目的 探讨葱白提取物(FOB)对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的大鼠心肌微血管内皮细胞(RCMECs)损伤的作用及可能的机制.方法 CCK8 检测FOB对正常RCMECs细胞的毒性作用;通过OGD/R方法构建RCMECs细胞损伤模型并利用CCK8 检测细胞活力进行模型鉴定;CCK8 检测不同浓度FOB对OGD/R细胞增殖能力的影响,选择FOB的最适作用浓度;将RCMECs细胞分为对照组,模型组,低、中、高剂量组;生化检测各组细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组细胞中细胞外信号调节激酶(MEK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2 mRNA表达水平;Western印迹检测细胞增殖相关蛋白大鼠细胞周期素(Cyclin)D2、多重肿瘤抑制基因(P16)和MEK/ERK通路相关蛋白表达水平.结果 与对照组比较,模型组细胞LDH活性和P16 蛋白表达水平显著升高,MEK、ERK1/2 mRNA表达水平显著降低,CyclinD2、p-MEK和p-ERK1/2 蛋白表达水平显著降低(均P<0.05).与模型组比较,除低剂量组细胞CyclinD2 蛋白表达水平无显著差异(P>0.05)外,各剂量组细胞LDH活性和P16 蛋白表达水平显著降低,MEK、ERK/2 mRNA表达水平显著升高、CyclinD2、p-MEK和p-ERK1/2 蛋白表达水平显著升高且均呈剂量依赖性(均P<0.05).结论 FOB可以调控RCMECs的活性,其作用机制可能与激活MEK/ERK通路有关.

目的 探讨葱白提取物(FOB)对高脂血症(HLP)大鼠固醇调节元件结合蛋白(SREBP)2/前蛋白转化酶枯草溶菌素(PCSK)9 信号通路和线粒体功能的影响.方法 脂肪乳灌胃法构建大鼠HLP 模型并进行模型鉴定,将大鼠分为:正常组、模型组、FOB低、中、高剂量组、瑞舒伐他汀组.生化方法检测血清脂质含量,苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织形态变化,油红O染色观察脂质沉积情况,实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和Western印迹分别检测低密度脂蛋白受体(LDLR)、PCSK9 和SREBP2 mRNA和蛋白表达水平,透射电镜观察肝组织线粒体,流式检测活性氧(ROS)及线粒体膜电位,qPCR检测线粒体DNA(mtDNA)拷贝数、线粒体融合蛋白(mfn)1、mfn2、神经萎缩蛋白(OPA)1、线粒体动力相关蛋白(Drp)1 表达水平.结果 与模型组比较,FOB能够显著降低血脂水平,减少脂质沉积,修复肝组织损伤,升高LDLR水平,降低PCSK9 和SREBP2水平,缓解肝组织线粒体损伤,降低ROS水平,升高线粒体膜电位,升高mtDNA拷贝数、mfn1、mfn2、OPA1 水平,降低Drp1 蛋白水平.结论 FOB能够降低血脂、改善线粒体功能,其机制可能与FOB调控SREBP2/PCSK9 信号通路有关.

目的 研究葱白提取物对动脉粥样硬化(AS)大鼠CX3C 趋化因子配体1(CX3CL1)、CX3C趋化因子受体 1(CX3CR1)、胱硫醚β合成酶(CBS)、3-巯基丙酮酸硫基转移酶(3MST)表达的影响及相互作用机制.方法 纯种健康雄性SD大鼠,SPF级,体重(200±20)g,共40只,随机选择10只作为正常组,另外30只制备大鼠AS模型,再随机分为模型组、葱白提取物组、辛伐他汀组,每组各10只.正常组以基础饲料喂养,模型组、葱白提取物组、辛伐他汀组均以高脂维生素D3饲料喂养.从第5周开始,葱白提取物组大鼠给予配置好的葱白提取物溶液10 mL/kg体质量灌胃,辛伐他汀组大鼠给予辛伐他汀混悬液10 mL/kg体质量灌胃;正常组和模型组均给予等容积生理盐水10 mL/kg体质量灌胃,共连续8周.在第12周时,留取大鼠血液,分离主动脉.采用生化检测、HE染色、Western blot、RT-PCR检测脂质代谢、H2S催化酶、趋化因子及基质金属蛋白酶表达.结果 与模型组比较,葱白提取物组及辛伐他汀组大鼠血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白B浓度均降低(P＜0.05),高密度脂蛋白胆固醇浓度升高(P＜0.05).与模型组比较,葱白提取物组及辛伐他汀组斑块内部的胆固醇结晶较少,管腔狭窄程度较轻.与模型组比较,葱白提取物组和辛伐他汀组CX3CL1 mRNA、CX3CR1 mRNA、MMP7 mRNA、MMP9 mR-NA表达均下调.与模型组比较,葱白提取物组和辛伐他汀组大鼠主动脉组织中3MST、CBS蛋白相对表达量升高(P＜0.05),而CX3CL1、CX3CR1蛋白相对表达量降低(P＜0.05).结论 葱白提取物可通过调控内源性H2S生成体系,抑制CX3CL1、CX3CR1表达、降低 MMP7、MMP9活性,发挥抗动脉粥样硬化作用.

目的 探讨辛温通阳中药——葱白提取物治疗慢性心力衰竭及干预心肌重构的作用机制.方法 将造模成功的26只CHF大鼠随机分为:模型对照组8只、依拉普利组9只、葱白提取物组9只.另设10只大鼠为假手术组.模型组和假手术组大鼠给予生理盐水灌胃,依拉普利组给予0.19g/kg灌胃,葱白提取物组给予0.25g/kg灌胃,每天1次.实验4周后,处死全部大鼠并迅速取实验大鼠心肌组织,观察心肌细胞的变化情况,并比较各组大鼠心肌组织AngⅡ、AT1R、TGF-β1、CTGF mRNA的表达水平.结果 ①模型组大鼠可见心肌细胞片状坏死,心肌纤维排列紊乱;依那普利组大鼠心肌细胞排裂尚整齐,可见部分坏死溶解;葱白提取物组大鼠心肌细胞排裂尚整齐,可见横纹.②模型组各项指标表达水平均显著高于假手术组和葱白提取物组(P＜0.05或P＜0.01);且葱白提取物组AngⅡ及CTGF的表达水平均明显低于依那普利组(P＜0.05).结论 CTGF可能是心肌纤维化发生发展的重要环节,葱白提取物可通过抑制AngⅡ介导的TGF-β1/Smad信号通路,调控CTGF mRNA的表达及活性,从而控制心肌纤维化的发生和发展,改善CHF患者的心功能.

目的 观察葱白提取物对大鼠急性心肌缺血损伤的保护作用及可能的机制.方法 将40只大鼠随机分为假手术组、模型组、葱白提取物组、硝酸甘油组,每组10只,通过在体结扎冠状动脉前降支制备大鼠急性心肌缺血模型,使用HE染色后观察心肌组织病理形态学改变,采用ELISA法检测大鼠血清总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和髓过氧化物酶(MPO)的活性及血清中丙二醛(MDA)、白介素-10(IL-10)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果 与模型组比较,各治疗组均能提高血清中T-AOC、GSH-Px活性及IL-10水平,降低MDA、IL-6、TNF-α水平及MPO活性(P<0.01,P<0.05).结论 葱白提取物有抗大鼠急性心肌缺血作用,其机制可能与抗氧化损伤和抑制炎症反应有关.

目的:研究葱白提取物对急性心肌梗死后心力衰竭(心衰)大鼠的保护作用.方法:将40只雄性SD大鼠随机分为假手术组和模型组,模型组结扎左冠状动脉,假手术组只穿针不结扎.造模成功后,将模型组大鼠随机分成空白模型组、培哚普利组及葱白提取物组.造模1周后,假手术组和空白模型组以0.9％氯化钠溶液灌胃,其余两组以同等剂量相应药物灌胃;连续给药12周后取左心室做HE染色、Masson染色并测定血清中B型脑钠肽(BNP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、转化生长因子β1(TGF-β1)含量,用实时荧光定量分析技术(RT-qPCR)和免疫蛋白印记法(Western blot)检测各组大鼠心肌组织中Col Ⅰ mRNA、Col ⅢmRNA及Col Ⅰ蛋白的表达.结果:组织病理学显示培哚普利组及葱白提取物组较空白模型组心肌纤维化程度低.与假手术组比较,空白模型组、培哚普利组、葱白提取物组血清BNP含量显著升高(均P＜0.01);与空白模型组比较,培哚普利组和葱白提取物组血清BNP、Ang Ⅱ及TGF-β1含量均明显下降(均P＜0.01),培哚普利组和葱白提取物组间差异无统计学意义;空白模型组、培哚普利组、葱白提取物组Col Ⅰ mRNA、Col ⅢmRNA及Col Ⅰ蛋白的表达均显著高于假手术组(均P＜0.0l),培哚普利组和葱白提取物组显著高于空白模型组(P＜0.01),培哚普利组与葱白提取物组间差异无统计学意义.结论:葱白提取物具有治疗心肌梗死后心力衰竭大鼠的作用,降低Col Ⅰ/Col Ⅲ比例,延缓心肌纤维化,其作用机制可能是抑制Ang Ⅱ-ATl-TGF-β1信号通路.

[目的]观察葱白提取物对非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型大鼠ATP合酶Fo亚基6(ATPase6)、ATP合酶Fo亚基8(ATPase8)表达的影响,并探讨其作用机制.[方法]将50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、葱白低剂量组、葱白中剂量组、葱白高剂量组,每组10只.采用高脂饮食喂养复制NAFLD模型大鼠,造模10周后,给予葱白提取物连续干预4周后,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)的含量;苏木精-伊红(HE)染色法观察肝脏组织结构变化;Real time PCR检测大鼠肝脏组织中ATPase6、ATPase8 mRNA的表达.[结果]与正常组比较,模型组出现明显肝脂肪变性,血清ALT、AST、TC、TG水平明显升高(P<0.05),ATPase6、ATPase8 mRNA的表达明显降低(P<0.05);相较于模型组,葱白低、中、高剂量组肝脂肪变性均不同程度减轻;血清ALT、AST、TC、TG水平均不同程度降低(P<0.05),ATPase6、ATPase8 mRNA表达不同程度升高(P<0.05).与葱白低剂量组比较,葱白中、高剂量组肝脂肪变性减轻明显,ALT、AST、TC、TG水平明显降低(P<0.05),ATPase6、ATPase8 mRNA水平明显升高(P<0.05),中、高剂量葱白组之间差异无统计学意义.[结论]葱白提取物能够改善肝脂肪变性,可能与提高ATPase6、ATPase8的表达,增加肝线粒体ATP合成有关.

目的:观察葱白提取物对非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α),磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK),葡萄糖6磷酸酶(G6Pase)表达的影响,并探讨其作用机制.方法:采用高脂饲料复制非酒精性脂肪肝大鼠模型,并应用小于扰RNA(siRNA)技术抑制PGC-1α的表达,将60只大鼠随机分为正常组、模型组、葱白组(50 mg·kg-1)、转染组、空转组、葱白加转染组.苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织组织结构;检测血液流变学及血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肝脏PGC-1α,PEPCK,G6Pase mRNA和蛋白的表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠肝脏出现明显脂肪变性;大鼠血浆黏度(低切、中切、高切)、全血黏度均不同程度升高(P＜0.05,P＜0.01);血清ALT,AST,TC,TG水平明显增高(P＜0.05);PGC-1α,PEPCK,G6Pase mRNA表达水平明显降低(P＜0.05);给予葱白提取物干预后,葱白组大鼠肝脂肪变性明显减轻;血清ALT,AST,TC,TG水平均降低(P＜0.05),PGC-1α,PEPCK,G6Pase mRNA和蛋白表达水平升高(P＜0.05).PGC-1α转染的大鼠,即使给予同等剂量葱白提取物,与模型组比较,葱白加转染组肝脂肪变性未见明显改善;葱白加转染组PGC-1α,PEPCK,G6Pase mRNA表达无明显差异.结论:葱白提取物能够改善NAFLD模型大鼠肝脂肪变性,其机制可能与增加PGC-1α的转录活性,促进PEPCK,G6Pase的表达进而增加线粒体合成有关.

目的 观察葱白提取物对非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型大鼠PGC-1α、核呼吸因子1(nuclear respiratory factor 1,NRF-1)、线粒体转录因子A(transcription factor A,TFAM)表达的影响,并探讨其作用机制.方法采用高脂饲料复制非酒精性脂肪肝大鼠模型,并应用小干扰RNA(SiRNA)技术抑制过氧化物酶体增殖物激活受体α辅助激活因子-1α(peroxisome proliferator activated receptor-γ coactivator 1 α,PGC-1α)的表达.将48只SD大鼠随机分为正常组、模型组、葱白组、转染组、空转组、转染加葱白组.光镜下观察肝组织HE染色组织结构;检测血清AST、ALT、TC、TG水平;ReahimePCR和Western-blot分别检测大鼠肝脏PGC-1α mRNA及PGC-1α、NRF-1、TFAM蛋白质的表达.结果 模型组出现明显肝脏脂肪变性;血清ALT、AST、TC、TG水平也高于正常组(P＜0.05);相较于模型组,葱白组肝内脂肪变性明显减轻;血清ALT、AST、TC、TG水平均降低(P＜0.05).PGC-1α、NRF-1、TFAM表达情况:与正常组比较,模型组的PGC-1α和NRF-1、TFAM蛋白的表达明显降低(P＜0.05);与模型组比较,葱白组的PGC-1α和NRF-1、TFAM蛋白表达升高(P＜0.05);与空转组比较,转染组的PGC-1α和NRF-1、TFAM蛋白表达水平下降(P＜0.05);与葱白组比较,转染加葱白组的PGC-1α和NRF-1、TFAM蛋白表达水平下降(P＜0.05).结论 辛温通阳中药葱白提取物可能通过提高PGC-1α的转录活化水平,促进NRF-1、TFAM的表达从而促进肝线粒体生物合成改善肝脂肪变性.

目的:探讨葱白提取物治疗非酒精性脂肪肝(NAFLD)可能的作用机制.方法:60只大鼠分为正常组、模型组、低剂量葱白组、中剂量葱白组、高剂量葱白组、易善复组,每组10只.采用高脂饮食造模,造模10周后经组织病理学鉴定模型制备成功后给予不同剂量药物干预4周.光镜下观察肝组织HE染色组织结构;检测血浆黏度、全血黏度及血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平及肝组织游离脂肪酸(FFA)的含量;Realtime PCR检测大鼠肝脏乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)、肉毒碱棕榈酰基转移酶-1(CPT-1)mRNA的表达情况.结果:模型组大鼠肝脏出现明显脂肪变性,舌像评分、肝指数、血浆黏度和全血黏度以及血清AST、ALT、TC、TG水平明显升高(P<0.05),ACCase mRNA表达升高(P<0.05),CPT-1 mRNA的表达下降(P<0.05);低、中、高剂量葱白组及易善复组肝脂肪变性减轻,舌像评分、肝指数、血浆黏度和全血黏度以及血清AST、ALT、TC、TG水平降低(P<0.05),以高剂量葱白组和易善复组下降明显,高剂量葱白组和易善复组差异无统计学意义(P>0.05).结论:葱白提取物治疗NAFLD有效,其机制与促进CPT-1表达及降低ACCase表达有关.