目的:探讨膜联蛋白A1(AnxAl)拟肽Ac2-26对体外循环(CPB)大鼠肺损伤的影响，分析其抗炎机制。方法:18只雄性SD大鼠，体质量350~450 g。随机数字表法分为3组(各6例)：假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、Ac2-26组(A组)。假手术组行股动静脉穿刺置管，仅开胸暴露左肺，不连接CPB管道；其余2组均建立CPB左肺缺血再灌注损伤模型，IR组在CPB前10 min给予同等容量的生理盐水；A组在CPB前10 min尾静脉注射Ac2-26(1 mg/kg)。3组大鼠于CPB前(T1)、开放左肺门即刻(T2)、实验结束时(T3)分别取动脉血，行血气分析，计算氧合指数(OI)和呼吸指数(RI)。于T1、T3分别取股静脉血测中性粒细胞(PMN)的数量。T3时取肺动脉血测PMN的数量、大鼠血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)含量；取左肺组织，ELISA法测肺组织中髓过氧化物酶(MPO)和PMN弹性蛋白酶(NE)含量，Tunel法测肺组织中性粒细胞凋亡；Western-Blot测肺组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和AnxAl蛋白表达情况。结果:与S组比较，IR组T3时点的股静脉血、肺动脉血PMN数量及肺动脉VCAM-1含量高，肺组织MPO、NE含量增加，肺组织病理损伤评分升高、OI降低、RI升高，差异均有统计学意义( P<0.05)。与IR组比较，A组大鼠肺组织病理损伤评分明显降低，股静脉血、肺动脉血PMN数量及肺动脉血VCAM-1含量明显减少，肺组织AnxA1、ICAM-1表达降低，肺组织MPO、NE含量降低，PMN凋亡率升高，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:膜联蛋白A1拟肽Ac2-26可抑制肺内中性粒细胞聚集，减弱中性粒细胞与肺血管内皮的黏附能力，促进肺内中性粒细胞凋亡，降低NE、MPO含量，对大鼠CPB后肺损伤有保护作用。

目的:探究膜联蛋白A1(ANXA1)拟肽Ac2-26对脓毒症大鼠急性肾损伤(AKI)及中性粒细胞凋亡的影响.方法:实验分组包括对照组、Ac2-26组、AKI组、AKI+Ac2-26组,每组15只大鼠.采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症引发AKI模型后,静脉输注Ac2-26进行治疗,1次/d,持续14 d;结束后,ELISA检测各组大鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、IL-1β、IL-6及TNF-α水平,HE染色和过碘酸雪夫氏(PAS)染色观察各组大鼠肾组织病理学变化,免疫组织化学染色检测各组大鼠肾组织内ANXA1表达情况;从大鼠外周血中分离中性粒细胞,吉姆萨染色和台盼蓝染色检测细胞纯度与活力;Annexin V-FITC/PI双染法和TUNEL染色测定各组大鼠中性粒细胞凋亡水平.结果:与对照组比较,AKI 组大鼠血清中Scr与BUN水平升高(P<0.05),IL-1β、IL-6及TNF-α水平也升高(P<0.05),肾组织内肾小管和肾小球均发生明显损伤,并伴随大量炎症细胞浸润,病理学评分升高(P<0.05),ANXA1阳性染色面积比例减小(P<0.05);经吉姆萨染色和台盼蓝染色鉴定分离到的中性粒细胞形态完整,活性较高;与对照组比较,AKI组大鼠中性粒细胞凋亡率下降(P<0.05),TUNEL阳性率降低(P<0.05).与AKI组比较,AKI+Ac2-26组血清中Scr与BUN水平降低(P<0.05),IL-1β、IL-6及TNF-α水平也均降低(P<0.05),肾组织内肾小管与肾小球的病理表现明显减轻,病理学评分降低(P<0.05),而ANXA1阳性染色面积比例增大(P<0.05),同时,大鼠中性粒细胞凋亡率升高(P<0.05),TUNEL阳性率也升高(P<0.05).结论:ANXA1拟肽Ac2-26能够提高脓毒症大鼠AKI中肾组织内ANXA1表达,促进中性粒细胞凋亡,对脓毒症引发的大鼠肾组织损伤具有保护作用.

目的 探讨膜联蛋白A1及其模拟肽Ac2-26对高糖诱导大鼠心肌细胞炎症反应的影响.方法 培养大鼠心肌细胞并随机分为正常对照组(葡萄糖5.5 mmol/L)、正常干预组[葡萄糖(5.5 mmol/L)+Ac2-26(0.1 mg/mL)]、高糖模型组(葡萄糖30 mmol/L)、高糖治疗组[葡萄糖(30 mmol/L)+Ac2-26(0.1 mg/mL)];采用实时PCR测定心肌细胞膜联蛋白A1、磷脂酶A2(PLA2)mRNA表达,采用酶联免疫分析法测定心肌细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)水平.结果 与正常对照组比较,正常干预组膜联蛋白A1、PLA2 mRNA,TNF-α、IL-1β水平下降,但差异无统计学意义(P>0.05).与正常对照组比较,高糖模型组膜联蛋白A1、PLA2 mRNA表达,TNF-α、IL-1β水平显著升高(P<0.01).与高糖模型组比较,高糖治疗组PLA2 mRNA表达,TNF-α、IL-1β水平明显下降(P<0.01);但膜联蛋白A1表达下降不显著(P>0.05).结论 膜联蛋白A1与高糖诱导大鼠心肌细胞炎症反应明显相关,Ac2-26能够明显改善高糖诱导大鼠心肌细胞的炎症反应.

目的 研究膜联蛋白A1拟肽Ac2-26在大鼠心肺复苏后对脑损伤神经的保护作用.方法 随机将45只模型大鼠分为假手术组、对照组、Ac2-26组,每组15只.假手术组行动静脉穿刺和气管插管;对照组、Ac2-26组行5 min窒息处理,在自主循环恢复后分别从静脉给予生理盐水、Ac2-26(1 mg/kg).评估三组大鼠术后3 d的存活率,评估术前及术后24、48、72 h神经功能缺损评分;采用ELISA法检测术后3 d大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α浓度;采用Western Blot检测大鼠前额叶皮层和海马中NF-κB蛋白的表达水平.结果 术后3 d假手术组大鼠生存率为100％,对照组为53.3％,Ac2-26组为73.3％,与对照组比较,Ac2-26组大鼠在心肺复苏后3 d的累计生存率明显升高.与假手术组相比,对照组各时间点神经功能缺损评分均降低(P<0.01),而Ac2-26组均高于对照组(P<0.01).Ac2-26组术后3 d血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05),而与假手术组相比,Ac2-26组血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平略升高.Ac2-26组大鼠前额叶皮层和海马中NF-κB蛋白相对表达水平较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05),而Ac2-26组与假手术组皮层和海马中NF-κB蛋白表达水平[(0.174±0.039)vs(0.177±0.054),(0.298±0.014)vs(0.272±0.022)]相比,差异无统计学意义.结论 膜联蛋白A1拟肽Ac2-26对大鼠心肺复苏后脑损伤具有神经保护作用.

目的 通过观察Ac2-26对心肺转流(CPB)大鼠肺功能、肺组织结构及丝裂原活化蛋白激酶p38/细胞核因子-κB(p38MAPK/NF-κB)表达影响.方法 选择成年健康SD雄性大鼠18只,体重350～450 g.随机分成三组:假手术组(S组)、缺血-再灌注组(IR组)和膜联蛋白A1(AnxA1)拟肽Ac2-26组(AC组),每组6只.S组做穿刺及开胸处理,不建立CPB;IR组建立CPB,10 min后开胸夹闭左肺门;AC组建立CPB,在CPB前10 min给予Ac2-261 mg/kg,10 min后开胸夹闭左肺门.分别在CPB前、开放左肺门时、停CPB 90 min时,记录大鼠HR、MAP,并取动脉血行血气分析,计算氧合指数(OI)、呼吸指数(RI).停CPB 90 min时用ELISA法检测左肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-10(IL-10)、支气管液肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-6(IL-6)和总蛋白含量,采用Western-blot法检测肺组织丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38MAPK)、核因子-κBp65(NF-κBp65)、磷酸化核因子-κBp65(p-NF-κBp65)和AnxA1含量,取左肺组织行光镜检查和病理损伤评分.结果 与S组比较,开放左肺门时、停CPB 90 min时IR组和AC组HR明显减慢,MAP、OI明显降低,RI明显升高(P<0.05),停CPB 90 min时IR组和AC组TNF-α、IL-10、IL-6、总蛋白、p-p38MAPK、p-NF-κBp65、AnxA1含量明显升高(P<0.05),病理损伤评分明显升高(P<0.05).与IR组比较,停CPB 90 min时AC组HR明显增快,OI明显升高,RI明显降低(P<0.05),TNF-α、IL-6、总蛋白、p-p38MAPK、p-NF-κBp65、AnxA1含量明显降低(P<0.05),IL-10明显升高(P<0.05),病理损伤评分明显降低(P<0.05).结论 膜联蛋白A1拟肽Ac2-26可抑制大鼠CPB后肺组织丝裂原活化蛋白激酶p38的活化,抑制核因子-κB的分泌,降低TNF-α和IL-6的含量,增加IL-10含量,减轻其肺损伤程度,减少炎性渗出,改善肺功能.