目的:探讨花黄色素(SY)调控腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子 1(SIRT1)/核转录因子-κB(NF-κB)对冠心病(CHD)大鼠心肌损伤的影响.方法:将 60只 SD大鼠随机分为正常对照组(NC组,生理盐水)、模型组(Model组,生理盐水)、SY组(100 mg/kg SY)、EX-527组(47 mg/kg EX-527)、SY+EX-527组(100 mg/kg SY+47 mg/kg EX-527),每组 12只,持续 4周给予相应药物.试剂盒检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平和心肌白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;苏木素-伊红(HE)染色法进行心肌组织病理学观察;末端脱氧核苷酸转移酶介导的 dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测心肌组织 AMPK/SIRT1/NF-κB通路相关蛋白表达.结果:与 NC组相比,Model组大鼠心肌细胞数量少且排列杂乱,细胞核皱缩,TC、TG、LDL-C、氧化修饰低密度脂蛋白(ox-LDL)、IL-6、TNF-α水平、心肌细胞凋亡率及NF-κB蛋白水平明显上升(P<0.05),SOD、GSH-Px水平及磷酸化-AMPK(p-AMPK)/AMPK、SIRT1蛋白水平明显下降(P<0.05).与 Model组比较,SY组大鼠心肌细胞数量增多且排列整齐有序,TC、TG、LDL-C、ox-LDL、IL-6、TNF-α水平、心肌细胞凋亡率及 NF-κB 蛋白水平明显下降(P<0.05),SOD、GSH-Px水平及 p-AMPK/AMPK、SIRT1蛋白水平明显上升(P<0.05);而 EX-527 组以上指标呈现相反趋势.与 SY组相比,SY+EX-527组大鼠心肌损伤加重,TC、TG、LDL-C、ox-LDL、IL-6、TNF-α水平、心肌细胞凋亡率及 NF-κB蛋白水平明显上升(P<0.05),SOD、GSH-Px水平及 p-AMPK/AMPK、SIRT1蛋白水平明显下降(P<0.05).结论:SY可能通过调控 AMPK/SIRT1/NF-κB通路降低氧化应激,减轻炎症反应,对冠心病大鼠心肌损伤起到一定改善作用.

成骨细胞失调所导致的骨形成机制障碍是临床上常见的骨代谢相关疾患的病理基础.研究表明,Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)、磷脂酰基醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)、核因子E2 相关因子 2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、沉默信息调节因子 6/核转录因子-κB(SIRT6/NF-κB)等信号通路均具有调节成骨细胞,维持骨稳态的能力.而二甲双胍作为临床一线降糖药物不仅具有降糖能力,而且在调控成骨细胞增殖分化等过程中发挥重要作用.笔者通过总结上述信号通路与二甲双胍干预的研究现状,旨在为成骨细胞相关研究提供新思路,为改善骨形成促进骨稳态提供理论参考与依据.

目的 探讨瑞舒伐他汀对骨质疏松大鼠腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(Sirt1)/核转录因子-κB(NF-κB)通路和骨微结构的影响.方法 将雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、雌二醇(0.05 mg/kg)组、瑞舒伐他汀(1.0、2.0、4.0 mg/kg)组,每组12只.采用双侧卵巢切除术复制大鼠骨质疏松症模型.术后第9周雌二醇组和瑞舒伐他汀各剂量组ip相应药物,1次/d,连续给药12周.假手术组和模型组ip等体积生理盐水.ELISA法检测血清骨代谢标志物成骨特异性转录因子(CBF-α1)、Ⅰ型胶原交联羧基端肽(CTXI)、Ⅰ型前胶原氨基端原肽(PINP)、骨钙素(OC)水平和血清雌二醇(E2)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)水平;Micro-CT扫描大鼠右侧股骨观察大鼠股骨远端骨微结构变化,分析骨小梁骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁间隔(Tb.Sp)、骨小梁厚度(Tb.Th);苏木精–伊红(HE)染色观察骨组织形态学变化;Western blotting法检测骨组织Sirt1、AMPK、p-AMPK、NF-κB p65、NF-κBp65(acetyl K310)蛋白表达.结果 与假手术组相比,模型组大鼠血清E2、骨代谢相关标志物CBF-α1、CTX-Ⅰ、PINP、OC水平、BMD明显降低,炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β水平明显升高,骨小梁微结构参数BV/TV、Tb.N、Tb.Th明显降低,Tb.Sp明显升高(P<0.05),骨小梁出现断裂,排列疏松,骨组织p-AMPK/AMPK、Sirt1蛋白表达明显降低,NF-κB p65(acetyl K310)/NF-κB p65蛋白表达明显升高(P<0.05);与模型组相比,瑞舒伐他汀2.0、4.0 mg/kg组大鼠血清E2、骨代谢相关标志物CBF-α1、CTX-Ⅰ、PINP、OC水平、BMD明显升高(P<0.05),炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β 水平下降,骨小梁微结构参数BV/TV、Tb.N、Tb.Th增加,Tb.Sp明显降低(P<0.05),新生骨小梁,形态相对完整;骨组织p-AMPK/AMPK、Sirt1蛋白表达明显升高,NF-κB p65(acetyl K310)/NF-κB p65蛋白表达明显降低(P<0.05).结论 瑞舒伐他汀可改善骨质疏松大鼠的骨微结构,对骨质疏松具有保护作用,其作用机制可能与激活AMPK和Sirt1蛋白表达,降低NF-κB p65乙酰化水平有关.

目的 基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探讨番茄红素(LYC)减轻过敏性结膜炎小鼠炎症的作用机制.方法 利用卵清蛋白(OVA)致敏建立AC小鼠模型.将BALB/c小鼠分为正常组(NC组)、模型组(AC组)、LYC低组(5 mg/kg)、LYC中组(10 mg/kg)、LYC高组(20 mg/kg),LYC高+AMPK抑制剂(CC)组(0.2 mg/kg).观察小鼠眼周情况,采用苏木精-伊红染色观察结膜组织病理学变化,采用流式细胞仪检测脾脏中Th17、Treg细胞比例,采用酶联免疫吸附试验试剂盒检测血清中炎症因子、免疫球蛋白(Ig)E、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)水平,采用蛋白质印迹法检测结膜组织AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路蛋白水平.结果 与NC组比较,AC组小鼠眼部出现结膜充血、红肿、溢泪等现象,结膜组织嗜酸性粒细胞较多,Th17细胞比例、白细胞介素(IL)-17、IL-6、IgE、TSLP、磷酸化AMPK(p-AMPK)、核NF-κB p65水平升高,Treg细胞比例、IL-10、转化生长因子(TGF)-β、SIRT1水平降低(P<0.05).与AC组比较,LYC中、高组小鼠眼部结膜充血、水肿、溢泪等明显减轻,结膜组织嗜酸性粒细胞较少,脾脏中Th17/Treg细胞比例趋向平衡,IL-17、IL-6、IgE、TSLP、核NF-κB p65水平降低,IL-10、TGF-β、p-AMPK、SIRT1水平升高(P<0.05).CC可抵消LYC对AC小鼠的上述保护作用.结论 LYC可减轻AC小鼠的过敏和炎症反应,维护机体免疫平衡,其机制可能与促进AMPK/SIRT1通路活化,抑制NF-κB通路活化有关.