狂犬病病毒中和抗体滴度方面没有观察到显著差异。与其他两种狂犬病疫苗相比，HDCV在安全性方面表现出优势，但在免疫原性方面没有观察到相同的情况。

目的 分析和总结 25 436 例动物致伤患者的致伤和流行病学特点、暴露预防处置措施,为动物致伤防治提供科学依据.方法 收集兵器工业五二一医院 2018 年 1 月—2020 年 12 月共 25 436 例动物致伤患者资料,综合分析动物致伤患者人群分布特征、致伤临床特征和暴露后预防相关因素,进行对比分析.结果 23 456 例动物致伤患者,年均 8 493 例,平均占我院急诊外科门诊的 15.43%,占急诊科门诊量 9.43%.其中Ⅱ级暴露 2 780例(10.93%),Ⅲ级暴露 22 555 例(88.67%),首次暴露 20 211 例(79.46%),再次暴露 5 225 例(20.54%);接受伤口规范性外科处置 17 055 例(67.05%),全部接受暴露后狂犬病疫苗接种预防,其中选择Vero(Vero细胞纯化)疫苗17148 例(67.56%),HDCV(人二倍体细胞)疫苗 8 230 例(32.56%),接受狂犬病人免疫球蛋白注射 10 107 例(44.52%);疫苗接种后出现不良反应共计 387 例,其中Vero疫苗接种后不良反应 309 例(0.18%),HDCV疫苗接种后不良反应 78 例(0.01%).结论 动物致伤患者是急诊外科外伤的重要群体,临床医生应高度关切和重视,结合致伤相关因素进行相应的综合诊治分析和救治措施管理是降低致伤后狂犬病暴露风险、伤口感染、早日康复的有效模式.

目的 应用复合凝胶Capto Core700作为纯化介质去除狂犬病疫苗中的Veto细胞宿主蛋白和宿主细胞DNA等杂质.方法 将Vero细胞接种至微载体,在celligen plus生物反应器中培养,按MOI=0.002接种狂犬病病毒,连续制备10批狂犬病疫苗原液.经过滤及浓缩后加入β-丙内酯,于2～8℃灭活24 h,获得病毒灭活液.上样至装载复合凝胶Capto Core700的纯化柱进行层析纯化,并按《中国药典》三部(2015版)的方法检测宿主细胞蛋白去除率、宿主细胞DNA去除率、狂犬病病毒糖蛋白回收率及总蛋白去除率.同时与传统Sepharose系列凝胶纯化方法进行比较.结果 10批疫苗纯化液的宿主细胞蛋白去除率为58.3％～63.2％,宿主细胞DNA去除率均＞90％,糖蛋白回收率范围为52.3％ ～ 74.5％,蛋白去除率范围为7.22％ ～ 11.76％.与传统Sepharose系列凝胶纯化方法比较,差异较小,且Capto Core700的上样量为3倍柱体积,高于Sepharose凝胶(15％).结论 Capto Core700凝胶可有效去除狂犬病疫苗中的杂质,缩短了纯化工艺时间.

目的 应用40 L生物反应器大规模生产人用狂犬病疫苗.方法 以PV2061株狂犬病病毒为毒种,Vero细胞为基质,应用CelliGen 510生物反应器(40 L),灌流式细胞培养,连续收获病毒液,经浓缩、灭活、纯化,制备人用狂犬病疫苗,并对生产过程中各步骤工艺进行取样检测.结果 细胞培养密度达1.2×107个/mL,病毒感染后可连续收获约16 d,病毒收获液最高滴度为7.4 LgLD50/mL.经纯化,杂蛋白去除率达98％以上,成品宿主细胞DNA含量≤50 Pg/剂,效价≥4.5 IU/剂,每罐产量可达13万剂疫苗.结论 CelliGen 510生物反应器可应用于大规模生产人用狂犬病疫苗,疫苗成品检定符合《中国药典》三部(2015版)相关标准.

目的 建立首批Vero细胞蛋白质国家对照品,用于人用狂犬病疫苗Vero细胞宿主蛋白残留量检测试验的验证.方法 本对照品系采用狂犬病病毒固定株接种Vero细胞,经培养、收获、浓缩、灭活病毒、纯化后,加入适量的人血白蛋白、右旋糖酐40冻干制成.本对照品蛋白含量溯源于Vero细胞蛋白质标准品(250022-201901),应用Vero细胞分泌型蛋白检测试剂盒(ELISA)对其进行标定后赋值.随机选取16支标准品,测定其pH值,采用方差分析统计检验均匀性;随机选取对照品,分别在4、25和37℃放置不同时间(1、2、3和4周),不同时间点取3支,以Vero细胞蛋白质标准品(250022-201901)绘制标准曲线,ELISA法测定蛋白含量,采用方差分析统计检验稳定性.结果 经协作标定,本对照品标示量值为7.7 μg/mL,参考范围为(7.7±3.6)μg/mL,均匀性及稳定性良好.结论 Vero细胞蛋白质对照品已获批使用,批号为250023-201901,该对照品的建立,对加强人用狂犬病疫苗的质量控制具有重要意义.

目的 对暴露后接种人用纯化狂犬病疫苗(Vero细胞)(purified Vero cell rabies vaccine,PVRV)的安全性进行Meta分析.方法 以狂犬病、疫苗和安全性为关键词,分别于PubMed、EMBASE、Cochrane和中国知网(China National Knowledge Infrastructure,CNKI)检索文献,并辅以人工检索.根据纳入和排除标准筛选文献并提取数据,应用Review Manager 5.4软件对两种免疫方案(Zagreb和Essen)的不良反应事件发生率进行Meta分析.结果 共纳入12项研究,其中7项为前瞻性研究,5项为回顾性研究.大多数纳入研究的偏倚风险较低.Zagreb方案不良反应事件的发生率显著高于Essen方案[相对危险度(relative risk,RR):1.01,95％CI:0.90～1.14;I2=73.00％,P＜0.05],但存在高度异质性差异.Zagreb方案发热、疼痛和硬结事件的发生率显著高于Essen方案(RR分别为1.14、0.92、0.86,95％CI分别为0.82～1.60、0.73～1.14、0.29～2.51;I2分别为81％、65％、92％,P＜0.01).结论 暴露后采用两种方案接种PVRV均具有良好的安全性,但采用Zagreb方案免疫时,应注意儿童和老年人等免疫能力相对较差人群的身体状况,以免发生不良反应事件.