目的:评价不同剂量乌司他丁对全弓置换术患者肺功能的影响。方法:拟行全弓置换术的急性斯坦福A型主动脉夹层患者135例，年龄20~70岁，ASA分级Ⅳ级，BMI 16.2~33.3 kg/m 2，性别不限，采用随机数字表法分为3组( n＝45)：高剂量组(H组，总量30 000 U/kg)、低剂量组(L组，总量20 000 U/kg)和对照组(C组)。H组和L组于麻醉诱导后给予1/2总量，余1/2预充至体外循环管路；同一时间C组给予生理盐水100 ml。分别于麻醉诱导后(T 0)、体外循环开始3 h(T 1)、6 h(T 2)、12 h(T 3)、24 h(T 4)和48 h(T 5)时取中心静脉血样，测定血浆TNF-α和IL-6浓度；T 0、T 2~T 5时记录氧合指数(OI)和肺泡-动脉血氧分压差(P A-aO 2)；记录患者术中失血量和输血量；记录术后机械通气时间、ICU停留时间、30 d内并发症发生情况。 结果:与C组比较，H组和L组T 1~T 5时患者血浆TNF-α和IL-6浓度降低，T 2，3时OI升高，P A-aO 2降低( P<0.05)。3组患者术后机械通气时间、ICU停留时间、30 d内并发症发生率比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:乌司他丁可抑制全弓置换术患者的炎症反应，改善肺功能，但无临床转归价值。

慢性胰腺炎是一种胰腺进行性炎性改变综合征，可导致胰腺结构永久性损害，从而引起外分泌和内分泌功能不全。其两大临床表现为腹痛和胰腺功能不全，虽然此病有别于急性胰腺炎(胰腺损伤后的一种急性炎症反应，通常为非进行性)，但两者可能重叠，急性胰腺炎反复发作可能逐渐形成慢性胰腺炎。近年来发现基因突变与慢性胰腺炎有关。此类基因包括：导致囊性纤维化的CFTR基因、编码胰蛋白酶抑制剂的丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型基因（Sefine protease inhibitor Kazal type1, SPINK-1基因），以及与遗传性胰腺炎有关的PRSS-1基因。2021年1月26日北京协和医院收治了一位SPINK1基因阳性的患者，现将诊治经过报道如下。

淋巴管平滑肌瘤病是一种引起肺囊性改变和呼吸衰竭的多系统疾病。结节性硬化病（TSC）1/2基因功能缺失导致哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）活性失调，异常平滑肌细胞（即LAM细胞）过度增殖。LAM细胞与成纤维细胞、淋巴内皮细胞、多种炎性细胞相互作用，在肺部形成类似于“癌巢”的LAM结节。此外，LAM结节中亦发现存在肥大细胞聚集，但其功能和机制尚不明确。肥大细胞是一种在组织中驻留的颗粒状造血细胞，在过敏、哮喘、纤维化和关节炎的病理过程中发挥了关键作用。类胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶，其为肥大细胞分泌最多的物质之一，在肺部疾病中可作为成纤维细胞有丝分裂原。该研究分析了LAM细胞与LAM相关成纤维细胞（LAM-associated fibroblasts，LAF）的交互作用，通过3D球状体共培养评估LAM细胞与肥大细胞迁移之间的关系，并构建了LAM小鼠同种异体移植瘤模型探究肥大细胞及其分泌的类胰蛋白酶对LAM的影响。结果发现，LAM细胞/LAF共培养诱导LAF分泌多种CXC趋化因子，LAM肺中表达CXC趋化因子受体（CXCRs）的类胰蛋白酶阳性肥大细胞显著增加（ P<0.05）。LAM球状体吸引肥大细胞，这一过程被CXCR1和CXCR2的药理学和CRISPR/cas9抑制所抑制。LAM球状体引起肥大细胞类胰蛋白酶释放，诱导成纤维细胞增殖，LAM球体大小增加（ P=0.002）；类胰蛋白酶抑制剂APC366和色苷酸钠（SCG）抑制肥大细胞诱导的球状体生长。在体内，SCG降低了肥大细胞活化和LAM小鼠肺肿瘤负荷（ P=0.004）。

目的:评价乌司他丁对幼鼠高氧急性肺损伤的影响及其与Wnt/β-连环素(β-catenin)信号通路的关系。方法:清洁级健康雄性SD大鼠36只，14日龄，体重40～50 g，采用随机数字表法分为3组( n＝12)：对照组(C组)、高氧致急性肺损伤组(ALI组)和乌司他丁组(UTI组)。ALI组和UTI组采用吸入高浓度氧(氧浓度>90%)72 h的方法制备幼鼠高氧急性肺损伤模型，C组正常呼吸空气。模型制备成功后1 d时开始，UTI组每天同一时点腹腔注射乌司他丁50 000 U/kg，连续注射3 d；C组和ALI组于相同时点腹腔注射等容量生理盐水。于模型制备成功后4 d时处死大鼠取肺组织，确定湿重/干重(W/D)比值，光镜下观察病理学结果并行肺损伤评分，电镜下观察细胞超微结构，采用ELISA法检测IL-6、IL-1β和TNF-α含量，采用Western blot法检测磷酸化糖原合成激酶3β(p-GSK-3β)、Wnt3a和β-catenin的表达。 结果:与C组比较，ALI组和UTI组肺组织W/D比值和肺损伤评分升高，肺组织IL-6、IL-1β和TNF-α含量、p-GSK-3β、Wnt3a和β-catenin表达水平升高( P<0.05)；与ALI组比较，UTI组肺组织W/D比值和肺损伤评分降低，肺组织IL-6、IL-1β和TNF-α含量、p-GSK-3β、Wnt3a和β-catenin表达水平降低( P<0.05)。UTI组肺组织细胞超微结构损伤较ALI组减轻。 结论:乌司他丁减轻高氧致幼鼠急性肺损伤的机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路激活，降低炎症反应有关。

目的:评价乌司他丁对非体外循环冠状动脉旁路移植术(OPCABG)患者术后肺部并发症(PPCs)的影响。方法:回顾性收集2021年9月至2023年8月择期行OPCABG患者的病历资料。根据患者术中是否使用乌司他丁分为乌司他丁组与对照组。通过倾向性评分匹配及扩展的Cox比例风险回归模型调整混杂因素。主要结局指标为术后30 d内PPCs发生情况，次要结局指标为ICU停留时间、住院时间及其他不良事件发生情况。结果:最终纳入1 532例患者，585例(38.2%)患者发生PPCs。与对照组比较，乌司他丁组PPCs发生率降低(匹配前：42.7% vs. 35.2%， P＝0.004；匹配后：42.2% vs. 35.6%， P＝0.033)，急性肾损伤发生率降低，ICU停留时间、住院时间和其他不良事件发生率差异无统计学意义( P>0.05)。在混杂因素调整前及调整后的Cox比例风险回归模型中，使用乌司他丁后PPCs发生风险降低(调整前 HR＝0.81，95% CI 0.67～0.99， P＝0.004；调整后 HR＝0.79，95% CI 0.65～0.96， P＝0.022)。年龄大于65岁、PPCs高风险患者使用乌司他丁后PPCs发生风险降低( HR＝0.667，95% CI 0.542～0.821， P<0.001； HR＝0.641，95% CI 0.516～0.812， P<0.001)。 结论:OPCABG患者术中使用乌司他丁有助于降低PPCs的发生风险。

目的:探讨乌司他丁减轻体外循环(CPB)下心脏手术患儿围术期心肌损伤的机制与外周血单个核细胞(PBMCs)铁死亡的关系。方法:择期行CPB下室间隔缺损修补术患儿60例，性别不限，年龄4~8岁，ASA分级Ⅱ或Ⅲ级，采用随机数字表法分为2组( n＝30)：对照组(C组)和乌司他丁组(UTI组)。采用静吸复合麻醉。UTI组将乌司他丁20 000 U/kg用生理盐水稀释至100 ml，于切皮前20 min时经15 min中心静脉输注50 ml，于CPB 10 min时经15 min CPB管路滴注50 ml；C组以等容量生理盐水替代。于麻醉诱导后切皮前(T 1)、CPB开始后30 min (T 2)、CPB停止即刻(T 3)及CPB停止后24 h (T 4)时采集颈内静脉血样，采用ELISA法测定血浆氨基末端β型脑钠肽前体(NT-proBNP)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)的水平。采用改良的Ficoll密度梯度离心法提取PBMCs，采用比色法测定PBMCs Fe 2+、MDA浓度和SOD活性，Western blot法检测PBMCs长链脂酰辅酶A合成酶4 (ACSL4)及谷胱甘肽过氧化物酶4 (GPX4)表达水平。 结果:与T 1时比较，2组T 2~4时血浆NT-proBNP、cTnI和CK-MB水平升高，PBMCs Fe 2+、MDA浓度和PBMCs ACSL4表达水平升高，SOD活性和GPX4表达水平降低( P<0.05)。与C组比较，UTI组T 2~4时血浆NT-proBNP、cTnI和CK-MB水平降低，PBMCs Fe 2+、MDA浓度和ACSL4表达水平降低，SOD活性和GPX4表达水平升高( P<0.05)。 结论:乌司他丁减轻CPB下心脏手术患儿围术期心肌损伤的机制可能与抑制PBMCs铁死亡有关。

目的:建立高效的人肠三叶因子（ITF）重组表达及纯化策略，观察重组人ITF（rhITF）对烧伤小鼠肠黏膜损伤与修复的作用并探讨其机制。方法:采用实验研究方法。采用新型酵母表达载体pGAPZαA和酵母菌X33重组表达ITF，并通过金属螯合亲和层析与阴、阳离子交换层析法纯化蛋白，行非还原十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）及蛋白质印迹法鉴定rhITF。rhITF与胃蛋白酶溶液、胰蛋白酶溶液按体积比1∶1混合，分别作用0.5、1.0、1.5、2.0 h和1.0、2.0、4.0 h后行非还原SDS-PAGE，分析rhITF的稳定性。按随机数字表法将105只6~8周龄BALB/c雄性小鼠分为假伤组（30只）、单纯烧伤组（45只）、烧伤+rhITF组（30只）。将单纯烧伤组和烧伤+rhITF组小鼠背部造成30%体表总面积Ⅲ度烧伤，假伤组小鼠模拟致假伤，烧伤+rhITF组小鼠伤后灌胃1 mg/kg rhITF，其余2组小鼠伤后给予等量生理盐水。伤后24 h，取15只单纯烧伤组小鼠，制备烧伤血清，用于细胞实验。伤后3、5、7 d，每组各取10只小鼠处死后取小肠组织，苏木精-伊红染色观察肠黏膜病理变化，分光光度法和酶联免疫吸附测定法测定肠组织二胺氧化酶（DAO）及乳酸脱氢酶（LDH）活性。取3批人结直肠腺癌HT-29细胞，分为阴性对照组、25 μg/mL rhITF组、50 μg/mL rhITF组（样本数为3），正常对照组、烧伤血清组、烧伤血清+rhITF组（样本数为3），CK869抑制剂组、CK666抑制剂组和溶剂对照组（样本数为2），分别进行相应处理，Transwell实验观察培养12 h后细胞移行。另取2批HT-29细胞，每批细胞均分为正常对照组、烧伤血清组和烧伤血清+rhITF组（样本数均为6），培养24 h后，蛋白质印迹法检测细胞腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、磷酸化AMPK（p-AMPK）、Ras相关C3肉毒杆菌毒素底物1（Rac1）及肌动蛋白相关蛋白2/3（Arp2/3）复合亚基1B（ARPC1B）蛋白表达，活化磁珠下拉实验检测细胞Rac1活性。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、SNK检验。结果:每升发酵液获得rhITF 82.35 mg，蛋白纯度高达98%，且具有良好的抗原特异性。rhITF在胃蛋白酶和胰蛋白酶溶液中较稳定，与胰蛋白酶溶液作用2.0 h后仍有45%残余，与胃蛋白酶溶液作用4.0 h后仍有90%残余。假伤组小鼠伤后各时间点肠黏膜未见充血、水肿，单纯烧伤组小鼠伤后各时间点肠黏膜主要病理表现为充血、水肿、糜烂及出血。烧伤+rhITF组小鼠伤后3、5 d肠黏膜主要以充血、水肿为主，伤后7 d肠黏膜水肿和充血减轻。与单纯烧伤组比较，假伤组、烧伤+rhITF组小鼠伤后3、5、7 d肠组织DAO和LDH活性显著升高（ P<0.05或 P<0.01）。培养12 h后，25 μg/mL rhITF组细胞移行数为（58±12）个，显著多于阴性对照组的（16±5）个（ P<0.01），显著少于50 μg/mL rhITF组的（123±9）个（ P<0.05）。培养12 h后，烧伤血清组细胞移行数为（60±13）个，显著少于正常对照组的（143±11）个和烧伤血清+rhITF组的（138±8）个（ P<0.05）。培养12 h后，溶剂对照组细胞移行数为（155±9）个，明显多于CK666抑制剂组的（33±5）个、CK869抑制剂组的（28±5）个（ P<0.01）。培养24 h后，烧伤血清组细胞AMPK、Rac1蛋白表达量与正常对照组、烧伤血清+rhITF组相近（ P>0.05），p-AMPK蛋白表达量明显高于正常对照组、烧伤血清+rhITF组（ P<0.05或 P<0.01），ARPC1B蛋白表达量明显低于正常对照组、烧伤血清+rhITF组（ P<0.05）。培养24 h后，烧伤血清组细胞Rac1活性明显低于正常对照组、烧伤血清+rhITF组（ P<0.05或 P<0.01）。 结论:本研究获得的rhITF具有较高的纯度和超强的稳定性，能耐受极端pH和蛋白酶水解，减轻烧伤小鼠肠黏膜损伤。rhITF能通过抑制AMPK磷酸化维持Rac1-Arp2/3活性，促进肠上皮细胞移行，加速肠黏膜修复。

目的:评价蛋白酪氨酸激酶2/信号传导和转录活化因子3(JAK2/STAT3)信号通路在乌司他丁减轻星形胶质细胞氧糖剥夺损伤中的作用。方法:选择出生24 h内的SD大鼠，提取原代星形胶质细胞进行培养，采用随机数字表法将星形胶质细胞分为4组( n＝14)：对照组(C组)、氧糖剥夺组(OGD组)、乌司他丁组(U组)和AG490+乌司他丁组(A+U组)。采用糖氧剥夺10 h的方法建立氧糖剥夺损伤模型。U组于造模前24 h时加入乌司他丁终浓度1 000 U/ml；A+U组于造模前48 h时加入AG490终浓度20 μmol/L，于造模前24 h时加入乌司他丁终浓度1 000 U/ml。各组处理结束后，采用MTS法检测细胞活力，Western blot法检测磷酸化JAK2(p-JAK2)和磷酸化STAT3(p-STAT3)表达，免疫荧光法检测caspase-3表达。 结果:与C组比较，OGD组和A+U组细胞活力降低，p-JAK2和p-STAT3表达下调，caspase-3表达上调，U组细胞活力降低，p-JAK2、p-STAT3和caspase-3表达上调( P<0.05)。与OGD组比较，U组细胞活力升高，p-JAK2和p-STAT3表达上调，caspase-3表达下调( P<0.05)，A+U组细胞活力降低，p-JAK2表达上调，p-STAT3表达下调，caspase-3表达下调( P<0.05)。与U组比较，A+U组细胞活力降低，p-JAK2和表达下调，caspase-3表达上调( P<0.05)。 结论:JAK2/STAT3信号通路激活参与了乌司他丁减轻星形胶质细胞氧糖剥夺损伤的过程。

基因型与临床表型关联分析是遗传学转化研究的重要部分，为疾病的早期干预、精准预防和治疗提供了依据。慢性胰腺炎(CP)是一种由遗传、环境等多种因素引起的胰腺组织纤维炎症性疾病。目前研究认为CP主要易感基因包括阳离子胰蛋白酶原( PRSS1)、丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型( SPINK1)、胰凝乳蛋白酶C( CTRC)和囊性纤维化跨膜转导调节因子( CFTR)，遗传因素不仅影响CP的发生，也影响CP的临床表现、疾病进展和预后。本文系统阐述了CP主要易感基因突变对CP临床表型的影响，以加强对遗传因素与CP之间关联的认识。

为明确叉角厉蝽Eocanthecona furcellata(Wolff)丝氨酸蛋白酶基因EfSP1及抑制剂基因EfSPI20的基因序列特征和时空转录特征,为其生理功能研究奠定基础.利用PCR克隆技术获得叉角厉蝽唾液腺EfSPI20和EfSP1的完整开放阅读框(Open reading frame,ORF)序列,使用生物信息学软件进行序列分析以及系统进化分析,采用实时荧光定量PCR(Real time quantitativate PCR,RT-qPCR)分析两个基因分别在叉角厉蝽不同发育时期和组织中的表达特征.结果表明,EfSPI20与EfSP1基因完整开放阅读框长度分别为378 bp和921 bp,分别编码125个氨基酸和306个氨基酸,预测均为亲水蛋白质,理论分子量分别为13.48 kDa和33.82 kDa,等电点分别为6.68和5.80,分别有30个和23个氨基酸残基的信号肽序列,EfSPI20有跨膜结构域,EfSP1无跨膜结构域.序列比对显示叉角厉蝽EfSPI20与茶翅蝽Halyomorpha halys PPI同源性最高,氨基酸序列一致性达58％;EfSP1与稻绿蝽Nezara viridula SP同源性最高,氨基酸序列一致性达66％;系统发育树显示叉角厉蝽与同为蝽科的茶翅蝽和稻绿蝽物种亲缘关系近.EfSPI20基因在雌雄成虫和唾液腺中高表达,推测EfSPI20可能具有抑制胰蛋白酶活性的功能和与叉角厉蝽的捕食消化相关;EfSP1基因在卵期、卵巢和肠道中高表达,推测EfSP1可能与叉角厉蝽的生殖功能和蛋白消化相关.