目的 探索自体表皮细胞悬液联合网状皮移植用于深Ⅱ度烧伤创面的治疗效果.方法 将深Ⅱ度烧伤患者随机分为试验组和对照组,对照组接受刃厚网状皮移植(n=8),试验组以自体表皮细胞悬液联合刃厚网状皮移植进行治疗(n=8).表皮细胞悬液取自患者自体健康皮肤组织,通过细胞分离器制备获得.统计两组创面愈合时间、治疗后1周的创面愈合率,以及术后8周的瘢痕评分(温哥华量表),并检测制备的细胞悬液中的表皮细胞浓度、活率.结果 对照组愈合时间(12.1±0.6)d,试验组愈合时间(10.2±0.3)d;治疗后1周,对照组愈合率为76.97%±10.68%,试验组为94.85%±10.01%;术后8周,瘢痕温哥华评分对照组6.13±3.44,试验组2.92±1.07.各项指标试验组均明显优于对照组(P＜0.05).制备细胞悬液的细胞数量为(1.77±0.11)×106个细胞/cm2皮肤标本,细胞活率为87.85%±4%.结论 本研究初步证实了自体表皮细胞悬液联合网状皮移植用于深Ⅱ度烧伤创面治疗,可促进植皮愈合时间,减少供区面积,并可改善术后的瘢痕增生.

目的:探讨类抗-D和类抗-C抗体致婴儿自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的诊治，并且进行相关文献复习。方法:选择2017年7月31日，四川大学华西第二医院收治的1例生后60 d的AIHA女性患儿为研究对象。采用微柱凝胶法检测患儿的血浆抗体和红细胞抗原，对患儿血浆标本进行吸收放散试验，并对血浆及放散液中的不规则抗体进行鉴定。对本例患儿的临床病例资料进行回顾性分析，总结其实验室检查结果、临床特征及诊治经过。本研究对AIHA相关文献进行复习时，设定检索策略为：以"类同种抗体""mimicking antibody"为中、英文关键词，分别对万方知识服务平台、中国知网(CNKI)数据库和PubMed数据库，建库至2020年6月，收录的类同类抗体所致AIHA相关文献进行检索。根据文献复习，总结此类抗体的实验室检测方法，以及此类抗体所致AIHA患者的诊断、治疗和预后。本研究遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。结果:本例患儿于生后53 d出现全身皮肤黄染。患儿生后60 d入院检查：① ABO血型为B型，Rh血型表型为CcDEe型。②红细胞标本的直接抗人球蛋白试验(DAT)、抗体筛查结果均呈阳性，血清及自身红细胞放散液中均检出抗-D和抗-C特异性抗体，血清标本与B/ccdee去白细胞红细胞交叉配血主侧相合。③结合实验室检查结果及临床症状，本例患儿被确诊为类抗-D和类抗-C抗体致AIHA。患儿接受相容性去白细胞悬浮红细胞1 U输血后，其血红蛋白(Hb)值升高至88 g/L，此后逐渐下降至56 g/L，改用激素治疗后，Hb值上升至61 g/L，贫血症状缓解。④符合本研究检索及筛选策略的文献为8篇，纳入研究的本病患儿为8例，其抗体鉴定结果中，Rh血型系统的类同种抗体为5例，Kidd血型系统的类抗-Jk b合并类抗-Jk3抗体为1例，MNS血型系统的类抗-S抗体为1例，Kell血型系统的类抗-Kp b抗体为1例，患者接受的治疗方案主要为输血及药物治疗，并且疗效良好，仅1例产生同种抗体。 结论:类同种抗体在临床上较为少见，采用抗原阴性的红细胞进行吸附试验，可鉴别具有同种抗体特异性的自身抗体，从而避免漏诊和误诊。对于类同种抗体引起的AIHA患儿的治疗以糖皮质激素为主，危急情况下进行血液输注时，应选择相应抗原阴性的红细胞。

男，生后11 d，因“呛奶后呼吸困难5 h”于2020年7月26日入住滨州市人民医院。患儿入院前5 h呛奶1次后出现呼吸增快，伴气喘、喘憋，无口周青紫，无咳嗽，无鼻塞、流涕，无呕吐，无腹胀、腹泻，无抽搐、尖叫，无肢体抖动。患儿生后母乳喂养，吸吮有力，睡眠多，大便正常，小便次数及量多，生后体质量下降明显。患儿系第5胎，第2产，足月剖宫产出生，出生体质量2.8 kg，生后哭声强、婉转，否认窒息、青紫史。父母非近亲结婚，身体健康。外祖父有糖尿病史。入院查体：体温36.6 ℃，脉搏150 次/min，心率48 次/min，体质量2.27 kg，嗜睡状态，反应较差，营养不良。呼吸急促，皮肤黏膜重度黄染、干燥、弹性较差，皮下脂肪层较薄，四肢末梢凉。前囟平坦，张力不高。三凹征（+），双肺呼吸音粗，未闻及明显干湿性啰音。心音有力，未闻及杂音。腹软，肝脾未触及，未触及包块，肌张力略低。辅助检查：急查末梢血糖测不出。血气分析：酸碱度（pH）6.98，二氧化碳分压（PCO 2）11.7 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），氧分压（PO 2）181 mmHg，剩余碱（BE-）29 mmol/L，碳酸氢根2.8 mmol/L，乳酸（Lac）3.28 mmol/L，血糖（Glu）> 38.89 mmol/L，钾6.1 mmol/L，钠134 mmo/L。入院后特级护理，暖箱保暖，心电监测，通知近亲属病重，给予鼻导管吸氧，完善血常规、生化常规、尿常规、胰岛素定量、血清C肽等检验。入院当天检查：降钙素原0.695 μg/L；血清生化：钾6.3 mmol/L，钠134.60 mmol/L，氯100.70 mmol/L，碳酸氢根8 mmol/L，钙3.24 mmol/L，磷2.91 mmol/L，总胆红素268.48 μmo1/L，直接胆红素17.79 μmol/L，总蛋白62.70 g/L，白蛋白45.35 g/L，肌酸激酶142 U/L，肌酸激酶同工酶41 U/L，间接胆红素250.69 μmol/L，血糖40.97 mmol/L。7月26日血清发光检查：胰岛素10.476 pmol/L，血清C肽 0.227 μg/L；尿常规：红细胞30.28个/μL，红细胞5.5个/高倍视野，尿蛋白（1+），隐血（2+），葡萄糖（4+），酮体（4+）。完善糖尿病自身抗体5项测定，糖尿病自身抗体阴性。基因检测未见明显异常。诊断为糖尿病酮症酸中毒。治疗：扩容、纠酸、胰岛素等对症支持，定时定量喂奶。7月27日胰岛素注射液0.5 U于喂奶前15~30 min皮下注射，根据血糖调整胰岛素剂量。8月2日血常规示贫血明显，予输注去白细胞悬浮红细胞纠正贫血治疗。8月8日改为门冬胰岛素30注射液每8小时2 U皮下注射。8月11日眼科会诊提示：患儿双眼视网膜静脉稍迂曲，血管发育基本完全，未见出血、渗出、微血管瘤等。建议控制好血糖，半年检查1次眼底。出院诊断：新生儿糖尿病伴酮症酸中毒，呼吸性碱中毒，新生儿高胆红素血症，新生儿贫血。出院后门冬胰岛素30注射液1.5 U每8小时皮下注射，监测血糖。随访患儿4月龄停胰岛素，血糖控制良好。

目的:基于单细胞RNA测序探讨小鼠全层皮肤缺损创面中真皮成纤维细胞（dFb）的异质性与生长因子调控网络。方法:采用实验研究方法。取5只8周龄雄性健康C57BL/6小鼠（鼠龄、性别、品系下同）正常皮肤组织，另取5只背部全层皮肤缺损小鼠伤后7 d创面组织，用胶原酶D和DNA酶Ⅰ消化组织获得细胞悬液，用10x Genomics平台构建测序文库，用Illumina Novaseq6000测序仪进行单细胞RNA测序。采用R4.1.1软件的Seurat 3.0程序分析获得2种组织细胞的基因表达矩阵，采用按细胞群、细胞来源、标记皮肤中主要细胞基因分类的二维tSNE云图进行可视化展示。根据已有文献报道和CellMarker数据库检索情况，分析2种组织细胞的基因表达矩阵中标志基因表达情况，对各细胞群进行编号和定义。将基因表达矩阵和细胞分群信息导入R4.1.1软件的CellChat 1.1.3程序，分析2种组织中细胞间通信以及创面组织血管内皮生长因子（VEGF）、血小板衍生生长因子（PDGF）、表皮生长因子（EGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）信号通路中的细胞间通信，2种组织中FGF的各亚型与FGF受体（FGFR）各亚型的两两配对（以下简称FGF配受体对）对FGF信号网络的相对贡献，2种组织中相对贡献排名前2的FGF配受体对信号通路中的细胞间通信。取1只健康小鼠正常皮肤组织和1只全层皮肤缺损小鼠伤后7 d创面组织，行多重免疫荧光染色，检测FGF7蛋白的表达与分布及其与二肽基肽酶4（DPP4）、干细胞抗原1（SCA1）、平滑肌肌动蛋白（SMA）和PDGF受体α（PDGFRα）的蛋白共定位表达。结果:健康小鼠正常皮肤组织和全层皮肤缺损小鼠伤后7 d创面组织中均包含25个细胞群，但2种组织中各细胞群中细胞数不一致。 PDGFRα、血小板内皮细胞黏附分子1、淋巴管内皮透明质酸受体1 、受体型蛋白酪氨酸磷酸酶C、角蛋白10和角蛋白79基因在二维tSNE云图上均有各自明确的分布，分别指示特定的细胞群。将25个细胞群按C0~C24编号，分为9个dFb亚群和16个非dFb群，dFb亚群包括C0间质祖细胞、C5脂肪前体细胞、C13具有收缩能力的肌肉细胞相关成纤维细胞等，非dFb群包括C3中性粒细胞、C8 T细胞、C18红细胞等。与健康小鼠正常皮肤组织比较，全层皮肤缺损小鼠伤后7 d创面组织中细胞间通信更多更密集，其中细胞间通信强度排前3位的细胞群为dFb亚群C0、C1、C2，这3个dFb亚群与创面组织中其他细胞群之间均有通信。在全层皮肤缺损小鼠伤后7 d创面组织中，VEGF信号主要由dFb亚群C0发送、脉管相关细胞群C19和C21接收，PDGF信号主要由周细胞C14发送、多个dFb亚群接收，EGF信号主要由角质形成细胞亚群C9和C11发送、dFb亚群C0接收，FGF信号的主要发送者和接收者均为dFb亚群C6。健康小鼠正常皮肤组织和全层皮肤缺损小鼠伤后7 d创面组织FGF信号网络中的FGF配受体对相对贡献，均是FGF7-FGFR1排在首位，排名第2的分别是FGF7-FGFR2、FGF10-FGFR1；与正常皮肤组织比较，创面组织FGF7-FGFR1信号通路中的细胞间通信更多，而FGF7-FGFR2和FGF10-FGFR1信号通路中的细胞间通信稍有减少或无明显变化；创面组织FGF7-FGFR1信号通路中的细胞间通信强于FGF7-FGFR2、FGF10-FGFR1信号通路；在2种组织中，FGF7信号均主要由dFb亚群C0与C1和C2发送、dFb亚群C6和C7接收。与健康小鼠正常皮肤组织比较，全层皮肤缺损小鼠伤后7 d创面组织中FGF7蛋白表达更多；在正常皮肤组织中，FGF7蛋白主要表达于皮肤间质层且在靠近真皮白色脂肪组织附近也有表达；在2种组织中，FGF7蛋白与DPP4、SCA1蛋白共定位表达于皮肤间质层中，与PDGFRα蛋白共定位表达于dFb中，与SMA蛋白无共定位表达，其中创面组织中的共定位表达多于正常皮肤组织。 结论:小鼠全层皮肤缺损创面愈合过程中的dFb存在高异质性，为多种生长因子潜在的主要分泌或接收细胞群落，与生长因子信号通路之间存在紧密、复杂的联系；FGF7-FGFR1信号通路是创面愈合过程中的主要FGF信号通路，靶向调控多个dFb亚群。

目的:探索异体毛乳头细胞（DPC）对小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响及其机制。方法:该研究为实验研究。利用显微解剖结合胶原酶消化法自5只6周龄雄性C57BL/6J小鼠触须毛囊中提取DPC并成功鉴定。将18只8周龄雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为磷酸盐缓冲液（PBS）组及DPC组（每组9只小鼠），在所有小鼠背部创建全层皮肤缺损创面模型。分别于伤后2、4、6 d，通过创面周围皮下注射给予DPC组小鼠含1×10 6个第4代DPC的细胞悬液100 μL、PBS组小鼠等体积的PBS。伤后3、7、10、14 d，观察2组小鼠创面愈合情况及毛发生长情况并测量创面剩余面积；另测量2组小鼠伤后14 d创面毛发覆盖面积。伤后14 d，收集2组小鼠创面组织标本，行苏木精-伊红染色观察新生毛囊情况并计数，行Masson染色观察真皮层胶原沉积情况并测量胶原沉积面积，采用免疫荧光法检测Wnt/β连环蛋白信号通路相关分子β连环蛋白、淋巴增强结合因子1（Lef1）的蛋白表达，分别采用蛋白质印迹法和实时荧光定量反转录PCR法检测β连环蛋白、Lef1的蛋白和mRNA表达。各实验样本数均为3。 结果:与PBS组相比，DPC组小鼠伤后各时间点创面再上皮化速度加快，且在伤后10、14 d可见更多毛发生长。伤后7、10、14 d，DPC组小鼠创面剩余面积分别为（13.92±2.90）、（3.69±1.78）、（1.09±0.14）mm 2，分别明显小于PBS组的（26.19±2.06）、（10.84±3.59）、（6.75±2.11）mm 2（ t值分别为5.85、3.09、4.63， P值均<0.05）。伤后14 d，DPC组小鼠创面毛发覆盖面积为（62±7）mm 2，明显大于PBS组的（35±6）mm 2（ t=2.89， P<0.05）。伤后14 d，与PBS组比较，DPC组小鼠创面组织中新生毛囊数量明显增多（ t=5.43， P<0.05），真皮层胶原沉积面积明显缩小（ t=3.56， P<0.05）。伤后14 d，免疫荧光法和蛋白质印迹法检测均显示，DPC组小鼠创面组织中β连环蛋白（ t值分别为5.49、4.25， P值均<0.05）和Lef1（ t值分别为7.50、11.54， P值均<0.05）的蛋白表达均明显高于PBS组；DPC组小鼠创面组织中β连环蛋白和Lef1的mRNA表达均明显高于PBS组（ t值分别为7.68、9.67， P<0.05）。 结论:DPC通过激活Wnt/β连环蛋白信号通路加快小鼠全层皮肤缺损创面再上皮化，并促进创面愈合过程中的毛囊再生。

目的:构建3D打印皮肤成体干细胞来源类器官人工皮肤并探讨其修复小鼠皮肤缺损的效果。方法:将人皮肤角质形成细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞以2∶1∶1制备细胞混合悬液，在超低吸附培养板中培养，倒置相差显微镜观察细胞球的形态变化。培养7 d后收集细胞球，进行免疫荧光染色，检测其真皮、表皮及血管标志物的表达情况及结构分布情况。采用3D打印技术打印类器官人工皮肤，观察打印出的人工皮肤的形态。将10只免疫缺陷balb/c雌性小鼠按随机数字表法分为水凝胶组和类器官组，每组5只。所有小鼠建立直径1 cm的全层皮肤缺损模型，水凝胶组创面覆盖水凝胶敷料，类器官组创面覆盖相同大小类器官人工皮肤。建模后0、4、8、12及16 d观察两组创面愈合大体情况及创面愈合率。建模后16 d时创面皮肤取材，HE染色观察创面表皮角化情况及表皮真皮连接情况，Masson染色观察创面胶原纤维的疏松致密程度及真皮层纤维厚度。结果:（1）角质形成细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞的细胞混合悬液在超低吸附培养板中可自聚集形成细胞球；倒置显微镜观察显示，随着培养时间延长，细胞球体积逐渐增大。（2）细胞球免疫荧光染色结果显示，细胞球外层表达表皮标志物如角蛋白（K）1、K10及K14，核心表达真皮标志物如波形蛋白（VIM）及血管标志物CD31，即表皮位于球体的外层，真皮和血管位于球体的中央，符合皮肤类器官的结构特点。（3）3D打印出的类器官人工皮肤呈圆形透明状，直径10 mm，厚度1 mm。（4）小鼠创面大体观察结果显示，两组小鼠创面面积随治疗时间延长均有缩小，类器官组创面愈合速度更快，建模后4 d时即出现明显上皮化，16 d时创面基本愈合。建模后0 d时两组创面外观无差异；建模后4、8 d时类器官组创面愈合率分别为（31.7±1.0）%、（52.4±5.4）%，水凝胶组分别为（24.3±6.8）%、（45.4±7.0）%（ P>0.05）；建模后12、16 d时类器官组创面愈合率分别为（78.6±8.0）%、（91.1±5.6）%，水凝胶组分别为（58.5±5.4）%、（71.9±7.8）%（ P<0.01）。（5）创面皮肤HE染色结果显示，类器官组表皮角化更好，表皮层更完整，表皮与真皮贴附良好，连接紧密；水凝胶组表皮角化不全且表皮与真皮明显分离。Masson染色结果显示，两组创面真皮层均由胶原纤维结构生成，呈蓝色网状结构，但类器官组创面胶原纤维结构更加致密，真皮层纤维厚度更小；而水凝胶组胶原纤维结构松散，真皮层胶原纤维厚度更大。 结论:皮肤成体干细胞在3D培养条件下可形成皮肤类器官，并利用3D生物打印技术构建类器官人工皮肤。与水凝胶敷料相比，类器官人工皮肤可明显提高小鼠皮肤缺损创面愈合速率，创面表皮角化程度更好，表皮与真皮连接更紧密，并且创面胶原纤维结构更加致密，真皮层纤维厚度更小。

目的 检测一种免洗速干过氧化氢-乙醇手消毒剂的消毒相关性能及毒性.方法 采用悬液定量杀灭试验、理化试验和动物毒性试验方法,检测该消毒剂对细菌、真菌及病毒的杀灭性能及其安全性.结果 该手消毒剂以过氧化氢和乙醇为主要复合杀菌组分,过氧化氢含量为1 470 mg/L,乙醇含量为体积分数80.1%.用该手消毒剂原液作用0.5、1.0、1.5 min,对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的杀灭对数值均>6.00,对白念珠菌平均杀灭对数值>5.00;对脊髓灰质炎病毒Ⅰ型疫苗株的平均灭活对数值>4.00;用该手消毒剂原液作手擦拭消毒,作用 1 min对手上自然菌的杀灭对数值>1.00.该手消毒剂密封包装经 37℃储存 3个月,其有效成分含量下降率均<10%;该手消毒剂的皮肤刺激试验结果表明属无刺激性;急性经口毒性试验结果表明,对小鼠的毒性属实际无毒;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验呈阴性.结论 该过氧化氢-乙醇手消毒剂对细菌繁殖体、真菌和病毒均具有快速杀灭效果,属实际无毒级物质,其储存性能稳定.

目的 研究一种聚六亚甲基双胍果蔬消毒剂的消毒效果及安全性.方法 根据消毒产品卫生安全评价技术要求,对该果蔬消毒剂的pH值、重金属含量、聚六亚甲基双胍含量和稳定性等理化性能进行测定,通过中和剂鉴定、微生物杀灭试验、物体表面消毒现场试验对消毒效果进行评价,通过急性经口毒性、致突变、一次性完整皮肤刺激试验进行毒理安全评价.结果 该果蔬消毒剂的pH值(25℃)为7.08,砷含量＜0.01 mg/kg,汞含量＜0.002 mg/kg,铅含量＜1.5 mg/kg,有效成分聚六亚甲基双胍的含量为0.497 g/kg.37℃条件下存放3个月后,有效成分含量下降至0.492 g/kg,下降率为1.27%.该样品原液作用5 min,对悬液中大肠埃希菌的杀灭对数值均＞5.00,对30根黄瓜表面自然菌的平均杀灭对数值＞1.00;该果蔬消毒液急性经口毒性属实际无毒,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验无致微核作用,一次性完整皮肤刺激试验属无刺激性.结论 该果蔬消毒剂具有较好的消毒效果、稳定性和安全性.

背景:目前临床皮肤创面愈合仍然是一大难题,而具有免疫调节功能的生物材料成为当下组织修复领域的研究前沿,因此,研究具有免疫调节功能的创面敷料具有重要意义.目的:制备不同构型精氨酸改性壳聚糖水凝胶,评估其促大鼠创面愈合的能力.方法:①体外实验:采用EDC/NHS体系分别合成了单纯左旋精氨酸、单纯右旋精氨酸及左旋精氨酸与右旋精氨酸联合改性的壳聚糖材料,以醛基化的四臂聚乙二醇为交联剂,通过席夫碱反应构建精氨酸改性壳聚糖水凝胶,依次命名为CS-L、CS-D、CS-DL水凝胶,表征水凝胶的理化性能.将3种水凝胶浸提液分别与成纤维细胞共培养,采用CCK-8法及活死染色评价水凝胶的细胞相容性,通过划痕实验评价水凝胶对成纤维细胞迁移能力的影响.将3种水凝胶分别与大鼠红细胞悬液共孵育,评估水凝胶的血液相容性.将3种水凝胶浸提液分别与巨噬细胞RAW264.7共培养,评估水凝胶对细胞产生NO及极化分型的影响.②体内实验:采用随机数字表法将36只成年SD大鼠分为4组,每组9只,在每只大鼠背部制作2个2 cm×2 cm的全层皮肤缺损创面,对照组创面滴加生理盐水,CS-L组、CS-D组、CS-DL组创面分别滴加对应的水凝胶,包扎固定.术后定期观察创面愈合情况;术后3,10,21 d取材,进行苏木精-伊红染色;术后10 d取材,进行M2型巨噬细胞免疫荧光染色.结果与结论:①体外实验:扫描电镜下可见3种水凝胶内部均有明显的互穿网络结构,孔径范围70-200 μm;3种水凝胶均具有良好的溶胀性能、降解性能、自愈合性能及合适的机械强度.3种水凝胶具有良好的细胞相容性与血液相容性,可促进成纤维细胞的迁移.3种水凝胶均具有促进巨噬细胞极化的能力,其中CS-D水凝胶促巨噬细胞极化能力最强;CS-L水凝胶具有促进巨噬细胞产生NO的能力.②体内实验:术后3,10 d,CS-L组、CS-D组大鼠创面愈合率高于对照组(P<0.05);术后21 d,3种水凝胶组大鼠创面愈合率高于对照组.苏木精-伊红染色显示,术后3 d,各组大鼠创面组织中都有大量炎性细胞浸润,伴有新生血管及成纤维细胞;术后10 d,对照组创面中仍有较多炎性细胞浸润,其他3组炎症情况有所改善,特别是CS-D组炎症细胞减少较为明显;术后21 d,各组创面上皮修复良好,CS-L组和CS-D组基本无炎症细胞浸润,对照组仍有少量炎症细胞浸润.免疫荧光染色显示,CS-D组M2型巨噬细胞数量多于其他3组(P<0.05).③结果表明:不同构型精氨酸改性壳聚糖水凝胶可以通过不同机制促进创面愈合.

肿瘤引流淋巴结(TDLN)是肿瘤抗原首先进入的二级淋巴器官,是决定机体免疫激活抑或免疫耐受的关键初始部位.本研究旨在探讨建立小鼠TDLN的可行性.一、材料与方法将悬浮于20μl磷酸盐缓冲液(PBS)的体外培养Hepa1-6细胞(6×105个)应用1 ml注射器(注射胰岛素用)注射于6～8周龄C57BL/6J小鼠右后肢足掌皮下,每隔3d测量肿瘤长径.第12天处死小鼠,自足踝向上剪开皮肤后予剥脱后肢皮肤,髌骨后方可见局部有脂肪堆积的腘窝,用小弯眼科镊纵向钝性分离,辨别[1],再轻柔取出足掌肿瘤侧腘淋巴结(TDLN)(勿夹挤淋巴结,以免破碎).自踝关节剪断双足并称重,每只小鼠肿瘤足重量减去对侧正常足重量测得肿瘤重量.剖检观察肺、肝及腹腔有无转移.统计分析采用t检验.