中国圆田螺(Cipangopaludina chinensis)属于淡水大型螺类,适应性强,分布广泛,在极端环境下能够迅速进入休眠状态,以抵御不良环境对自身造成的影响.为研究其在干旱胁迫下的休眠特征,应用高通量测序技术对中国圆田螺在干旱胁迫下肝与肾组织进行转录组测序及分析.结果显示,中国圆田螺在干旱休眠时与正常有水养殖相比,其肾组织中110个基因上调,389个基因下调;在肝组织中有84个基因上调,86个基因下调.肝组织差异基因主要与细胞黏附的调节、细胞外基质组织生长、神经元投射和轴突再生等功能相关;肾组织差异基因与碳水化合物代谢过程、去磷酸化、上皮细胞增殖调节、羟酸有机酸跨膜转移、组织重塑等功能相关;KEGG富集分析发现,差异基因主要定位在PI3K-Akt信号通路、蛋白聚糖、乳糖、鞘脂的合成代谢通路等与干旱胁迫相关的主要代谢通路上.研究表明,热激蛋白基因 Hsp70、SRCR、FASN、APMAP、MSTN、Poclb、S1P、Na+-K+-ATP 酶 β1 亚基及 SLC28A3基因在中国圆田螺干旱休眠时开启自身调节,田螺通过调控不同基因,启动阻隔自身对外界光线的感知,停止脂肪积累、抑制肌肉生长、吞噬自身凋亡细胞获取营养、调节细胞渗透压保水等使自身快速适应干旱休眠状态.

目的 报道4例鸟苷二磷酸甘露糖焦磷酸化酶β亚基(GMPPB)基因突变所致继发性肌营养不良蛋白聚糖病的病例,并结合文献对本病的临床表现、肌肉影像、分子病理及遗传学特点进行分析.方法 收集2009—2017年在我院门诊就诊的继发性肌营养不良蛋白聚糖病2个家系共4例患者的详细病史、体格检查、肌电图和其他辅助检查结果,分析家系1和家系2的2例先证者的肌肉影像、肌肉活体组织检查病理特点,并对该2例患者行靶向二代基因测序.结果 4例患者来自2个家系(其中3例来自同一家系),男性2例,女性2例,发病年龄为17～18岁.临床上符合肢带型肌营养不良(LGMD)和先天性肌无力综合征(CMS)重叠表型,表现为四肢近端肌无力,且具有日间波动性,晨轻暮重.患者早期跑跳不如同龄人,体育成绩差.体检双下肢近端肌力Ⅰ～Ⅱ级,双上肢近端肌力Ⅲ～Ⅳ级,四肢远端肌力Ⅴ级.脊旁肌和四肢近端肌萎缩,腓肠肌肥大.实验室检查:肌酸激酶明显升高(1877～5275 U/L),针极肌电图呈肌源性损害,重频刺激试验示低频递减.肌肉MRI表现为大腿后群肌(腘绳肌)显著脂肪变性;肌肉病理呈肌营养不良改变.靶向二代基因测序均显示GMPPB基因复合杂合突变,家系1突变位点为c.860G>T(p.R287L)/c.851T>C(p.V284L);家系2突变位点为c.1097A>G(p.N366S)/c.589G>T(p.V197F).上述4个突变位点均为新发突变,经家系验证提示2个突变分别来自患者父母.免疫组织化学及蛋白质电泳分析证实2例先证者肌肉组织α-肌营养不良蛋白聚糖的表达水平均较正常对照明显下降.4例患者经溴吡斯的明治疗后肌无力症状均有不同程度的改善.结论 GMPPB基因突变可致肌肉和神经肌肉接头同时受累,临床表现为LGMD与CMS重叠.胆碱酯酶抑制剂能部分改善此类患者肌无力症状.

多发性硬化(MS)是中枢神经系统炎性脱髓鞘性疾病.实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)为MS的动物模型,在临床表现、神经电生理和组织病理上与MS极其相似.肌营养不良蛋白聚糖(DG)是一种非整合素家族的黏附分子,包括2个亚基:α-DG和β-DG;基质金属蛋白酶(MMP)是一种锌离子依赖的肽链内切酶.在MS/EAE中,DG的表达变化与病灶中增高的MMPs,尤其MMP-2和MMP-9有关,DG被MMP-2和MMP-9裂解参与病灶髓鞘的脱失、血脑屏障通透性增加等病理过程,文中对MS/EAE中MMP-2和MM-9对DG的作用相关研究进行综述.

目的 研究β-肌营养不良蛋白聚糖(β-DG)在HT29、HCT116、SW480、SW620等4种常见的结肠癌细胞系中的表达情况,及其过表达后对SW620结肠癌细胞凋亡及相关蛋白表达变化的影响.方法 培养结肠癌细胞系,提取总蛋白进行免疫印迹,检测各细胞中内源性β-DG蛋白的表达情况;构建pcDGFP-β-DG真核表达质粒,瞬时转染至SW620细胞中,提取总蛋白进行免疫印迹或直接进行免疫荧光制片,检测β-DG的过表达和细胞定位情况;过表达β-DG后,利用流式细胞术检测SW620细胞凋亡的变化情况,并进一步检测细胞凋亡标志蛋白聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)的表达变化情况.结果 与人胚肾上皮细胞(HEK293T)相比,结肠癌细胞系中内源性β-DG(43 ku)的表达量均有所降低,以SW620细胞下降更为明显,且都检测到了不同表达程度的β-DG水解片段(31 ku).成功构建pcDGFP-β-DG真核表达质粒,在SW620细胞中能够有效表达,且主要定位在细胞质中靠近核膜的位置.过表达β-DG后,SW620细胞的凋亡率为0.167±0.014,高于空白组(0.075±0.027)和对照组(0.084±0.023),差异有统计学意义(P＜0.05),且过表达β-DG后,完整型PARP(113 ku)的蛋白含量有所降低,而裂解型PARP(89 ku)的蛋白含量有所增高.结论 β-DG在结肠癌细胞系中异常表达,主要表现在其异常的水解断裂.过表达β-DG能够促进SW620细胞凋亡及相关凋亡蛋白的表达,为进一步了解β-DG功能,及其与结肠癌之间的关系提供了细胞学基础.

临床资料患者男,53岁,因"咳嗽、咯血、发热1个月余"于2017年10月18日收入复旦大学附属中山医院呼吸科.患者于2017年9月初受凉后出现阵发性咳嗽、咳痰,初为黄黏痰,ld后为棕红色血痰,伴发热,体温最高达39℃.就诊于当地医院,查血红蛋白(Hb) 114 g/L,白细胞计数(WBC) 10.05×109/L,中性粒细胞百分比88.6％;C反应蛋白(CRP) 218.3 mg/L,降钙素原(PCT)0.12 ng/mL;白蛋白(ALB) 33 g/L,钠(Na+)138 mmol/L,钾(K+) 3.41 mmol/L,尿素氮(BUN)6.7 mmol/L,肌酐(Cr) 51.7 μmol/L,多次痰涂片找抗酸杆菌(-),结核杆菌(TB) DNA(-),半乳甘露聚糖抗原试验(GM试验)、β-D-葡聚糖试验(G试验)结果均为阴性.

目的 探讨肌营养不良蛋白聚糖(DG)在乳腺癌原发灶与转移淋巴结中的表达及临床意义.方法 选择2014年1月-2019年1月该院收治的130例经手术证实的合并淋巴结转移且病理资料完整的乳腺癌患者为研究对象,应用免疫组化染色方法分别检测淋巴结转移灶、乳腺癌原发灶和癌旁正常乳腺组织的石蜡标本的DG亚基(α-DG)表达情况,对其关于病理及临床特征间的关系情况进行分析.结果 α-DG在正常腺体、乳腺癌原发灶及转移淋巴结的阳性表达率分别为96.2％、70.8％、21.5％,相比正常腺体,α-DG的阳性表达率在原发灶中明显较低,但比淋巴结转移灶高,差异有统计学意义(P＜0.05);α-DG于Lumina B型、Lumina A型、Her-Ⅱ阳性型、三阴性型间阳性表达率相比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05),在不同淋巴结分期当中,α-DG的阳性表达率相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 检测DG在乳腺癌组织中的表达水平有助于了解其生物学行为,在乳腺癌的发生及发展中DG具有重要作用.

目的 检测Duchenne型肌营养不良(DMD)患儿抗肌萎缩蛋白-糖蛋白复合物(DGC)的表达水平,并分析其临床意义.方法 收集2015年1月—2019年8月西安市儿童医院56例DMD患儿的临床资料并进行回顾性分析,记为DMD组;另回顾性分析同期该院52例经病理检查证实未患DMD小儿的临床资料,记为对照组.采用免疫荧光染色法检测腓肠肌组织中DGC的表达水平,DGC包括肌营养不良蛋白聚糖(α-DG、β-DG)、肌聚糖蛋白(α-SG、β-SG、γ-SG、δ-SG)、互生蛋白(Syntrophin).比较两组DGC表达水平的差异;比较DMD组不同病情分级患儿DGC表达水平及缺乏程度的差异;分析DMD组抗肌萎缩蛋白(Dystrophin)与DGC表达的相关性.结果 DMD组和对照组Dystrophin、DGC表达的积分光密度(IOD)比较,差异有统计学意义(P<0.05),DMD组低于对照组.DMD组不同病情分级患儿Dystrophin、DGC表达的IOD值、缺乏程度分级比较,差异有统计学意义(P<0.05),且每两个亚组比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中病情分级<3级患儿Dystrophin、DGC表达的IOD值、缺乏程度分级均高于3～5级、>5级患儿(P<0.05),3～5级患儿Dystrophin、DGC表达的IOD值、缺乏程度分级均高于>5级患儿(P<0.05).免疫荧光染色结果显示,DGC阳性表达肌细胞膜上,可见薄且连续的、完整的环形荧光.DMD患儿Dystrophin染色与α-DG、β-DG、α-SG、β-SG、γ-SG、δ-SG及Syntrophin蛋白表达呈正相关(r=0.712、0.756、0.782、0.714、0.796、0.743和0.785,均P<0.05).结论 DMD患儿DGC表达水平偏低,且均与Dystrophin染色有关,病情越严重,DGC表达水平越低.