目的:探讨苍膝通痹胶囊治疗膝关节骨关节炎(KOA)的临床疗效及作用机制.方法:选取 82 例KOA患者,使用随机数字表法分为两组(n=41),对照组给予硫酸氨基葡萄糖钾片、布洛芬缓释胶囊口服,观察组加用苍膝通痹胶囊.比较两组患者中医证候积分、AKS评分、WOMAC、VAS评分、临床疗效及关节液Coll2-1、COMP 和血清TNF-α、hs-CRP、IL-6 水平.结果:与治疗前比较,治疗后两组患者AKS评分显著升高,中医证候积分、WOMAC、VAS评分及血清hs-CRP、TNF-α、IL-6水平和关节液Coll2-1、COMP水平显著降低(P<0.05),观察组各指标改善显著优于对照组(P<0.05).观察组与对照组的治疗总有效率(90.2%vs 75.6%)差异有统计学意义(P<0.05),不良反应发生率(2.44%vs 0%)差异无统计学意义(P>0.05).结论:苍膝通痹胶囊治疗KOA能有效抗炎消肿,减轻关节疼痛、遇寒加重、关节重着等症状,改善膝关节功能,临床疗效显著,安全性好.

目的:采用网络药理学方法及分子对接技术探讨苍膝通痹胶囊治疗骨关节炎(osteoarthri-tis,OA)的分子机制.方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(traditional Chinese medicine sys-tems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)筛选苍膝通痹胶囊的活性成分及对应靶点;运用Drugbank、人类基因数据库(the human gene database,GeneCards)、药物靶标数据库(therapeutic targetdatabase,TTD)、比较毒理基因组学数据库(comparative toxicogenomics database,CTD)检索OA的已知疾病靶点;使用Venny平台得到苍膝通痹胶囊治疗OA的药效靶点.运用Cytoscape 3.7.2软件构建"药物-成分-靶点-疾病"网络,运用STRING数据库建立蛋白-蛋白互作网络(protein-protein interactions,PPI),利用CytoHubba工具对所得PPI网络进行拓扑分析筛选出关键靶点.借助DAVID数据库对作用靶点进行基因本体论功能富集分析(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)获取其潜在作用机制,构建苍膝通痹胶囊"通路-靶点"作用网络.从RCSBPDB数据库获取靶点的晶体结构文件,从Pubchem数据库获取活性成分的结构文件,利用Auto vina软件进行分子对接验证.结果:共得到苍膝通痹胶囊活性成分60个、作用靶点140个.OA疾病靶点469个,苍膝通痹胶囊治疗OA的靶点52个.核心成分有槲皮素、β-谷甾醇、豆甾醇、木犀草素等.核心靶点包括IL-1β、IL-6、VEGFA、MAPK、JUN等.通路主要涉及PI3K-Akt、NF-κB、FoxO、雌激素、MAPK通路等.有效成分在与核心靶点对接中具有较强的结合能力.结论:苍膝通痹胶囊通过调控细胞增殖、抑制炎症等多成分、多靶点、多通路治疗OA.

该研究旨在探讨苍膝通痹胶囊通过调控circRNA_0008365/miR-1271/p38 MAPK通路轴促进软骨细胞自噬抑制膝骨关节炎(KOA)进展的机制.于体内、体外分别构建软骨细胞和大鼠的骨关节炎模型,分别给予苍膝通痹胶囊、circRNA_0008365 干扰、空载对照、以及苍膝通痹胶囊合用circRNA_0008365 干扰进行干预.应用流式细胞术观察细胞凋亡,透射电镜观察自噬小体,Western blot观察各组软骨细胞自噬指标微管相关蛋白轻链 3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)Ⅱ/Ⅰ、自噬效应蛋白-1(Beclin-1)、选择性自噬接头蛋白p62/sequestosome 1(selective autophagy junction protein p62/sequesto-some 1,p62)、软骨细胞外基质代谢(collagen Ⅱ、ADAMTS-5)及 p-p38 MAPK的蛋白表达,qRT-PCR观察各组软骨细胞 circ RNA_0008365、miR-1271、collagen Ⅱ、ADAMTS-5的表达水平,hematoxylin-eosin(HE)染色观察各组大鼠膝关节软骨组织形态学的改变,ELISA观察各组软骨细胞炎性因子(IL-1β、TNF-α)的表达变化.体外实验结果显示,IL-1β诱导的软骨细胞 circ RNA_0008365 表达量下降,miR-1271、p38 MAPK表达量上升,自噬水平下降而凋亡率上升,软骨外基质的分解代谢增加;苍膝通痹胶囊的干预使KOA软骨细胞的circRNA_0008365 表达量回升,miR-1271、p38 MAPK表达量下降,自噬水平升高而凋亡率降低,软骨外基质的分解代谢减弱;而干扰circRNA_0008365 后,抑制了苍膝通痹胶囊的干预趋势.体内实验提示,苍膝通痹胶囊剂量依赖性的抑制了p38 MAPK通路的表达,增强了软骨细胞自噬,降低了KOA大鼠关节软骨的损害和炎症反应,从而抑制了KOA的进展.该研究表明,苍膝通痹胶囊能通过调控circRNA_0008365/miR-1271/p38 MAPK通路轴促进软骨细胞自噬,抑制KOA的发展.

目的:观察苍膝通痹胶囊治疗膝骨关节炎(KOA)模型大鼠的疗效及相关作用机制.方法:将60只4周龄SPF级健康雄性SD大鼠,随机分为空白组,模型组,二甲基亚砜(DMSO)组,苍膝通痹胶囊组,SB203580组以及苍膝通痹胶囊联合SB203580组,每组10只.除正常组外,其余各组采用改良Hulth法建立KOA模型,造模成功后,苍膝通痹胶囊组每日给予0.25 g·kg-1苍膝通痹胶囊溶液灌胃,SB203580组每日给予0.015 g·kg-1的SB203580溶液灌胃,苍膝通痹胶囊联合SB203580组组每日给予含0.015 g·kg-1 SB203580及0.25 g·kg-1苍膝通痹胶囊的混合溶液灌胃,DMSO组给予1％ DMSO溶液灌胃,模型组和空白组给予生理盐水灌胃,用药干预4周后处死、取材.苏木素-伊红(HE)染色观察软骨组织形态学改变,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测外周血上清液中白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平,实时荧光定量PCR(Real-tinePCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测软骨组织中p38 MAPK信号通路中相关因子p38,p-p38,基质金属蛋白酶-13(MMP-13),Ⅱ型胶原蛋白(Collagen Ⅱ)mRNA及蛋白的表达水平,免疫组化法检测p-p38的定位表达.结果:与正常组比较,模型组关节软骨中p38,p-p38,MMP-13表达水平显著上调(P＜0.01),Collagen Ⅱ表达水平显著下调(P＜0.01),血清IL-1β,TNF-α表达水平显著上调(P＜0.01);与模型组比较,苍膝通痹胶囊组,SB203580组以及苍膝通痹胶囊联合SB203580组关节软骨中p38,p-p38,MMP-13表达水平显著下调(P＜0.01),Collagen Ⅱ表达水平显著上调(P＜0.01),血清IL-1β,TNF-α表达水平显著下调(P＜0.01).结论:苍膝通痹胶囊可有效保护KOA大鼠软骨组织,其机制可能与靶向阻断p38 MAPK信号通路有关.

目的:观察苍膝通痹胶囊治疗膝骨关节炎(KOA)的临床疗效.方法:将60例David I～Ⅱ期的KOA患者按随机数字表法分为苍膝通痹胶囊组(A组)和痹祺胶囊组(B组),每组30例,分别给予相应的药物治疗2个月,定期随访.观察比较两组患者治疗前及治疗后2周、1个月、2个月视觉模拟评分法(VAS)评分、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(WOMAC)评分、Lequesne指数评分,比较两组临床疗效并评价药物安全性.结果:治疗2周、1个月、2个月后,两组患者VAS、Lequesne指数和WOMAC评分较治疗前均明显降低(P＜0.05);治疗2周后A组患者VAS、Lequesne指数和WOMAC评分均低于B组(P＜0.05);治疗1个月、2个月后两组患者VAS、Lequesne指数和WOMAC指数评分比较,差异无统计学意义(P＞0.05).治疗2周后A组疗效优于B组(P＜0.05),治疗1个月、2个月后两组疗效比较差异无统计学意义(P＞0.05).两组患者治疗过程中均未出现过敏、皮疹以及恶心、呕吐等不良反应,药物安全等级均为I级.结论:苍膝通痹胶囊可以明显缓解KOA患者的疼痛、肿胀以及关节功能障碍,疗效安全可靠,与痹祺胶囊相比,具有起效更快的优势.

[目的]阐明苍膝通痹胶囊组方规律及治疗骨性关节炎的分子机制.[方法]通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)数据库寻找该方相应药物独活、威灵仙、苍术、萆薢、鸡血藤、桑寄生、川牛膝、骨碎补及川续断的化合物成分,采用药物口服生物利用度(OB)、药物相似性(DL)、化合物相对分子质量(MW)、脂-水分配系数(AlogP)等药理学核心参数对药物化合物进行评价,构建药物-成分-靶点-疾病网络,探析药物干预靶点后的作用机理,综合分析"君臣佐使"的药物分布规律及原因.再通过分子对接技术进一步验证其治疗骨性关节炎的作用机制,对多成分、多通路、多靶点的配合治疗进行分析验证.采用酶联免疫吸附分析(ELISA)检测软骨细胞上清中炎性因子白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,以验证网络药理学预测治疗效果及分子对接结果.[结果]独活、威灵仙MW均高于桑寄生,独活AlogP最高,且与威灵仙、鸡血藤、桑寄生近似,与其他药物明显不同.通过TCMSP数据库共寻找到相关化合物472个,根据药理学OB、DL等相关参数阈值要求筛选后,符合治疗要求的化合物共有27个.进行药物-成分-靶点-疾病网络可视化的构建,共有222个靶点,781条边,27个有效成分及1个疾病名称.分子对接结果显示,苍膝通痹胶囊有27种化学成分与骨性关节炎关键炎性因子结合能较为理想.ELISA法检测结果显示,苍膝通痹胶囊可降低软骨细胞上清中IL-1β、TNF-α的含量,与分子对接结果相同.[结论]苍膝通痹胶囊组方"君臣佐使"药味分布较为合理,君臣两药互相弥补,互相辅助,增其药性,佐使之药除其辅助之功外还可提供与疾病相关的其他证型需要,为药物综合治疗某种疾病提供帮助.苍膝通痹胶囊可有效治疗骨性关节炎,其作用机制具有多成分、多靶点的特点.