目的:对13个携带线粒体tRNA Thr 15924A>G突变Leber遗传性视神经病变(Leber’s hereditary optic neuropathy，LHON)家系进行的线粒体遗传学和功能分析。 方法:对收集的13个携带m.15924A>G突变家系进行眼科学检查、线粒体全基因组测序、线粒体单体型分析，对照组和突变组细胞进行活性氧和线粒体膜电位分析。结果:患者的临床表现及眼科检查均符合LHON的典型特征，平均发病年龄为14.387岁，13个家系平均外显率为14.02%。患者线粒体单体亚型分别为M10、D、C、B、F，分布集中在M、N单体型，其中M单体型占比69.2%，N单体型占30.8%，且携带m.15924A>G突变LHON患者单体型以M、N为主，单体型M发生视力损伤的风险比单体型N大( P＝0.027)。m.15924A>G突变破坏了31T-39A碱基对，影响tRNA Thr反密码子臂结构的稳定性，自由能改变。细胞实验结果证明突变组细胞活性氧水平增加( P＝0.019)，线粒体膜电位水平降低( P<0.001)。 结论:m.15924A>G突变破坏了tRNA Thr 31T-39A碱基对，自由能改变，细胞活性氧增加，膜电位降低，表明该突变影响tRNA Thr结构的稳定性，导致线粒体功能障碍。

目的:探究单体型B与线粒体m.1555A>G突变致聋的相关性。方法:采集单体型为B且携带m.1555A>G家系(TP023)成员外周血，建立永生化淋巴细胞系作为实验组(D组)；选取单体型非B但携带m.1555A>G的永生化淋巴细胞(S组)和单体型为B但不携带m.1555A>G的永生化淋巴细胞(C组)为对照组；分别对三组细胞的线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential，MMP)、线粒体蛋白表达、细胞活性氧(reactive oxygen species，ROS)、三磷酸腺苷(adenosine triphosphate，ATP)水平进行检测，评估线粒体功能。结果:相比于C组，D组细胞的MMP下降29.5%( P<0.001)，ROS水平上升30.8%( P<0.001)，ATP产量下降39.0%( P<0.001)，S组细胞MMP下降21.3%( P＝0.002)，ROS水平上升8.7%( P＝0.202)，ATP产量下降11.2%( P＝0.661)；两组细胞的ND4、CytB等蛋白表达均有不同程度的下降。 结论:线粒体单体型B可能是导致m.1555A>G突变携带者的耳聋外显率增高的原因。

目的 对线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA) 1555A＞G突变的携带者进行听力学和遗传学分析,探讨mtDNA 1555A＞G突变致非综合征型聋的机制.方法 检索英文PubMed数据库,中文CNKI、万方和维普数据库,并结合本课题组收集的病例,对患者临床资料尤其听力学相关信息进行汇总和统计学分析.结果 共收集857个有效病例,统计分析显示,氨基糖苷类用药史和听力损失程度存在显著正相关,发病年龄和听力损失程度存在显著负相关,患者听力曲线多表现高频下降且与用药史无关,异质性与听力损失程度有显著负相关,线粒体单体型D(mitochondrial haplotype D)在样本中占比最高,线粒体单体型B的外显率最高.结论 线粒体DNA 1555A＞G突变相关的非综合征型聋受多种因素影响,氨基糖苷类药物可以导致或加重听力损失,患者发病年龄越早听力损失越严重,且用药对年龄小的患者造成更大损伤,同质性突变患者听力损失程度较异质性突变患者严重,线粒体单体型B可能加重听力损伤程度.患者的临床资料分析对预判最有可能携带耳聋易感基因的人群至关重要,是临床上针对性地进行早期耳聋基因筛查的第一关.

目的:对仅有女性发病的11个携带m.11778G>A突变的Leber遗传性视神经病变(LHON)家系中患者的表型表现进行分析.方法:对1362例汉族LHON患者的MT-ND4基因进行了系统的筛查,再对携带MT-ND411778G>A突变的11个家系进行线粒体全基因组测序及线粒体单体型分析.结果:筛查发现11个携带m.11778G>A突变的LHON家系仅累及女性母系成员.此11个家系中患者LHON外显率较低,分别为16.7％、18.8％、15.0％、6.7％、6.7％、33.3％、20.0％、16.7％、7.7％、8.3％、25.0％,平均每个家系外显率为15.90％±0.08％.LHON患者的视力损伤程度由轻度到重度不等,发病年龄7～25(12.4±4.8)岁,属于LHON的高发年龄阶段.11位先证者的线粒体单体型分别为B5a、Z、N9、B4c1b、G2h、B5a、M7b、N9a10、C7b、M7b1、M10.结论:本研究中11个携带相同m.11778G>A突变的不同家系之间,及在相同线粒体遗传背景下的同一家系中不同母系成员间LHON外显率和发病年龄都存在着显著差异,表明m.11778G>A突变是LHON发病的分子基础,但突变本身并不足以造成LHON的表型表达,提示其他修饰因子(线粒体单体型、核修饰基因及环境因素)在LHON的发生发展中发挥了一定的作用.

目的:研究线粒体单体型对17个携带m.3460G>A突变Leber遗传性视神经病变(LHON)家系外显率的影响.方法:对收集的1218个LHON患者进行m.3460G>A筛查,然后对携带m.3460G>A患者进行线粒体全基因组测序、单体型分析.结果:共筛查出17个携带m.3460G>A突变家系,占该研究群体的1.4％(17/1218),线粒体单体型分析显示,其分别为单体亚型A、B5b、B5b2、C4a1、D4、D5b1、F1、F1a1、H2、M7b1、M7b2、M7c1、M8a2、M10a、M12,单体亚型D5b1有3例,其余各1例.11例单体亚型属于单体型M,6例属于单体型N,前者出现视力损伤的人数明显多于后者,损伤程度亦重于后者.结论:LHON家系中单体型M出现重度视力损伤的概率大于单体型N.

目的:探讨线粒体tRNATyrA5834G突变与Leber遗传性视神经病变(LHON)的相关性.方法:对2个携带tRNATyrA5834G突变的LHON家系进行临床和分子遗传学特征等分析评估,对家系先证者和其他成员进行详细的眼科相关检查、线粒体全基因组分析、种系发生学分析及单体型分析.结果:先证者的临床症状及眼科相关检查均符合典型LHON表现,家系其他成员无异常.2个家系均未携带ND1 G3460A和ND4 G11778A及ND6 T14484C这3个原发突变位点,多态性变异位点均属于东亚单体型M7b.2个先证者均携带具有高度保守性的A5834G和T12811C突变位点,其中A5834G在17个物种中的保守系数为87.5％.结论:线粒体tRNATyrA5834G突变可能是与LHON相关的mtDNA突变位点,同时低外显率提示其他因素,如核修饰基因、环境等可能影响这2个家系的表型表达.

目的 通过对213例耳聋患者和120例正常对照进行线粒体12S rRNA突变筛查后,发现2个携带线粒体A1555G突变的聋病家系,并对其进行临床和分子遗传学评估,探讨耳聋的分子机制.方法 使用PCR对2个耳聋家系的母系成员进行线粒体基因组的扩增并进行Sanger测序,测序结果与线粒体标准序列比对,筛选突变位点.同时对突变进行保守性分析、tRNA二级结构分析,评估突变的致病性.结果 2个耳聋家系有较高的外显率,分别为66.6％和62.5％,明显高于其他携带A1555G突变的耳聋家系.线粒体基因组测序分析后发现存在12S rRNA?A1555G,tRNAThr?A15924G和G15927A突变,分别属于东亚线粒体单体型B4c1和B5b1.A15924G和G15927A突变位于tRNAThr反密码子环,在进化上高度保守,突变可能影响tRNAThr的二级结构和功能,从而导致线粒体功能缺陷.未发现其他有功能学意义的突变位点.结论 线粒体tRNAThrA15924G和G15927A可能是耳聋有关的继发性突变位点,通过影响tRNAThr的代谢并加重A1555G突变引起的线粒体功能损伤,进而增加耳聋的外显率和表现度.