目的 研究蒙药苏格木勒-4对失眠大鼠的代谢影响,初步探讨其改善失眠的可能机制.方法 采用夹尾刺激和腹腔注射对氯苯丙氨酸溶液复合造模法建立慢性应激失眠大鼠模型.将24只雄性大鼠随机分为正常组、模型组、地西泮组(阳性对照,0.92 mg/kg)和苏格木勒-4组(5.2 g/kg),每组6只.从夹尾刺激第7天开始,苏格木勒-4组、地西泮组大鼠开始灌胃给药,正常组、模型组大鼠灌胃等体积蒸馏水,每天灌胃1次,连续14 d.利用水迷宫实验测试大鼠的学习和记忆能力,利用无创睡眠活动监测系统对大鼠24 h睡眠时间进行监测.采用超高效液相色谱串联质谱技术对大鼠血清和海马组织进行代谢组学研究.使用多元统计分析方法对各组大鼠血清和海马组织中差异代谢物进行分析,筛选各组间的差异代谢物以及代谢通路.结果 与正常组比较,模型组大鼠的逃避潜伏期显著延长、穿越平台次数显著减少、平均24 h睡眠时间百分比显著降低(P＜0.05).与模型组比较,地西泮组和苏格木勒-4组大鼠上述指标水平均显著改善(P＜0.05).代谢组学研究发现,大鼠血清和海马组织中共鉴定出5-羟基吲哚乙酸、犬尿氨酸、犬尿喹啉酸、5-羟色胺、硫酸苯酚、1-羧基乙基酪氨酸、3-(4-羟基苯基)乳酸、N-乙酰基酪氨酸、酪氨酸共9个差异代谢物,主要涉及色氨酸和酪氨酸2条代谢通路.结论 苏格木勒-4可以改善失眠大鼠睡眠时间和行为学表现,其机制可能与调节色氨酸、酪氨酸等氨基酸代谢途径有关.

目的:建立测定蒙药苏格木勒-3汤水提物中芹菜素、胡椒碱及其挥发油中桉油精、枯茗醛含量的方法.方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定芹菜素、胡椒碱的含量;采用气相色谱法(GC)测定桉油精、枯茗醛的含量.HPLC法采用色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18,流动相为甲醇-0.1％磷酸水溶液,流速为1.0 mL/min,检测波长为225(芹菜素)、342 nm(胡椒碱),柱温为30℃,进样量为10μL.GC法采用色谱柱为Dimensions SH-Rtx-1毛细管柱,载气为高纯氢气,进样口温度为270℃,载气流量为1 mL/min,程序升温,进样量为10μL,进样分流比为1:10.结果:芹菜素、胡椒碱、桉油精、枯茗醛检测质量浓度的线性范围分别为12.5～200μg/mL(r=0.9996)、87.3～139.7μg/mL(r=0.9999)、136～2187μg/mL(r=0.9999)、39～635μg/mL(r=0.9999);定量限分别为0.02、0.06、0.06、0.12μg/mL;检测限分别为0.01、0.02、0.03、0.04μg/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于4％;加样回收率分别为89.26％～97.26％(RSD=2.69％,n=6)、94.20％～104.01％(RSD=3.64％,n=6)、98.51％～110.11％(RSD=3.87％,n=6)、95.76％～107.82％(RSD=4.12％,n=6);含量分别为0.769～0.828、7.741～7.981、5.2847～5.8466、1.0386～1.1012 mg/g(n=3).结论:所建方法简单、可行,可用于蒙药苏格木勒-3汤不同部位的质量控制.

目的:运用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对蒙药苏格木勒-4汤正己烷及乙酸乙酯总提取物中的成分进行分析.方法:采用正己烷、乙酸乙酯系统萃取蒙药苏格木勒-4汤煎剂,运用GC-MS技术,结合NIST质谱数据库对其正己烷及乙酸乙酯部位进行分析鉴定.结果:从正己烷部位共分离出59种成分,从乙酸乙酯部位共分离出41种成分,并鉴定了其中的大多数成分.结论:蒙药苏格木勒-4汤中低极性化学成分正己烷及乙酸乙酯总提取物中化学成分主要由萜类、三萜类、苯丙酸类、生物碱、甾体、脂肪类、芳香酸、有机酸、醛、酯、醇、烃类和苯的衍生物化合物组成,分析这些低极性化学成分能更好地阐明蒙药复方苏格木勒-4汤剂中的有效成分及其作用机制.

目的 对蒙药苏格木勒-3 水提物中胡椒碱进行大鼠血清药动学研究.方法 采用乙腈沉淀蛋白进行血清样品预处理,选用盐酸维拉帕米为内标,以UPLC-Q-TOF法测定大鼠血清中胡椒碱含量.色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3 C18(2.1 mm×100 mm,1.8 μm),流动相为甲醇(A)-0.1％甲酸水(B),A ∶B = 70％∶30％,流速:0.4 mL·min-1,柱温30℃,进样量:2 μL.电喷雾电离离子源(ESI),采用多反应离子监测,检测离子为正离子,分别选择m/z胡椒碱286/201,维拉帕米455/165.结果 胡椒碱在0.015～20.272μg·mL-1线性关系良好(R2=0.999 4).日内精密度RSD1.2％～8.1％,日间精密度RSD1.7％～12.7％.水提物回收率为70％～85％.取SD大鼠,按3.96 g·kg-1剂量口服给药后,主要药动学参数:Cmax为0.415 μg·mL-1、tmax为4.00h、t1/2为 10.00 h、AUC0～24 为3.36 h·pg·mL-1、AUC0～∞为4.17 h·pg·mL-1、MRT 为 14.10 h.结论 建立的含量测定方法快速、准确,适用于胡椒碱在大鼠体内的药动学研究.

目的 探究苏格木勒-7对卵巢功能低下模型大鼠的卵巢功能保护机制.方法 采用48只正常性周期大鼠随机分为4组:模型组即环磷酰胺组(CTX)、模型加苏格木勒-7〔0.5 g/(kg·d)〕组即苏-7-0.5组、模型加苏格木勒-7〔1.0 g/(kg·d)〕组即苏-7-1.0组、正常组,除了正常组其他3组均连续7 d腹腔注射CTX 30 mg/(kg·d).正常组和模型组等量生理盐水灌胃,其余给药组在造模第1天开始(建模同时)分别灌胃给予苏-7-1.0 g/(kg·d)和苏-7-0.5 g/(kg·d),每天给药1次,连续给药24 d,采用免疫组织化学法检测卵巢组织氧化应激相关蛋白8-羟基脱氧乌苷(OHdG)、4-羟基壬烯醛(HNE)、硝基酪氨酸(NTY)及卵泡发育相关细胞因子骨形成态蛋白质(BMP)-15、生长分化因子(GDF)-9的定位及表达量;用Western印迹法检测卵巢组织凋亡相关蛋白及抗氧化相关蛋白Bax、Bcl-2、超氧化物歧化酶(SOD)、血小板反应蛋白(TSP)-1、组织蛋白酶(Cathepin)D、骨髓基质细胞抗原(BST)1、补体因子-H(CFH)等的表达量.结果 苏格木勒-7对大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、转化生长因子(TGF)-β1明显改善;Western印迹检测结果,对Bax、Bcl-2、SOD及TSP-1、CFH等显著改善.结论 苏-7通过多方面、多途径来对化疗性卵巢功能低下大鼠内分泌和生殖功能起到保护作用.

目的:采用气相色谱质谱联用技术分析蒙药苏格木勒-4精油中的主要化学成分,结合网络药理学方法预测苏格木勒-4精油中治疗失眠的有效成分及作用机制,同时通过动物实验验证苏格木勒-4对失眠相关神经递质的影响.方法:使用同时蒸馏萃取的方法制备苏格木勒-4精油,经过GC-MS技术分离鉴定精油中的主要成分,搜索其主要成分在中药药理学平台TCMSP数据库中的有效靶点后,建立"成分-靶点"网络和蛋白质相互作用网络,用已知的靶基因在R语言的程序中运行得到GO与KEGG富集分析,最后进行分子对接.将40只ICR小鼠随机分为正常组、模型组、苏格木勒-4组、安神补脑口服液组,使用对氯苯丙氨酸(p-chlorophenylalanine,PCPA)制备失眠模型,第3天开始使用药物灌胃,小鼠连续灌胃7 d后使用液相色谱质谱联用技术测定小鼠大脑皮层组织中5-羟色胺(serotonin,5-HT)、多巴胺(dopamine,DA)、γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)的含量.结果:GS-MS分析出β-蒎烯、桉油精、方樟醇等10种有效成分,进一步分析出治疗失眠的关键靶点有19个,PPI网络提示SLC6A3、GABRA2、GRIA2、GABRA1和GABRA6等可能是苏格木勒-4挥发油抗失眠的核心靶点.GO富集分析中符合P＜0.05条件的GO条目54个,KEGG通路富集分析中要求符合P＜0.05得到14条相关信息通道.分子对接结果显示,关键靶点GABRA2与有效成分β-蒎烯、桉油精、方樟醇、4-松油醇、L-α-松油醇、石竹烯结合能≤-5.0 kcal/mol,显示较好的结合能力.苏格木勒-4组小鼠大脑皮层组织中5-HT、GABA的含量均明显高于模型组(P＜0.05),DA的含量明显低于模型组(P＜0.05).结论:苏格木勒-4精油活性成分治疗失眠存在多成分、多靶点、多途径的复杂网络机制.芳樟醇、蒎烯、石竹烯、乙酸松油酯等活性成分通过作用于GABRA1、GABRA2、PTGS2、NCOA2、SLC6A2、CHRM2、GABRA6等靶点,来调控配体门控氯通道、神经活性配体-受体相互作用、多巴胺能突触等通路,使5-HT、GABA的含量升高,DA含量降低,最终产生助眠效果,参与失眠治疗.

目的 采用XEVO G2-XSQ-TOF质谱仪快速鉴定苏格木勒-10的化学成分.方法 采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),流速0.3 mL·min-1柱温40℃,进样量3μL,流动相为乙腈-0.1％甲酸,梯度洗脱,质谱扫描范围为m/z150～1500;通过保留时间及质谱数据信息对比,并结合精确相对分子质量、质谱裂解规律对苏格木勒-10的化学成分进行快速鉴定.结果 共鉴定了 59个化学成分,并解析了其中4个成分的裂解规律.结论 苏格木勒-10含有丰富的化学成分且来源于多个组方药,可为其质量研究及药物体内代谢分析提供基础.