目的 在锂-毛果芸香碱(Lithium-Pilocarpine)致痫大鼠模型中,检测炎症小体的激活,观察小胶质细胞的活化和异常新生神经元的形成,探索炎症小体激活小胶质细胞促进异常新生神经元形成在癫痫发生发展中的作用机制.方法 通过腹腔注射氯化锂和毛果芸香碱建立癫痫大鼠模型,将大鼠分为Sham组(生理盐水对照组,n=12)、Pilo组(锂-毛果芸香碱致痫组,n=20)和Pilo+MCC950组[锂-毛果芸香碱致痫后给予核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)抑制剂组,n=20],在急性期观察记录大鼠癫痫的行为学表现,通过病理切片确认脑组织损伤情况和细胞激活情况,借助分子检测确认炎症小体和其他分子的表达情况.采用体外细胞模型挽救实验验证炎症小体的作用.结果 Pilo组大鼠有6只出现V级,5只出现Ⅳ级,2只出现Ⅲ级的癫痫发作情况.相较之下,Pilo+MCC950组大鼠则没有出现Ⅴ级,6只出现Ⅳ级,8只出现Ⅲ级,2只出现Ⅱ级的癫痫发作情况.Pilo组强直痉挛发作的潜伏期短于Pilo+MCC950组,Ⅲ级以上癫痫发作的次数和持续时间大于Pilo+MCC950组.Pilo组NLRP3和pro-caspase-1的含量、4种促炎细胞因子的含量以及脑源性神经营养因子(BNDF)和细胞外调节蛋白激酶(ERK)均高于Pilo+MCC950组.免疫荧光检测显示,Pilo组小胶质细胞大量活化,出现大量异常新生神经元.体外细胞实验后,ELISA结果验证了炎症小体的作用.结论 在锂-毛果芸香碱致痫大鼠模型中,炎症小体NLRP3接受外界炎症刺激而活化聚集,进而大量产生多种促炎细胞因子,使得小胶质细胞活化,分泌BDNF并激活ERK信号通路,调控异常新生神经元的形成和聚集等生物学行为,参与癫痫的发生发展.

珠芽胎生繁殖是蕨类植物孢子繁殖的有益补充,丰富了植物的繁殖再生系统,影响着种群遗传多样性和对环境的适应能力.该研究以国家Ⅰ级重点保护野生植物光叶蕨(Cystopteris chinensis)为对象,通过形态学与解剖学方法,探究其羽片后面不明突起——珠芽的形态与解剖特征,揭示其生殖结构和发育过程,追溯珠芽胎生起源和生态适应机制.结果显示:(1)珠芽和孢子囊群同期出现在光叶蕨羽片背面末级细脉中部,只是珠芽位于顶端裂片.珠芽形成包括启动期、膨大期和成熟期3个时期,由黄绿色球状体逐渐成长为深绿色纺锤状,基部变黑形成离层时成熟.(2)珠芽起源于维管束鞘延伸区的薄壁细胞,不断分裂生长形成珠芽原基,逐渐突破叶下表皮形成圆球形珠芽;随着珠芽不断膨大,中下部细胞分化形成贮藏细胞和维管束,顶端分化出生长点形成芽.(3)极少数珠芽在叶片上可直接萌动形成新的自养个体.成熟珠芽掉落在土壤内1周后开始萌发,基部长出圆柱形根,顶部萌发出拳芽.残留珠芽第2年仍可萌发形成新叶,与茎芽产生的叶片形态有别.

目的:分析1例晚期婴儿型异染性脑白质营养不良病(metachromatic leukodystrophy，MLD)患儿芳基硫酸酯酶A(arylsulfatase A，ARSA)编码基因的变异情况。方法:应用Sanger测序方法检测 ARSA基因第1～8共8个外显子序列。用PubMed Protein BLAST分析ARSA的跨种属保守性；应用Ucsf chimera软件对正常结构及变异结构的ARSA进行蛋白质3D结构建模及比对来分析变异所致的蛋白二级结构的丧失及蛋白空间结构的改变；应用PolyPhen-2、Mutation Taster及SIFT软件对新变异进行功能预测。 结果:患儿携带 ARSA基因第3外显子c.467G>A(p. Gly156Asp)和第5外显子c.960G>A(p. Trp320*)复合杂合变异。c.467G>A(p. Gly156Asp)变异经PolyPhen-2、Mutation Taster、SIFT及PROVEAN预测软件预测为可能有害变异，同时经PubMed Protein BLAST分析ARSA第156位Gly在各种属间均高度保守，该氨基酸改变可导致编码的ARSA功能发生障碍；c.960G>A(p. Trp320*)变异经Ucsf chimera软件进行蛋白3D结构建模分析发现，该变异可导致编码蛋白空间结构严重变形，原有功能丧失。 结论:ARSA基因c.467G>A(p. Gly156Asp)和c.960G>A(p. Trp320*)复合杂合变异可能为该患儿罹患MLD的致病原因，基因变异检测结果可以为家系的遗传咨询和产前诊断提供依据。

目的:检索并获取SAP患者肠内营养支持的相关临床证据，并总结最佳证据，为临床护理提供参考。方法:应用循证护理的方法，针对SAP患者肠内营养管理提出证据的指标，根据证据层次结构的"6S"模型检索文献，采用澳大利亚JBI循证护理中心的文献评估标准和FAME结构(2019版)对各类研究进行文献质量评估及证据级别评定。结果:结合专业人员的判断，汇总出22条SAP患者肠内营养支持的证据，包括肠内营养管理、置管评估、导管选择、卧位选择、营养制剂选择、能量计算、输注方式等7个方面。其中监测6 h胃残留量、低灌注率(10 ml/h)、半卧位、连续输注等方式是优先等级。结论:本研究总结了目前关于SAP肠内营养支持的最佳护理证据，为规范ICU护士实施肠内营养支持护理行为提供循证依据，确保SAP患者肠内营养支持安全，提高患者耐受性。

患者男，60岁，主诉间断腹痛、腹泻2年余。患者2020年2月起无明显诱因开始出现腹痛、排稀糊便3～4次/d，便后腹痛可缓解，无脓血、里急后重。2021年7月外院查大便隐血试验(＋)，艰难梭菌毒素(＋)，胃镜提示慢性非萎缩性胃炎，结肠镜提示全结肠亚蒂息肉样隆起，表面粗糙糜烂，直肠黏膜充血水肿，散在大小不等息肉样隆起，表面发红伴糜烂，病理活组织检查(简称活检)提示直肠低级别绒毛状管状腺瘤。之后患者病情加重，表现为腹痛、水样便10＋次/d，便中带血，偶有里急后重及肛门坠胀感，2022年2月患者外院再次查病原学、胃肠镜及病理检查结果均大致同前，予甲硝唑、万古霉素和利福昔明治疗后艰难梭菌检查转阴，但患者腹泻仍无改善。2022年5月入本院，查血常规、肝肾功大致正常，血清蛋白电泳M蛋白0.55(正常参考值为0) g/L，免疫固定电泳免疫球蛋白G κ(＋)，血清游离轻链(serum free light chain, sFLC)-κ 17.0(正常参考值范围3.3～19.6) mg/L, sFLC-λ 20.5(正常参考值范围5.7～26.3) mg/L，sFLC-κ/λ 0.83(正常参考值范围0.26～1.65)，骨髓涂片、活检、刚果红染色(－)，胃、小肠、结肠、齿龈黏膜活检刚果红染色(－)。结肠镜提示降结肠、乙状结肠、直肠较广泛黏膜充血水肿、表面可见糜烂，呈节段性分布，乙状结肠、直肠可见较多息肉，直肠尤著，且存在淋巴管扩张改变；活检病理为结肠黏膜慢性活动性炎，隐窝结构紊乱，上皮增生，符合炎性息肉。肠道彩超提示小肠、结肠肠壁黏膜层弥漫性增厚，肠系膜回声弥漫性增强、腹腔积液。腹盆腔增强CT及小肠重建(图1)提示降结肠、乙状结肠及直肠管壁弥漫性增厚伴水肿，黏膜面明显强化。患者2022年8月行回肠造口术，每天1 500 ml肠外营养、500 ml肠内营养支持，效果不理想，仍每日经肛排1 000～1 500 ml黏液。鉴于患者存在不明原因的肠道病变，且实验室检查发现血清M蛋白，为评估肠道病变性质及明确血清M蛋白原因行 18F-FDG PET/CT检查(图2)。

目的:基于循证及德尔菲法构建慢性心力衰竭患者容量管理方案。方法:整体研究时间为2022年4—9月。在证据总结、半结构式访谈的基础上经过小组讨论拟订慢性心力衰竭患者容量管理方案初稿。采用目的抽样法，于2022年6—9月选取上海市16名心内科医疗专家、心内科护理专家、营养专家进行2轮专家函询，制定慢性心力衰竭患者容量管理方案。专家积极系数用问卷的有效回收率表示；专家权威程度采用权威系数（ Cr）表示；专家意见集中程度采用重要性赋值均数、满分率表示；专家意见协调程度采用肯德尔协调系数（Kendall's W）、变异系数表示。 结果:2轮专家函询的问卷有效回收率均为100.0%（16/16），专家 Cr分别为0.908、0.917。第2轮函询一、二级条目的Kendall's W值分别为0.354、0.367（ P<0.05）。第2轮函询各级条目的重要性赋值均数为3.81~5.00分，满分率为25.0%~100.0%，变异系数为0~0.24。最终构建的慢性心力衰竭患者容量管理方案包括6个一级条目，36个二级条目。 结论:针对慢性心力衰竭患者的容量管理方案构建过程科学可靠，内容全面具体，可为临床人员以及慢性心力衰竭患者提供全面的容量管理方案。

目的:系统检索并汇总危重症患者肠外营养实施与管理的最佳证据。方法:依据循证医学证据结构自上而下检索中国知网、维普网、BMJ Best Practice、UpToDate等中英文数据库中关于危重症患者肠外营养实施与管理的相关证据，检索时限为2017年1月1日—2022年7月31日。采用澳大利亚乔安娜布里格斯研究所（JBI）循证卫生保健中心的证据分级及推荐级别系统，由2名研究者进行文献质量评价与证据汇总。结果:共纳入19篇文献，包括临床决策2篇、临床实践指南3篇、专家共识11篇、系统评价2篇、回顾性病例对照研究1篇。汇总出9个主题，分别为组建多学科团队、肠外营养适应证、营养评估、肠外营养启动时间、肠外营养停止时间、血管通路的选择与评估、输注装置的选择、输注过程及并发症观察，共29条最佳证据。结论:安全实施与管理危重症患者肠外营养支持对于改善患者健康结局具有重要意义，医护人员应构建基于循证的标准化肠外营养支持流程，以提高危重症患者肠外营养实施的安全性。

目的:了解父（母）社会经济地位与学龄前儿童含糖饮料消费的关联。方法:于2018年6月对北京市东城区教育委员会辖区幼儿园进行等比例分层整群抽样，将15所幼儿园的所有学龄前儿童纳入研究。采用自制问卷对学龄前儿童父（母）进行调查，获取学龄前儿童及父（母）基本信息、学龄前儿童含糖饮料的消费情况和父（母）对含糖饮料的认知情况，最终将3 217名学龄前儿童的调查结果纳入分析。采用广义结构方程模型分析学龄前儿童消费含糖饮料与父（母）社会经济地位的关系及父（母）含糖饮料认知的中介效应。采用偏差校正非参数百分位Bootstrap法估算中介效应的大小。结果:3 217名学龄前儿童的年龄为（4.23±0.67）岁，其中男生占52.60%（1 692名），学龄前儿童中消费含糖饮料者占77.62%（2 497名）。3 217名学龄前儿童父（母）中，父亲和母亲分别占24.90%（801名）和75.10%（2 416名），社会经济地位得分的 M（ P25， P75）分别为66.7（62.5，69.5）和69.5（64.6，71.4）分；父（母）中主动了解孩子含糖饮料消费情况、对限制学龄前儿童消费含糖饮料缺乏信心和购买食物前阅读营养标签的占比分别为74.08%（2 383名）、82.90%（2 667名）和36.24%（1 166名）。广义结构方程模型分析结果显示：调整学龄前儿童性别、年龄，以及学龄前儿童和父（母）体重指数后，学龄前儿童含糖饮料消费与父（母）社会经济地位得分呈负相关[路径系数（95% CI）：-4.69×10 -2（-6.56×10 -2，-2.69×10 -2）]。父（母）对含糖饮料认知的中介效应可解释总效应的48.71%[路径系数（95% CI）：-2.28×10 -2（-3.54×10 -2，-1.10×10 -2）]。 结论:学龄前儿童含糖饮料消费与父（母）社会经济地位负相关，父（母）对含糖饮料的认知发挥了中介效应。

目的:探讨重复经颅磁刺激(repetitive transcranial magnetic stimulation，rTMS)对卒中后睡眠剥夺模型大鼠学习记忆及海马区突触可塑性蛋白表达的影响。方法:28只SPF级8周龄健康雄性Wistar大鼠，按照随机数字表法分为对照组、假手术组、模型组和rTMS组，每组7只。模型组和rTMS组大鼠采用大脑中动脉栓塞＋对氯苯丙氨酸腹腔注射法建立卒中后睡眠剥夺模型，rTMS组大鼠在建模后连续14 d进行rTMS干预；假手术组大鼠仅分离动脉但不结扎、不插线；对照组大鼠正常饲养。采用旷场实验观察大鼠自主行为，水迷宫实验观察其空间学习记忆能力，Western blot法检测海马组织酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor type B，TrkB)含量，免疫荧光法检测海马组织脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)、即刻早期基因c-fos表达情况，光学显微镜及透射电镜观察海马区神经元形态及结构。采用SPSS 21.0软件进行统计分析，逃避潜伏期数据采用重复测量方差分析，其他数据多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD检验。结果:(1)旷场实验结果表明，干预后4组大鼠穿越方格数、直立次数和总得分均差异有统计学意义( F＝27.638，10.425，30.690，均 P<0.001)。rTMS组大鼠穿越方格数[(72.71±10.10)个]、直立次数[(6.57±0.87)次]、总得分[(79.29±10.03)分]均高于模型组[(43.71±6.96)个，(3.43±0.65)次，(47.14±6.82)分](均 P<0.05)。水迷宫实验结果表明，rTMS干预后，4组大鼠逃避潜伏期比较，交互作用不显著( F＝1.108， P＝0.37)，时间主效应( F时间＝27.295， P时间<0.01)和组别主效应( F组别＝8.691， P组别<0.01)均显著，在第3天和第4天，rTMS组大鼠逃避潜伏期均低于模型组(均 P<0.01)。干预后，4组大鼠穿越平台次数、目标象限游泳距离及停留时间均差异有统计学意义( F＝8.569，3.308，3.547，均 P<0.05)，rTMS组大鼠的穿越平台次数[(2.00±0.31)次]、目标象限游泳距离[(196.95±24.57)cm]及停留时间[(17.72±1.36)s]均高于模型组[(1.57±0.30)次，(146.61±4.79)cm，(13.58±0.98)s](均 P<0.05)。(2)光学显微镜和透射电镜下均显示，与正常对照组比较，模型组大鼠海马区细胞排列紊乱、细胞器完整性被破坏，经rTMS干预后，rTMS组大鼠海马区神经细胞排列及结构均有所改善。(3)免疫荧光结果显示，rTMS组大鼠海马区的c-fos(1.49±0.09)、BDNF(0.84＋0.06)均高于模型组[(1.24±0.12)，(0.48±0.08)，均 P<0.05]。Western blot结果显示，rTMS组大鼠海马组织TrkB(1.81±0.03)表达水平高于模型组(0.96±0.02)( P<0.05)。 结论:rTMS能改善卒中后睡眠剥夺大鼠的学习记忆能力和自主行为能力，可能与促进海马区c-fos、BDNF、TrkB表达有关。

外泌体是由各种细胞分泌产生，广泛存在于生物体液中的纳米级脂质双分子层结构小囊泡，其内容物复杂，具有多种生物学功能。外泌体在青光眼的发生和发展中扮演重要作用，眼内外泌体通过运输青光眼相关蛋白、调节Wnt信号通路、影响细胞外基质周转等参与小梁网细胞调节，从而影响房水循环；小胶质细胞外泌体介导视网膜神经炎症和相关的炎症信号通路。此外，眼内液中外泌体稳定存在，其中差异性表达的蛋白质、RNA等内容物使外泌体具有作为青光眼生物标志物的潜力。在青光眼治疗方面，干细胞源性外泌体抑制胶质细胞活化及神经炎症，减少视网膜神经节细胞的损失，起到神经保护作用。外泌体可通过血－视网膜屏障，输送神经营养因子、药物或其他治疗分子到靶细胞中，调节靶细胞的功能，为青光眼视神经退行性病变提供了新的治疗手段。本文总结国内外青光眼与外泌体领域的研究进展，并对外泌体在青光眼的发生和发展、诊断及治疗中的作用及机制进行综述，以期为早期诊断和治疗青光眼提供新思路。