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正交设计探讨续苓健骨方对快速骨丢失模型大鼠的组方优化研究
编辑人员丨1个月前
目的 通过正交设计观察续苓健骨方中的药物对卵巢切除术(ovariectomy,OVX)模型大鼠骨密度、骨微结构和骨代谢影响的主次作用,并探讨疗效较佳优化组别的潜在作用机制.方法 大鼠随机分为假手术组、模型组、续苓健骨方组、优化 1组、优化 2 组、优化 3 组、优化 4 组、优化 5 组、优化 6 组、优化 7 组和优化 8 组,每组 10 只,采用OVX制备大鼠快速骨丢失模型,连续灌胃 12 周后取材备检.双能X线骨密度仪检测胫骨近端骨密度,micro-CT检测胫骨微观结构,ELISA检测血清骨吸收金指标CTX和骨形成金指标PINP的含量,Real-time PCR和Western blot检测股骨OPG、RANKL mRNA和蛋白的表达水平.结果 续苓健骨方组、优化 4 组、6 组和 7 组骨密度均显著升高(P<0.05),优化 4 和 7 组 Tb.N 和 BV/TV 显著升高(P<0.001),续苓健骨方组和优化1~8 组血清CTX、PINP均不同程度降低,续苓健骨方组和优化7 组OPG mRNA和蛋白表达水平显著升高、RANKL mRNA和蛋白表达水平显著降低.结论 优化 4 组、6 组和 7 组是治疗效果较好的组别,可通过调控OPG/RANKL发挥抗骨质疏松作用,续断、骨碎补、女贞子、红花和川芎是续苓健骨方取效的主要有效药物.
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编辑人员丨1个月前
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续苓健骨方对骨质疏松症模型大鼠细胞核因子κB受体活化因子配体及骨保护素基因表达的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的 研究续苓健骨方对骨质疏松症模型大鼠骨密度的影响及作用机制.方法 将50只SD雌性大鼠按随机数字表法分为假手术组,模型组,续苓健骨方低、中、高剂量组,每组10只.除假手术组外,其余各组大鼠行双侧卵巢切除术制备骨质疏松模型.造模后30 d开始灌胃给药,续苓健骨方低、中、高剂量组分别灌胃续苓健骨方药液7.5、15、30 g/kg;假手术组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d.给药12周后取材.采用双能X射线检测左胫骨骨密度;ELISA法检测大鼠血清雌激素酮、骨钙素水平;荧光定量PCR法检测大鼠腰椎骨保护素(osteoprotegerin,OPG)及细胞核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor κB ligand,RANKL) mRNA表达水平.结果 与模型组比较,续苓健骨方中、高剂量组骨密度[(0.215±0.010) g/cm2、(0.222±0.013) g/cm2比(0.196±0.016) g/cm2]增高(P<0.05或P<0.01);续苓健骨方高剂量组骨钙素[(87.0±8.9) ng/L比(100.5±16.8) ng/L]降低(P<0.05),OPGmRNA[(0.97±0.23)比(0.78±0.17)]表达升高(P<0.05);续苓健骨方低、中、高剂量组RNAKL mRNA[(1.12±0.17)、(0.97±0.38)、(1.04±0.29)比(1.31±0.18)]表达降低(P<0.05).结论 续苓健骨方可提高骨质疏松模型大鼠的骨密度,可能与上调OPG mRNA、降低RANKL mRNA表达有关.
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编辑人员丨2023/8/6
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续苓健骨方对去卵巢骨质疏松模型大鼠血液钙磷代谢的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的 研究续苓健骨方对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨密度、骨微结构和血液钙磷代谢的影响.方法 将40只6月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、续苓健骨方组[12.71 g/(kg·d)]和碳酸钙组[104.19 mg/(kg·d)],假手术组仅切除卵巢周围脂肪,其余组行双侧卵巢切除术后建立骨质疏松模型.药物干预12周后取材,通过双能X线骨密度仪检测左侧胫骨骨密度,经Masson染色观察右侧胫骨组织显微结构,生化检测血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、血钙和血磷水平.结果 与假手术组相比,模型组骨密度显著降低,骨小梁断裂稀疏、排列不规则,TRAP表达增加,血钙含量降低,血磷含量升高.与模型组相比,续苓健骨方组骨密度增加,骨小梁数量增加、排列较规则,TRAP表达降低,血钙含量升高,血磷含量降低.结论 续苓健骨方可提高去卵巢骨质疏松大鼠胫骨骨密度并改善骨组织微结构,其机制可能与调控血钙磷代谢稳态有关.
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编辑人员丨2023/8/6
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续苓健骨汤含药血清对MC3T3-E1细胞分化及增殖的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨续苓健骨汤含药血清对MC3T3-E1成骨细胞分化及增殖的影响.方法 制备续苓健骨汤含药血清,实验分为空白对照组、含药血清低剂量组、中剂量组和高剂量组.采用CCK-8法和流式细胞术检测续苓健骨汤含药血清对MC3T3-E1细胞增殖和细胞周期的影响;碱性磷酸酶(ALP)活性测定MC3T3-E1细胞的成骨分化能力;茜素红染色检测MC3T3-E1细胞的矿化能力;实时荧光定量PCR检测成骨分化基因Runx2、OC、Bmp2、Col1a1mRNA水平.结果 与空白对照组比较,中、高剂量续苓健骨汤含药血清能促进MC3T3-E1细胞增殖、S期细胞比率和细胞增殖指数,并且呈现一定的剂量依赖性;同时中高剂量续苓健骨汤含药血清组能明显提高MC3T3-E1细胞ALP活性(P<0.01)和钙化能力(P<0.01),促进Runx2、OC、Bmp2、Col1a1 mRNA的表达(P<0.05).结论 续苓健骨汤含药血清能促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖,并通过上调骨形成相关基因Runx2、OC、BMP2、Col1a1的表达水平,提高MC3T3-E1细胞的成骨能力.
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编辑人员丨2023/8/6
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续苓健骨方对骨质疏松模型大鼠miRNA表达谱的作用研究
编辑人员丨2023/8/5
目的 通过分析骨质疏松症大鼠模型miRNA表达谱变化,探讨续苓健骨方治疗骨质疏松症的分子机制.方法 建立去卵巢法骨质疏松模型大鼠12只,分为模型组6只、续苓健骨方组6只.假手术组6只为对照.造模1个月后,续苓健骨方灌胃12周,检测大鼠胫骨骨密度,检测腰椎miRNA表达谱,对差异表达的miRNAs进行生物信息学分析.结果 与假手术组比较,模型组腰椎miRNAs 58条显著下调、97条显著上调;与模型组比较,续苓健骨方组腰椎miRNAs下调的50条显著上调、上调的60条显著下调;与假手术组比较,续苓健骨方组腰椎miRNAs仅8条有差异.生物信息学分析发现,差异miRNAs靶基因主要参与HIF-1、甲状腺激素、Hedgehog、GnRH、自噬、cAMP及MAPK等信号通路.结论 建立了续苓健骨方治疗骨质疏松模型大鼠的miRNA表达谱;差异miRNAs可能通过调控HIF-1、甲状腺激素、Hedgehog、GnRH、自噬、cAMP及MAPK等信号通路参与续苓健骨方对骨质疏松大鼠的治疗过程.
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编辑人员丨2023/8/5
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续苓健骨颗粒治疗肾虚血瘀型绝经后骨质疏松症的疗效及转录机制研究
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨续苓健骨颗粒治疗肾虚血瘀型绝经后骨质疏松症的临床疗效及转录组机制.方法 选取肾虚血瘀型绝经后骨质疏松症患者,随机分为续苓健骨颗粒试验组及骨化三醇对照组.观察两组中医证候积分、骨密度及安全性指标.取6例试验组患者治疗前、后的外周血进行转录组测序,另选6例健康组作为对照,筛选差异表达基因并行KEGG分析.结果 完成病例:试验组27例,对照组27例.试验组中医证候疗效总有效率为96.30%,显著优于对照组的77.78%(P<0.05).治疗后两组中医证候积分、腰脊刺痛、下肢痿软等临床症状评分较治疗前均下降(P<0.05),但组间比较差异无统计学意义(P>0.05).两组治疗前后骨密度比较差异无统计学意义(P>0.05),但均保持稳定或呈现上升趋势.两组均未出现严重不良反应.转录组测序:试验组治疗前、后有319个差异基因;试验组治疗前与健康组有598个差异基因,其中19个差异基因(包括FOSB、H4C2、RAMP3等)在治疗后其表达显著改变.KEGG分析结果表明,FOSB参与破骨细胞分化、IL-17信号通路.结论 续苓健骨颗粒治疗绝经后骨质疏松症,能够显著改善临床症状,中医证候疗效优于骨化三醇,其作用机制可能与FOSB、RAMP3、H4C2基因及FOSB参与的破骨细胞分化、IL-17信号通路相关.
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编辑人员丨2023/8/5
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续苓健骨方联合阿仑膦酸钠调控EphB4/EphrinB2双向通路对去卵巢骨质疏松大鼠的研究
编辑人员丨2023/8/5
目的 观察续苓健骨方联合阿仑膦酸钠对去卵巢快速骨丢失模型大鼠骨密度、结构、骨代谢和EphB4/EphrinB2信号通路的影响,探讨其作用机制.方法 50只雌性SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、续苓健骨方组、阿仑膦酸钠组和联合用药组,行双侧卵巢切除术制备模型;药物分别干预12周后取材,DXA检测股骨骨密度,HE染色观察胫骨组织显微结构,ELISA检测血清Ⅰ型胶原交联C末端肽(S-CTX)和Ⅰ型原胶原N端前肽(PINP)水平,Real-time PCR和Western blot检测腰椎EphB4、EphrinB2 mRNA和蛋白的表达水平.结果 与假手术组相比,模型组骨密度显著降低(P<0.001),骨小梁稀疏并且排列紊乱,S-CTX和PINP含量均增高(P<0.01),骨组织EphB4、EphrinB2 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.001).与模型组相比,3个药物组骨密度均增高,其中以联合用药组最佳(P<0.001),骨小梁较密并且排列规则,S-CTX含量不同程度降低,PINP含量不同程度增高,EphB4、EphrinB2 mRNA和蛋白表达水平均增高.结论 续苓健骨方联合阿仑膦酸钠起协同作用,可能通过激活EphB4/EphrinB2信号通路改善骨组织显微结构和血清骨代谢指标,从而提高大鼠骨密度起抗骨质疏松作用.
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编辑人员丨2023/8/5
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基因表达谱芯片分析续苓健骨方治疗去卵巢大鼠骨质疏松症的基因表达差异
编辑人员丨2023/8/5
目的 基因表达谱芯片筛选续苓健骨方治疗骨质疏松症模型大鼠的差异表达基因.方法 将15只大鼠按随机数法分为3组:假手术组、模型组、续苓健骨方组,每组5只.去卵巢造模后1周开始灌胃给药,实验组按照体重给予续苓健骨方,另外两组灌胃与实验组等体积的生理盐水,给药连续13周,每日1次.13周后取大鼠左腿股骨进行基因表达谱芯片检测,分析芯片得到组间差异表达基因并进行功能和通路分析.结果 以丨log2 Fold change丨≥1,q<0.05为条件筛选出10个造模后表达显著降低但用药后显著提高的基因,218个造模后表达显著提高但用药后表达显著降低的基因.KEGG信号通路富集分析发现PI3K/Akt通路是关键作用通路之一.设置条件(丨log2 Fold change丨≥2,q<0.01)进一步筛选获得差异基因Rplp0和Cnpy2.结论 续苓健骨方的治疗作用机制可能与PI3K/AKT信号通路及Rplp0、Cnpy2基因相关.
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编辑人员丨2023/8/5
