程序性死亡受体1(PD-1)是近年来发现的一种重要的负性共刺激分子，诱导性表达于T、B细胞表面，在调控细胞免疫应答及免疫耐受等过程中起着重要的作用。PD-1与程序性死亡-配体1(PD-L1)结合后通过募集磷酸化的SHP2减弱下游如PI3K/Akt和ERK等信号通路的传导，进而抑制T细胞的增生和细胞因子的产生，抑制免疫应答，参与大量炎症性疾病的发生和发展。PD-1在眼科领域的研究尚处于起步阶段，除参与眼科炎症性疾病如葡萄膜炎、交感性眼炎、变态反应性结膜炎等疾病的发病以外，也参与角膜移植排斥反应、视神经损伤、视神经脊髓炎、糖尿病视网膜病变、甲状腺相关眼病及黑色素瘤等疾病，因而阻断PD-1及其配体PD-L1之间的相互作用有可能成为治疗眼部肿瘤、炎症、免疫性、退变性疾病的潜在的靶点。本文就PD-1及其配体PD-L1在眼部疾病发病中作用的最新研究进展作一综述。

结核病的发生发展与机体的免疫功能密切相关。负性共刺激分子是一类表达在多种细胞表面的信号分子，对免疫细胞正常功能的发挥具有负性调控作用。在结核分枝杆菌感染过程中，很多免疫细胞表面的负性共刺激分子发生了显著改变，与机体疾病的临床诊断以及病程进展具有一定关系。因此，负性共刺激分子的异常表达能够为结核病的临床诊断和治疗提供新的方向。

目的:探讨宫颈细胞DNA倍体分析联合负性共刺激分子B7同源物4（B7-H4）和蛋白激酶Cδ（PKCδ）对宫颈癌的诊断价值。方法:选取2018年1月到2022年1月在石家庄市人民医院诊治的宫颈癌患者160例作为宫颈癌组，同期在本院做宫颈癌前筛查的女性160例作为对照组，根据检查结果分为正常或炎症组（ n=52）、低级别宫颈上皮内瘤变（CIN）组（ n=68）、高级别CIN组（ n=40）。采用全自动细胞图像分析系统分析宫颈细胞DNA倍体情况。采用酶联免疫吸附法测定血清B7-H4、PKCδ水平。采用Pearson相关分析探讨血清B7-H4、PKCδ的相关性；采用受试者操作特征（ROC）曲线评估宫颈细胞DNA倍体分析联合血清B7-H4、PKCδ对宫颈癌的诊断价值；采用logistic多因素回归进行宫颈癌的危险因素分析。 结果:正常或炎症组、低级别CIN组、高级别CIN组、宫颈癌组DNA倍体阳性例数分别为16（30.8%）、27（39.7%）、26（65.0%）、127（79.4%），差异有统计学意义（ H=55.86， P<0.001）。进一步两两比较发现，与正常或炎症组比较，高级别CIN组、宫颈癌组DNA倍体阳性比例均高（均 P<0.05）；与低级别CIN组比较，宫颈癌组DNA倍体阳性比例高（ P<0.05）。正常或炎症组、低级别CIN组、高级别CIN组、宫颈癌组血清B7-H4水平分别为（57.21±10.21）、（79.17±11.34）、（92.73±15.36）、（126.56±20.25）ng/ml，差异有统计学意义（ F=285.45， P<0.001），血清PKCδ水平分别为（89.34±18.29）、（71.79±15.82）、（53.39±11.84）、（40.23±10.21）ng/ml，差异有统计学意义（ F=216.28， P<0.001），进一步两两比较发现，正常或炎症组、低级别CIN组、高级别CIN组、宫颈癌组血清B7-H4水平依次升高（均 P<0.05）；正常或炎症组、高级别CIN组、宫颈癌组血清PKCδ水平依次降低（均 P<0.05）。Pearson检验分析结果显示，宫颈癌患者血清B7-H4、PKCδ水平呈负相关（ r=-0.47， P<0.001）。ROC曲线分析显示，宫颈细胞DNA倍体诊断宫颈癌的曲线下面积（AUC）为0.82（95% CI为0.78~0.86），敏感性、特异性分别为83.9%、79.9%；血清B7-H4诊断宫颈癌的AUC为0.92（95% CI为0.89~0.95），敏感性、特异性分别为95.7%、76.1%，截断值为111.12 ng/ml；血清PKCδ诊断宫颈癌的AUC为0.92（95% CI为0.89~0.95），敏感性、特异性分别为85.6%、88.9%，截断值为54.83 ng/ml；三者联合诊断宫颈癌的AUC为0.99（95% CI为0.97~0.99），敏感性、特异性分别为98.3%、75.9%。三者联合诊断宫颈癌的AUC大于宫颈细胞DNA倍体（ Z=8.00， P<0.001）、血清B7-H4（ Z=4.34， P<0.001）、血清PKCδ（ Z=4.61， P<0.001）单独诊断的AUC。多因素logistic回归分析结果显示，血清B7-H4高水平（ OR=2.94，95% CI为1.78~4.84， P<0.001）、PKCδ低水平（ OR=4.33，95% CI为1.88~10.00， P=0.001）、宫颈细胞DNA倍体阳性（ OR=5.77，95% CI为2.38~13.99， P<0.001）均为影响宫颈癌发生的独立危险因素。 结论:宫颈癌患者宫颈细胞DNA倍体阳性比例升高，血清B7-H4水平升高、PKCδ水平降低，宫颈细胞DNA倍体分析联合血清B7-H4和PKCδ对宫颈癌具有较高的诊断价值。

人T细胞免疫球蛋白与黏蛋白结构域(T cell immunoglobulin and mucin domain，Tim)-1是T细胞免疫球蛋白黏蛋白结构域相关分子家族的重要成员，与天然配体Tim-4协同表现出强烈的免疫共刺激作用。协同刺激分子主要存在于抗原递呈细胞表面，能与淋巴细胞表面的协同刺激分子受体结合，产生协同刺激信号进而调节免疫细胞的活化。Tim-1能提供免疫细胞所需的活化第二信号，还能提供下调细胞免疫应答的负性第二信号，维持免疫细胞的抑制状态，促进肿瘤免疫逃逸的发生。同时在肿瘤细胞中的过度表达与肿瘤进展密切相关，在靶向治疗和免疫治疗中有潜在临床价值。现就Tim-1介导的免疫应答及其在肿瘤微环境中的作用机制进行综述。

目的 探讨芪玉三龙汤在体外条件下对小鼠腹腔巨噬细胞M2/M1型极化的调控作用及其对CD4+T、CD8+T细胞的影响.方法 分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,并通过流式细胞术(PE-CD11b/和FITC-F4/80染色)鉴定其纯度.采用白细胞介素(interleukin,IL)-4刺激小鼠腹腔来源的巨噬细胞构建M2型巨噬细胞模型,芪玉三龙汤处理M2型巨噬细胞,分别于不同时间点应用流式细胞术检测细胞表面膜分子CD16/32、CD206、CD155、PD-L1、Galectin-9 的表达水平;qRT-PCR 检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、IL-12p40、IL-1β、精氨酸酶1(arginase1,Arg1)、FIZZ1、IL-10 mRNA的表达水平.采用芪玉三龙汤处理后的M2型巨噬细胞分别与CD4+、CD8+T细胞体外共培养,流式细胞术检测TIGIT的表达水平.结果 成功分离出小鼠腹腔巨噬细胞,并鉴定其纯度高达89.8％.芪玉三龙汤处理M2型巨噬细胞后,细胞表面膜分子CD16/32的表达水平升高,而CD206表达水平降低;处理24 h后细胞iNOS、IL-12p40及IL-1β mRNA表达水平上升,Arg-1、FIZZ-1、IL-10 mRNA表达水平降低;处理24 h后细胞表面CD155、PD-L1、Galectin-9表达水平降低.经芪玉三龙汤处理的M2型巨噬细胞分别与CD4+、CD8+T淋巴细胞共培养后,CD4+、CD8+T细胞表面TIGIT的表达受到明显抑制.结论 芪玉三龙汤能够诱导小鼠腹腔M2型巨噬细胞向M1型极化,并且极化后的细胞能够抑制T细胞负性调节分子的表达.

目的 检测重症肌无力(myasthenia gravis,MG)早期患者外周血中正性共刺激分子可诱导共刺激分子(inducible costimulator,ICOS)与负性共刺激分子程序性死亡-1(programmed death 1,PD-1)的表达,并探讨其临床意义.方法 分别收集2014年2月到2016年12月间在苏州大学附属第一医院就诊且确诊为MG患者82例外周血标本,作为试验组,同时收集20例非MG患者的其他免疫病患者(non-myasthenia gravis,NMG)及健康体检者56名的外周血标本作为对照组.应用免疫荧光标记、流式细胞术检测3组成员外周血单个核细胞膜上PD-1、ICOS及相应配体程序性死亡-1配体(PD-L1)、可诱导共刺激分子配体(ICOSL)的表达;同时收集2组患者及健康对照组血清,应用酶联免疫吸附法检测3组成员血清中可溶性PD-1(sPD-1)、可溶性PD-L1(sPD-L1)和细胞因子IL-4等的含量并进行统计学分析.结果 (1)流式分析结果:MG组CD4+T细胞上ICOS+亚群[57.29％(57.32％)]较健康对照组[15.6％(14.23％),Z=-6.560,P＜0.05]及NMG组[23.4％(8.48％),Z=-3.645,P＜0.05]显著增高,CD14+单核细胞上和CD19+B细胞上ICOSL+亚群较健康对照组和NMG组表达增高.MG组CD4+T细胞上PD-1+亚群[16.82％(10.66％)]较健康对照组[9.34％(9.18％),Z=-4.345,P＜0.05]及NMG组[7.07％(3.40％),Z=-4.594,P＜0.05]表达增高,CD14+单核细胞和CD19+B细胞上PD-L1+亚群较健康对照组及NMG组明显升高.MG患者外周血CD4+T上PD-1与ICOS的共表达[9.64％(8.82％)]较健康对照组[1.81％(2.10％),Z=-7.389,P＜0.05]及NMG组[2.86％(1.49％),Z=-4.636,P＜0.05]上调.(2)EILSA检测结果:MG组血清中sPD-1[(1.87 ±0.64) ng/ml]明显高于健康对照组[(1.49±0.70) ng/ml,t=2.04,P＜0.05]及NMG组[(1.05±0.5) ng/ml,t=2.08,P＜0.05];MG组血清中sPD-L1与健康对照组及NMG组差异无统计学意义.(3)血清细胞因子检测结果:MG组血清中IL-4表达[(61.88±5.15) pg/ml]较健康对照组[(32.03±1.84) pg/ml,t=2.50,P＜0.05]及NMG组[(42.62±3.31) pg/ml,t=2.34,P＜0.05]上调,MG患者sPD-1与IL-4呈正相关(r=0.406,P=0.029).结论 CD4+T细胞上的PD-1+ICOS+亚群升高提示该亚群参与了MG免疫病理过程,sPD-1可能干扰了T细胞上膜型PD-1的负性信号传导,引起ICOS正性信号相对亢进,导致该群细胞过度活跃推动MG病情进展.

人体的免疫系统是人体进行免疫应答和免疫功能的重要存在,免疫系统具有识别和排除抗原性异物、和人体其他系统协调,一起维护人体生理平衡的功能.免疫系统完善的人体依旧可以导致肿瘤的发生,提示人们恶性肿瘤可以逃避免疫监视,具有免疫逃逸功能[1].程序性死亡受体-1(programmed death 1, PD-1)和程序性死亡受体-1配体(programmed death receptor-1 ligand,PD-L1)信号通路是其中一对免疫共刺激分子,在T细胞的增殖分化中起着重要的负性调节作用[2].目前免疫检查点PD-1/PD-L1信号通路成为免疫治疗新靶点,其抑制剂广泛地应用于许多恶性肿瘤的治疗中,因此抗PD-1抗体pembrolizumab被批准用于高度微卫星不稳定(microsatellite instability-high, MSI-H)/错配修复基因缺失(mismatch repair gene deletion,dM-MR)的所有实体瘤患者的治疗.因此本文就免疫检查点PD-1/PD-L1抑制剂在恶性肿瘤中的治疗进展进行综述.

目的:探讨胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)、肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)和负性共刺激分子B7-H1(B7 homolog 1)在不同病理级别脑胶质瘤组织中的表达及其相关性.方法:对30例低级别脑胶质瘤(WHO Ⅰ级、Ⅱ级)和30例高级别脑胶质瘤(WHOⅢ级、Ⅳ级)标本做连续石蜡包埋切片,用免疫组化SP法检测各组标本中GSCs、TAMs和B7-H1的表达情况,采用CD133作为GSCs的标志物,以CD68作为TAMs的标志物.用Image-Pro Plus 6.0软件分析每个视野阳性染色的积分光密度(IOD),每个组织切片在400倍镜下分析20个视野.结果:CD133、CD68和B7-H1在高级别脑胶质瘤组织中的表达水平明显高于低级别脑胶质瘤组织(P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01);脑胶质瘤组织中B7-H1的空间表达位置在CD68+ TAMs的分布区域较强;CD133与CD68的表达呈正相关(P＜0.001),CD133与B7-H1的表达呈正相关(P ＜0.001).结论:随着病理级别的增高,脑胶质瘤组织中GSCs、TAMs和B7-H1的表达均增高,并且CD133与CD68和B7-H1的表达呈显著正相关.

目的 探讨人脑胶质瘤组织中胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)标志物CD133、肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)标志物CD68和负性共刺激分子PD-L1在不同病理级别人脑胶质瘤组织中的表达及其相关性.方法 采用免疫荧光双染法检测不同病理级别脑胶质瘤组织中CD68和PD-L1蛋白的共表达情况;采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time fluorescent PCR,qRT-PCR)技术检测30例低级别脑胶质瘤(Ⅰ级和Ⅱ级)组织和30例高级别脑胶质瘤(Ⅲ级和Ⅳ级)组织中CD133、CD68和PD-L1 mRNA的表达,并分析其与临床病理级别之间的相关性.结果 脑胶质瘤组织中PD-L1和CD68共表达在肿瘤相关巨噬细胞上,即大部分PD-L1阳性细胞为肿瘤相关巨噬细胞,高级别组CD68和PD-L1蛋白的共表达明显高于低级别组.在脑胶质瘤组织中,CD133、CD68和PD-L1 mRNA的表达水平均与病理分级呈正相关(r=0.647,P＜0.001;r=0.499,P＜0.001;r=0.445,P=0.001);三者在高级别脑胶质瘤组织中的表达均高于低级别脑胶质瘤组织(P＜0.05);脑胶质瘤组织中CD133与CD68 mRNA的表达呈正相关(r=0.525,P＜0.001),低级别组和高级别组中两者表达亦呈正相关(r=0.518,P=0.005;r=0.500,P=0.007);脑胶质瘤组织中CD133与PD-L1mRNA表达呈正相关(r=0.431,P＜0.001),低级别组和高级别组两者表达亦呈正相关(r=0.398,P=0.036;r=0.417,P=-0.027).结论 脑胶质瘤组织中PD-L1主要由肿瘤微环境中的TAMs表达;CD133、CD68和PD-L1表达与脑胶质瘤的恶性程度密切相关.

目的 探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)F蛋白的产生与负性共刺激分子2B4在慢性HCV感染中的关联性.方法 收集慢性HCV患者(chronic hepatitis patient,CHP)的血液样本,检测F抗体(F antibody, F-Ab)的阳性率并依据结果分成(HCV-F(+)组、HCV-F(-)组)两组,收集健康者的血液样本作为对照组;分离并培养外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),收集各孔细胞,酶联免疫吸附试验检测2B4抗体阻断前后白细胞介素4(interleukin4,IL-4)、干扰素γ(interrferon γ,IFN-γ)的表达水平.结果 2B4抗体阻断前, HCV患者PBMCs中IFN-γ和IL4分泌水平均较健康组高(均有P＜0.05),且HCV-F(-)组分泌IFN-γ水平高于HCV-F(+)组(F=1.908,P=0.020),而IL-4分泌水平低于HCV-F(+)组(F =1.342,P=0.009).2B4抗体阻断后,健康组中IFN-γ和IL4水平较阻断前均无统计学意义(均有P＞0.05),CHP IFN-γ分泌水平较阻断前升高(F=1.214,P=0.003),且HCV-F(-)组升高程度高于HCV-F(+)组(F =1.434,P =0.009);而IL4分泌水平较阻断前明显降低(F=1.505,P=0.015),且HCV-F(-)组降低程度低于HCV-F(+)组(F =1.444,P =0.032).结论 在慢性HCV感染中,F蛋白的信号调控机制与负性共刺激分子2B4具有相关性.