理想的支架材料可对组织器官病损进行形态、结构和功能进行重建，因此在组织工程领域受到广泛关注。天然生物材料理论和技术的迅速发展，使其逐渐成为再生医学领域的研究热点。天然生物材料具有高仿生性和良好的生物相容性，且来源广泛，非常适合用作组织工程的支架材料。按成分和原料来源大致分为蛋白质类生物材料（胶原、明胶、丝素和纤维蛋白）、糖类生物材料（纤维素、几丁质/壳聚糖、海藻酸盐和琼脂糖）、糖胺聚糖类（透明质酸、硫酸软骨素）和脱细胞基质移植物（羊膜、小肠黏膜下层、肌腱）。不同的支架材料具有独特的天然结构和理化性质。蛋白质类生物材料多通过聚合形成网状结构影响细胞迁移分化，且有一定的机械性能，可单独制成支架或配合其他合成材料使用；糖类生物材料因高比表面积可负载大量液体，但其机械性能较差，因此常被以凝胶形式控释细胞和生长因子配合其他材料应用在肌腱组织工程中；糖胺聚糖类生物材料具有抗炎、黏弹润滑以及高水合特性，多配合合成材料增加其生物相容性和亲水性。相比天然高分子材料，脱细胞基质不但具有更相仿的细胞外结构和营养成分，而且具有一定的机械性能，可对组织器官病损进行更好的形态、结构和功能重建，因此在组织工程中越来越被受到重视。不同材料的巧妙组合，使肌腱修复展现出更好的效果，也使天然生物材料具有更广阔的临床前景和应用价值。

软骨素聚合因子(CHPF),又称硫酸软骨素合成酶-2,是一种由775个氨基酸组成的Ⅱ型跨膜蛋白,属于软骨素合成酶家族.CHPF基因位于人类染色体2q35-q36区域,跨越4个外显子区域.CHPF是软骨素合成酶家族的成员,参与硫酸软骨素(CS)骨架的延伸.CHPF的表达和活性对于CS的生物合成和蛋白多糖的产生是必不可少的.CHPF作为参与CS生物合成的6种糖基转移酶之一,不仅在CS的生物合成中发挥重要作用,而且在某些类型的恶性肿瘤中也具有重要的调节作用.本综述总结了CHPF在几种肿瘤中的研究进展.

目的:探讨沉默软骨素聚合因子(chondroitin polymerizing factor,CHPF)基因对脑胶质瘤U87细胞增殖及侵袭的影响,及可能的作用机制.方法:构建携带有靶向CHPF基因shRNA(CHPF-shRNA)的重组慢病毒并感染胶质瘤U87细胞.采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测CHPF mRNA及蛋白表达水平的变化,CCK-8法检测细胞的增殖情况,FCM法检测细胞周期及细胞凋亡率,Transwell小室侵袭实验检测U87细胞侵袭能力的变化;蛋白质印迹法检测沉默CHPF基因表达后对单核细胞趋化蛋白1(monoeyte chemoattractant protein 1,MCP-1,又称CCL2)表达水平的影响.最后,采用脂质体法将特异性针对CCL2基因的CCL2-siRNA转入U87细胞,用蛋白质印迹法检测对CHPF蛋白表达的影响.结果:实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测结果表明,感染CHPF-shRNA后U87细胞中CHPF mRNA和蛋白的表达水平均明显被抑制(P值均＜0.05),成功建立了稳定沉默CHPF基因表达的U87细胞.与空白对照组及阴性对照组比较,CHPF-shRNA感染组细胞的增殖速度明显下降,细胞周期阻滞在G0/G1期,凋亡率明显增高(P值均＜0.05);CHPF-shRNA感染组U87细胞,穿过小室膜的细胞数明显减少,侵袭能力下降(P＜0.05);CHPF-shRNA感染组U87细胞中CCL2的表达水平明显下调(P＜0.05).沉默CCL2基因表达后,U87细胞中CHPF mRNA的表达水平无明显变化(P＞0.05).结论:下调CHPF基因表达后,可能通过调控CCL2抑制脑胶质瘤细胞的增殖及侵袭能力,并促进细胞凋亡.

目的 探讨软骨素聚合因子(chondroitin polymerizing factor,CHPF)在结直肠癌预后评估中的意义.方法 采用免疫组化SP法检测206例结直肠癌原发灶及癌旁组织中CHPF蛋白的表达,应用Western blot法检测结直肠原发灶癌组织及其癌旁组织中CHPF蛋白的表达.结果 CHPF蛋白在原发灶癌组织(122/206,59.2％)中的表达显著高于癌旁组织;Western blot实验显示在新鲜结直肠癌组织中检测到CHPF蛋白(5/5,100％).CHPF蛋白高表达与结直肠癌神经或脉管侵犯(P=0.011)、TNM分期(P<0.01)、癌结节(P=0.035)明显相关;与患者性别、年龄、肿瘤分化程度和KRAS状态无关(P>0.05).Kaplan-Meier生存分析结果表明,CHPF蛋白高表达与结肠癌患者不良预后显著相关(P<0.001).Cox多因素风险回归模型分析显示,CHPF蛋白可以作为结直肠癌患者不良预后的独立预测因子.结论 CHPF蛋白高表达是结直肠癌患者不良预后的预测因子之一.

目的:研究肾衰泄浊汤及其补虚,祛邪组分对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的影响.方法:通过结扎单侧输尿管建立UUO大鼠模型.SD大鼠随机分为6组,分别为假手术组,模型组,贝那普利组,肾衰泄浊汤组,补虚方组,祛邪方组;每组24只.手术后第3天,肾衰泄浊汤组,补虚方组,祛邪方组大鼠均按0.8g·mL-1肾衰泄浊汤浓缩剂给药,即给药剂量为8.0g·kg-1·d-1体质量灌胃;贝那普利组大鼠给贝那普利1.5mg·kg-1·d-1体质量灌胃,假手术组,模型组大鼠给等量生理盐水灌胃.术后第7,14,21天,分别用蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肾组织中周细胞及相关信号通路标志物表达情况.结果:与模型组比较,肾衰泄浊汤组,补虚方组,祛邪方组在UUO后第14,21天的间质损伤评分和间质胶原的积累均显著降低(P＜0.05).除假手术组外,各组在第14,21天的肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),血小板衍生生长因子A(PDGFA),神经/胶质细胞2型硫酸软骨素糖蛋白(NG-2),血管内皮生长因子A(VEGFA),血管内皮生长因子受体1 (VEGFR1),血小板源性生长因子β(PDGF-β),血小板源性生长因子受体β(PDGFR-β)的蛋白表达均较第7天显著增加(P＜0.05).在手术后第21天,肾衰泄浊汤组的肾组织中NG-2,VEGFA,VEGFR1,PDGFR-β蛋白表达均显著低于模型组(P＜0.05).与模型组比较,肾衰泄浊汤组在手术后第21天的肾组织中α-SMA,PDGFA,NG-2,VEGFA,VEGFR1,PDGF-β,PDGFR-β mRNA相对表达量均显著降低(P＜0.05),并且肾衰泄浊汤组在手术后第21天α-SMA,NG-2,VEGFA,VEGFR1,PDGFR-β mRNA相对表达量显著低于贝那普利组(P＜0.05).结论:肾衰泄浊汤复方及其补虚,祛邪组分对UUO大鼠肾间质纤维化均具有拮抗作用,其作用机制与抑制周细胞及其相关细胞信号通路激活有关.

目的 探讨shRNA沉默软骨素聚合因子(ChPF)基因对脑胶质瘤细胞活性的影响及可能作用机制.方法 使用携带有靶向ChPF基因shRNA(ChPF-shRNA)的重组慢病毒转染人脑胶质瘤A172细胞,RT-PCR和Western印迹检测细胞中ChPF mRNA和蛋白表达水平;CCK-8法检测细胞增殖水平;流式细胞术检测细胞周期及凋亡水平.进一步使用单核细胞趋化蛋白(CCL2)-shRNA转染人脑胶质瘤A172细胞,RT-PCR和Western印迹检测细胞中CCL2、ChPF mRNA和蛋白表达水平.结果 ChPF-shRNA组ChPF mRNA和蛋白相对表达量明显低于空白对照组和Nc-shRNA组(P<0.01).ChPF-shRNA转入人脑胶质瘤A172细胞后,与空白对照组、Nc-shRNA组相比,ChPF-shRNA组细胞增殖能力明显减弱(P<0.05).ChPF-shR-NA组S期、G2/M期的细胞比例明显低于空白对照组、Nc-shRNA组,G0/G1期的细胞比例明显高于空白对照组、Nc-shRNA组(P<0.05).ChPF-shRNA组细胞凋亡率明显高于空白对照组、Nc-shRNA组(P<0.01).ChPF-shRNA组穿过小室膜的细胞数明显少于空白对照组、Nc-shRNA组(P<0.01).ChPF-shRNA组人脑胶质瘤A172细胞CCL2 mRNA和蛋白相对表达量明显低于空白对照组与Nc-shRNA组(P<0.01).转染CCL2-shRNA后,CCL2-shRNA组人脑胶质瘤A172细胞CCL2 mRNA和蛋白相对表达量明显低于空白对照组与Nc-shRNA组(P<0.01);ChPF mRNA和蛋白相对表达量在各组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 ChPF基因表达下调可能通过调控CCL2来抑制人脑胶质瘤细胞的增殖、侵袭,促进细胞凋亡.

目的 采用生物信息技术分析软骨素聚合因子2(CHPF2)在胶质瘤中的预后意义,并通过实验进一步验证其在正常和胶质瘤细胞中的表达情况.方法 首先在GEPIA和HPA数据库对CHPF2在胶质瘤和正常细胞的表达水平进行分析,随后在癌症基因组图谱(TCGA)和中国脑胶质瘤基因组图谱(CGGA)下载基因表达和临床信息文件对CHPF2在胶质瘤中的表达、预后、功能注释、免疫浸润和免疫检查点等情况作进一步阐明.最后采用蛋白质印迹(Western Blot,WB)技术分析了 CHPF2在正常和胶质瘤组织中的表达水平.结果 CHPF2在胶质瘤中的表达量高于正常组织,且随着肿瘤等级的升高而增加.除性别、放疗和肿瘤再发情况外,年龄、化疗、肿瘤复发、IDH、1p/19q及MGMT等在CHPF2高低表达组中均具有统计学差异.CHPF2较一些常见预后标志物(如TP53、MKI67及EGFR等)对胶质瘤患者生存具有更好的预测性能,可以作为一个独立的预后因素,并通过对TCGA和CGGA数据库的独立预后分析结果进行综合的Meta分析作进一步验证.通过GO、KEGG和GSEA方法,对CHPF2可能富集到的通路进行研究.采用TIMER、CIBERSORT和ssGSEA三种方法,对CHPF2高低风险组中的免疫浸润情况进行分析,并在最后对CHPF2在免疫检查点的情况进行了分析.为了进一步验证可靠性,本研究通过WB技术证实了 CHPF2在胶质瘤细胞的表达量较正常细胞中高.结论 CHPF2能够影响胶质瘤的发生、发展和预后,可以作为胶质瘤患者预后的生物标志物.