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芽孢表面展示系统及其在水产疫苗研发中的应用
编辑人员丨2024/3/30
水产养殖动物疾病的发生日益频繁,给整个行业造成了巨大的经济损失.口服疫苗可以有效预防疾病的发生,同时不会造成应激反应,更适用于水产动物疾病的预防.芽孢杆菌是水产中常用益生菌,能够形成抗逆性强的芽孢,芽孢能够被用来构建芽孢表面展示系统,进而成为抗原呈递的理想平台.因而,利用芽孢表面展示口服疫苗并将抗原稳定地呈递到肠道,发挥更加高效的免疫性能的研究受到了越来越多的关注.文章综述了芽孢杆菌芽孢和感受态,以及芽孢表面展示系统,此外,还特别概述了芽孢作为口服疫苗载体在预防水产动物细菌病、病毒病和寄生虫病方面的研究与应用,以期为水产养殖动物高效稳定口服疫苗的开发提供参考.
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编辑人员丨2024/3/30
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产单核细胞李斯特菌p60蛋白N端肽聚糖结合基序在枯草芽孢杆菌中的表达
编辑人员丨2023/8/6
目的:构建产单核细胞李斯特菌胞外蛋白p60的N端肽聚糖结合基序(p60-N)表达载体,实现其在枯草芽孢杆菌中的分泌表达.方法:将目标基因克隆到表达载体pHT43中获得重组载体pHT43-p60-N,转化枯草芽孢杆菌WB800N获得重组工程菌株WB800N/pHT43-p60-N,在此基础上考察IPTG浓度、培养基、表达时间和温度等条件对目标蛋白表达的影响.结果:p60-N蛋白可在枯草芽孢杆菌中分泌表达,与鼠李糖乳杆菌形成的革兰阳性增强基(GEM)颗粒特异性结合,具有与天然蛋白类似的生物学活性.用GB培养基,在37℃下,加入终浓度为0.2 mmol/L的IPTG诱导12~20 h,表达量提高到28 mg/L.结论:实现了p60蛋白N端基序在枯草芽孢杆菌中的分泌表达,为进一步研究以该蛋白为基础的细菌样颗粒疫苗奠定了基础.
p60蛋白N端肽聚糖结合基序 枯草芽孢杆菌 革兰阳性增强基-蛋白锚钩(GEM-PA)表面展示系统 N-terminal peptidoglycan binding motif of extracellular protein p60...不再出现此类内容
编辑人员丨2023/8/6
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重组大肠杆菌全细胞催化高效合成胆绿素
编辑人员丨2023/8/5
胆绿素作为一种重要的保护细胞的抗氧化剂,其传统生产方法主要由胆红素的化学氧化产生,但过程复杂、纯度不高.本研究提出了一种高效、绿色、安全的生产胆绿素的方法.通过比较,筛选得到了破伤风梭状芽孢杆菌(Clostridium tetani)来源的血红素加氧酶(heme oxygenase,HO)基因,并成功构建具备转化血红素合成胆绿素能力的重组大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pETDuet-hoCt.在pH 7.0、35℃、100 mg/L底物浓度条件下胆绿素产量为32.9 mg/L.为提高还原力,构建了基于谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,GdhA)的NADPH辅酶再生系统,获得重组菌E.coliBL21/pETDuet-gdhAEc-hoCt,胆绿素产量为71.5 mg/L.此外,通过引入膜表面展示系统,构建重组菌E.coliBL21/pETDuet-gdhAEc-blc/hoCt,缩短转化时间的同时,胆绿素产量进一步得到提高,达到76.3 mg/L,是目前生物法合成胆绿素的最高研究报道.本研究为胆绿素的绿色生产奠定了良好的基础.
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编辑人员丨2023/8/5
