目的:建立海藻羊栖菜中19种有机氯农药残留分析的气相-质谱联用方法.方法:使用GC-MS法同时检测19种农药残留,色谱系统采用HP-5MS毛细管色谱柱(30 m×0.25 mm,0.25μm);柱温为程序升温,初始温度70℃,保持1 min,以15℃·min-1升温至180℃,再4℃·min-1升温至280℃,保持7 min;进样口温度240℃;采用质谱检测器,电子轰击源EI,离子源温度230℃,采用多反应监测模式.结果:采用所建立的方法对海藻羊栖菜进行检测,对照品与供试品中相邻色谱峰分离情况均良好,除六氯苯外,其他有机氯农残加样回收率均在72%~127%之间,RSD也满足要求.未检出羊栖菜样品中含有有机氯农药残留.结论:方法的建立为海藻类样品有机氯农药残留检测提供了参考.

在有性繁殖时期,潮间带海藻羊栖菜(Hizikia fusiformis)的叶状体与生殖托遭受低潮干出脱水的影响.为阐明羊栖菜在有性繁殖时期不同部位对干出脱水的耐受能力,研究了羊栖菜的叶状体和雌、雄生殖托在干出脱水过程中以及随后的沉水恢复状态下叶绿素荧光动力学参数变化.实验结果表明,羊栖菜叶状体及其生殖托的PS Ⅱ有效光化学量子产量[Y(Ⅱ)]分别在0-73％和0-60％的脱水率范围内未发生显著变化,而继续脱水则会显著降低藻体的Y(Ⅱ),表明羊栖菜叶状体和生殖托的Y(Ⅱ)下降的脱水界限值分别为73％和60％,对脱水耐受能力较强.在连续干出脱水过程中,叶状体和生殖托的最大相对电子传递速率(rETRm.)和光强耐受能力(Ik)都显著下降,且在严重脱水状态(失水率为75％)下,羊栖菜叶状体和雌、雄生殖托的Y(Ⅱ)分别比干出初始时降低了12％、31％和37％,且复水后其雌、雄生殖托的Y(Ⅱ)无法恢复,甚至持续降低.同时叶状体和生殖托的rETRmax、1k和光能利用效率(α)都显著下降,说明严重脱水使藻体不同部位的PSⅡ反应中心受到了不可逆的损伤.在持续大幅度脱水过程(失水率高于60％)中及随后的沉水恢复过程中,比较藻体各部位的Y(Ⅱ)值发现,叶状体＞雌生殖托＞雄生殖托,表明严重脱水对雄生殖托的影响最大,对叶状体的影响最小.在有性生殖阶段,为了羊栖菜能有性繁殖成功,应避免藻体,尤其是生殖托经受到严重的干出脱水胁迫.

目的 鉴定中药海藻(羊栖菜Sargassum fusiforme)中的单半乳糖基单酰基甘油酯(monogalactosylmonoacylglycerol,MGMG),分析sn-1型和sn-2型位置异构体的化学特征.方法 利用多种色谱手段分离得到MGMG,采用NMR、HR-ESI-MS等谱学方法鉴定结构,采用HPLC、HPLC-ESI-MS/MS分析位置异构体的互变及其色谱-质谱特征.结果 分离到并鉴定5个MGMG,酰基分别为十八碳四烯酰基、十八碳三烯酰基、二十碳四烯酰基、十八碳二烯酰基和十八碳单烯酰基:sn-1型和sn-2型MGMG单体均不稳定,会相互迅速转变直至sn-1型为主(相对峰面积85:15)的平衡状态.sn-2型在反相色谱柱上的保留时间较sn-1型小,先被洗脱;两者二级质谱碎片离子丰度有较大差异,以[M+Na-Gal]+为基峰(100％),sn-2型的[M+Na-RCOOH]+丰度＞50％,sn-1型的[M+ Na-RCOOH]+丰度＜20％.结论 首次从褐藻门中分离鉴定上述5个MGMG,阐明了sn-1型和sn-2型MGMG之间的互变过程,首次报道这2种位置异构体的色谱-质谱特征,可用于MGMG类化合物酰基取代位置的鉴定.

目的 比较不同剂量(接近临床常用剂量)的海藻和甘草对甲状腺肿大大鼠的治疗作用,并探讨海藻的不同品种对治疗作用机制的影响.方法 大鼠连续灌服丙硫氧嘧啶14天复制甲状腺肿大模型,并将其分为空白组、模型组、阳性对照组、海藻(海蒿子)玉壶汤高剂量组、海藻(海蒿子)玉壶汤中剂量组、海藻(海蒿子)玉壶汤低剂量组、海藻(羊栖菜)玉壶汤高剂量组、海藻(羊栖菜)玉壶汤中剂量组、海藻(羊栖菜)玉壶汤低剂量组,共9组.除空白组外,其余各组大鼠每日灌服丙硫氧嘧啶1次,质量浓度为l mg/(mL·100 g),连续灌服14天.14天后,空白组和模型组每天灌服等量的生理盐水,其余各组灌服相应药物,体积均为1 mL/100 g,连续给药28天,期间为了稳定模型,每隔1天灌服丙硫氧嘧啶1次,剂量与之前一致.给药结束后,计算各组大鼠甲状腺系数,并测定甲状腺激素三碘甲状腺原氨酸(three iodine thyroid 3,5,3'-triiodothyronine,T3)、四碘甲状腺原氨酸(thyroxine,T4)、游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)、游离四碘甲状腺原氨酸(freethyroxine,FT4)、促甲状腺激素(thyroid-stimulating hormone,TSH)、促甲状腺激素释放激素(thyrotropin-releasing hormone,TRH)水平.结果 (1)各给药组T3水平较模型组不同程度升高,其中羊高组略优于海高组,且均分别优于各中、低剂量组(P＜0.05或P＜0.01);(2)各给药组在FT3水平上均体现出向正常转归的趋势,其中海高组优于阳性药组及其他各组(P＜0.05或P＜0.01);(3)与模型组相比,海低组及羊柄菜各组的TSH水平均有显著的下降趋势(P＜0.01),且效果均优于阳性药组,其中羊高组效果最佳.结论 含不同品种海藻的海藻玉壶汤对由甲状腺肿大引起的各种甲状腺激素水平的变化均有一定程度的恢复作用,其中以海藻玉壶汤(海蒿子)高剂量组、海藻玉壶汤(羊栖菜)高剂量组效果为佳.

目的:探讨羊栖菜提取物的体外抗病毒作用.方法:对羊栖菜的提取物进行了常见的第三类病原体病毒呼吸道合胞病毒(RSV)、单纯疱疹病毒1型(HSV-1)、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A16、柯萨奇病毒B2、柯萨奇病毒B3、柯萨奇病毒B5(CVA16、CVB2、CVB3、CVB5)等7种病毒的抗病毒效应研究,显微镜下观察细胞存活率.结果:羊栖菜提取物对上述7种病毒的抑制能力远远优于广谱抗病毒药物利巴韦林,尤以对EV71的抑制效果最为明显,抑毒指数极高.结论:羊栖菜提取物对这7种病毒均具有良好的抑制作用,为进一步研究羊栖菜提取物对第三类病原体病毒的广谱抗病毒作用奠定基础.

目的 研究褐藻羊栖菜Sargassum fusiforme的化学成分.方法 采用大孔吸附树脂柱色谱、硅胶柱色谱、ODS柱色谱和制备HPLC等技术方法进行化学成分分离,运用核磁共振波谱和质谱等数据,并结合文献鉴定化合物的结构.结果 从羊栖菜乙醇提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为对羟基苯甲醛(1)、2,5-二羟基苯甲醛(2)、尿黑酸(3)、尿黑酸乙酯(4)、对羟基苯甲酸(5)、5-乙氧基甲基尿嘧啶(6)、黑麦草内酯(7)、异黑麦草内酯(8)、schiffnerilolide(9)、焦谷氨酸乙酯(10).结论 化合物1～10为首次从羊栖菜中分离得到.

目的:探讨含反药组合的海藻玉壶汤中不同品种海藻与甘草配伍应用对甲状腺肿大模型大鼠肝脏的影响.方法:将大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、海藻玉壶汤(海蒿子)组、海藻玉壶汤(羊栖菜)组,灌服丙硫氧嘧啶复制甲状腺肿大模型,以优甲乐作为阳性对照.检测各组大鼠肝功能及肝脏组织中CYP2E1、CYP3A1、CYP3A2表达的变化.结果:与空白组比较,模型组血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)显著降低(P＜0.01,P＜0.05).与模型组比较,海藻玉壶汤(海蒿子或羊栖菜)组血清ALB、肝脏CYP3A1 mRNA表达、CYP2E1蛋白表达显著升高(P＜0.01).与海藻玉壶汤(海蒿子)组比较,海藻玉壶汤(羊栖菜)组血清GLB、肝脏CYP2E1 mRNA表达显著升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:含反药组合的海藻玉壶汤中不同品种海藻与甘草配伍,对甲状腺肿大模型大鼠的肝脏蛋白合成功能表现出一定恢复作用;通过诱导甲状腺肿大模型大鼠肝脏CYP3A1 mRNA、CYP2E1蛋白的表达,影响细胞色素P450酶系统,进而对肝脏的药物代谢产生影响.

为探讨羊栖菜多糖对果蝇抗氧化作用和寿命的影响, 采用黑腹果蝇为研究对象, 添加羊栖菜多糖低、中、高剂量组 (质量浓度分别为1.0％, 2.0％, 4.0％) 的培养基饲喂, 每3 d更换1次培养基, 35日龄后, 分别测定果蝇组织匀浆中T-AOC、ASAFR、CAT、SOD的活性及MDA含量, 并每日定时观察记录果蝇存活数, 统计平均寿命、最高寿命、半数死亡期, 计算平均寿命延长率和最高寿命延长率.结果表明经过各剂量组的羊栖菜多糖饲喂后, 均可增强黑腹果蝇组织匀浆中T-AOC、ASAFR、CAT、SOD活性, 其中2.0％剂量组效果最佳, 分别提高雌性26.22％, 21.51％, 23.72％, 31.30％, 雄性18.50％, 23.07％, 15.75％, 24.85％ (P<0.05), 降低果蝇体内MDA含量, 雌性12.78％, 雄性20.06％ (P<0.05).不同羊栖菜多糖剂量组均能延长果蝇的生活寿命, 其中4.0％剂量组显著延长雌雄果蝇的最高寿命至50, 48 d (P<0.05), 提高雌雄果蝇的平均寿命达7 d和10 d (P<0.05).羊栖菜多糖抗氧化作用较强, 该结果为羊栖菜多糖应用于保健品和化妆品领域的开发提供了一定的实验基础.

海藻光合荧光特性研究对分析藻类光合作用和固碳能力具有重要的作用.利用水下调制荧光仪(DIVING-PAM)测定了枸杞岛后头湾夏季常见6种大型海藻孔石莼、斯氏刚毛藻、舌状蜈蚣藻、鼠尾藻、多管藻和羊栖菜的量子产量、快速光曲线(RLC)相关参数.结果显示:6种常见海藻孔石莼、斯氏刚毛藻、舌状蜈蚣藻、鼠尾藻、多管藻和羊栖菜最大量子产量(Fv/Fm)分别为0.702、0.704、0.457、0.618、0.421、0.567,各物种的开放PSⅡ反应中心原初光能捕获效率(Fv'/Fm')的大小依次是斯氏刚毛藻＞孔石莼＞鼠尾藻＞羊栖菜＞舌状蜈蚣藻＞多管藻,且孔石莼、斯氏刚毛藻、羊栖菜的Fv'/Fm'与其他5种大型海藻的差异均达到显著水平;在快速光响应曲线中,羊栖菜、鼠尾藻和孔石莼的最大相对电子传递速率与初始斜率α较高,证明其具有较强的光合能力和捕光能力;舌状蜈蚣藻较高的RLC初始斜率α和较低的Ik表明其有较强的耐弱光能力.3种门类大型海藻之间光合特性有较为显著的差异,其中褐藻门的羊栖菜、鼠尾藻与绿藻门的孔石莼拥有极高的光合活性和抗强光能力,研究结果可为藻场保护工作和大型海藻固碳能力评估提供理论依据.

目的:观察羊栖菜多糖(Sargassum fusiforme polysaccharides,SFPS)对体外培养的人肺癌细胞株SPC-A-1及裸鼠移植瘤组织中上皮钙粘蛋白(Epithelial cadherin,Ecadherin)、基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinase,MMP)2、9表达的影响.方法:应用实时细胞分析技术检测SPC-A-1细胞增殖活性,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养液中Ecadherin、MMP2和MMP9含量;建立裸鼠移植瘤模型,随机分组,采用免疫组化法检测肿瘤组织中Ecadherin、MMP2和MMP9表达.结果:与对照组相比,30、100和300mg/L浓度SFPS作用24h即可抑制SPC-A-1细胞增殖,作用36小时抑制效果最为明显(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001);SFPS作用36h后,100mg/L、300mg/L浓度组的细胞培养液中Ecadherin含量明显增加(P＜0.05,P＜0.001),而MMP2和MMP9含量在各浓度组(30、100和300mg/L)均降低(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001);20、40mg/kg剂量SFPS处理组的裸鼠移植瘤组织中Ecadherin表达显著增加(P＜0.001),而MMP2和MMP9表达明显低于对照组(P＜0.001).结论:SFPS可以抑制SPC-A-1肺癌细胞生长,此作用可能与下调MMP2、MMP9表达水平、上调Ecadherin表达水平有关,提示SFPS具有潜在的抗肿瘤转移作用.