目的:探讨O-6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子甲基化状态对老年胶质母细胞瘤(GBM)治疗及预后的影响。方法:回顾性分析天津市环湖医院2012—2018年收治的65例新诊断的老年GBM患者的临床资料。所有患者均在术后接受了调强放疗，49例患者接受了替莫唑胺单药化疗。依据MGMT启动子甲基化状态分为MGMT(+)组和MGMT(-)组，比较两组生存情况。采用 Kaplan- Meier法生存分析并应用 log- rank法行单因素预后分析， Cox模型多因素预后分析。 结果:全组中位总生存期为18.0个月。MGMT(+)组、MGMT(-)组中位总生存期分别为27个、15.3个月。单因素分析显示肿瘤数目、MGMT基因启动子甲基化、同步放化疗与预后相关( P＝0.029、 P＝0.001、 P<0.001)。多因素分析显示肿瘤数目、同步放化疗是影响老年GBM患者预后因素( P＝0.037、 P＝0.004)。MGMT(+)组中同步放化疗与单纯放疗患者中位总生存期分别为27.0个月和12.0个月( P＝0.040)；MGMT(-)组中同步放化疗与单纯放疗患者中位总生存期分别为17.0个月和10.0个月( P＝0.122)。 结论:MGMT启动子甲基化状态与老年GBM患者的预后密切相关，在常规分割放疗的基础上联合替莫唑胺同步及序贯化疗可能带来进一步生存获益。

目的 研究Roundabout1(Robo1)-CAR-NK92细胞在体外对神经胶质瘤细胞U87-MG及神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的体外杀伤以及探讨白细胞介素-15 (IL-15)、IL-21和地塞米松对Robo1-CAR-NK92细胞增殖、活性和杀伤的影响以优化培养方案.方法 用慢病毒转染的方法构建Robo1-CAR-NK92细胞后分选扩增,并用流式细胞术检测阳性率.用流式细胞术的方法检测U87-MG及SH-SY5Y细胞表面Robo1的表达.用CCK-8试剂盒和动态活细胞成像的方法检测Robo1-CAR-NK92及NK92细胞对靶细胞的体外杀伤.用流式多重微珠阵列法检测杀伤过程中分泌的细胞因子含量.用锥虫蓝染色的方法检测经25 ng/ml的IL-15,25 ng/ml的IL-21和(或)50 nmol/L的地塞米松处理3d后的Robo1-CAR-NK92及NK92细胞的计数及活性率.结果 构建Robo1-CAR-NK92细胞并经分选扩增后检测阳性率为98.89％.流式细胞术检测结果显示,Robo1在U87-MG及SH-SY5Y细胞上表达的阳性率分别为88.14％,99.75％.Robo1-CAR-NK92细胞对靶细胞的杀伤率明显高于NK92的杀伤率(P＜0.05).Robo1-CAR-NK92细胞在杀伤U87-MG细胞过程中分泌的IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ较NK92细胞明显增多(P＜0.05).IL-15能促进Robo1-CAR-NK92的增殖和活性而IL-21则起相反作用.IL-21、IL-15+ IL-21能增强NK92和Robo1-CAR-NK92细胞的杀伤效果.IL联用地塞米松能增强NK92和Robo1-CAR-NK92细胞的增殖和活性,但抑制二者的杀伤效果(除IL-15和地塞米松联用不影响Robo1-CAR-NK92细胞的杀伤效果外).结论 与NK92细胞比,Robo1-CAR-NK92细胞对神经胶质瘤及神经母细胞瘤细胞有更强大的杀伤效果.在本试验时间内,IL-15联用地塞米松处理Robo1-CAR-NK92细胞是最有利于Robo1-CAR-NK92细胞体外增殖的培养方案.

胶质母细胞瘤是成人最常见的脑部恶性肿瘤,预后不良.与其他实体肿瘤相比,胶质母细胞瘤有其特殊的肿瘤免疫学特性,因此靶向免疫检查点细胞程序性死亡蛋白1及其配体(PD1/PDL1)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)在胶质母细胞瘤中的应用尚未明确.对于胶质母细胞瘤这样的免疫“冷肿瘤”而言,放射治疗可以提高其免疫原性,通过从放射治疗影响胶质母细胞瘤微环境、自然杀伤T细胞免疫状态、免疫细胞激活过程这三方面探寻放射治疗支持免疫治疗的证据,以及探讨如何调整放射治疗方案,以达到与免疫治疗配合的最优策略.