目的 制备载氧化铁(IO)/PLGA 微粒(PLGA/IO M Ps),探讨其标记大鼠肌腱干细胞(TSCs)以及体外超声(US)/光声(PA)/磁共振(MRI)多模态成像的可行性.方法 使用双乳化法制备PLGA/IO MPs,并进行理化性质检测及US/PA/MRI成像.应用PLGA/IO MPs标记 TSCs,并用透射电镜(TEM)及普鲁士蓝染色观察标记效果,然后对标记后 TSCs进行体外 US/PA/MRI成像.结果 制备的PLGA/IO MPs粒径约(801.5 ± 165.6)nm,Zeta电位约(-6.36 ± 3.36)mV[含多聚左旋赖氨酸约(3.16 ± 3.69)mV].PLGA/IO MPs具有体外US/PA/MRI多模态显像的能力,标记TSCs后,PLGA/IO MPs位于TSCs细胞质内,且标记的 TSCs能同时进行 US、PA和MRI成像显示出相应的影像学信号.结论 PLGA/IO MP能够对TSCs进行有效标记,并成功行体外 US/PA/MRI多模态成像,为活体内移植后TSCs的无创、多模态示踪奠定了基础.

目的 探讨载氧化铁聚乳酸羟基乙酸微粒(PLGA/IO MPs)标记肌腱干细胞(TSCs)的效率及磁共振(MR)/光声(PA)成像双模态体内示踪 TSCs的可行性.方法 利用前期制备的PLGA/IO MPs与前期实验分离培养的TSCs共同孵育以标记 TSCs ;于标记后3 、 7 、 14 、 21和28 d对标记TSCs分别进行MR/PA成像及普鲁士蓝染色,应用电感耦合离子体原子发射光谱法(ICP-OES)测量标记TSCs细胞内Fe浓度.使用外科手术方式建立SD大鼠右侧肩袖损伤模型并移植标记 TSCs ,移植后第3 、 7 、 14 、 21和28 d对大鼠肩袖进行MR/PA双模态成像观察标记TSCs .结果 随着标记时间的延长,标记TSCs的MR和PA信号逐渐减弱,细胞内Fe含量逐渐减低,至标记后第28 d细胞内Fe含量与未标记TSCs差异无统计学意义(1 .45 pg Fe/cell对1 .17 pg Fe/cell ,P ＞0 .05).大鼠肩袖损伤模型中,MR/PA成像能有效示踪标记TSCs分别长达21 d和7 d .结论 PLGA/IO MPs能有效标记TSCs长达21 d ,双模态MR/PA成像在大鼠肩袖损伤模型中能有效示踪标记TSCs .

目的 通过构建纳米微球靶向性地提高巨噬细胞中的铁浓度来增强抗肿瘤免疫.方法 采用W/O/W复乳化溶剂扩散法制备CD206单克隆抗体表面修饰的载Fe3O4聚乳酸羟基乙酸(PLGA)纳米微球.使用马尔文粒径检测仪测定微粒直径,Zeta电位法测定Zeta电位.用铁测定试剂盒测定Fe3O4的包封率.采用免疫荧光实验检测CD206抗体与巨噬细胞的结合及靶向性.Western blot、qRT-PCR检测巨噬细胞的极化指数.并用BALB/C-57小鼠皮下肿瘤模型验证纳米微球促进肿瘤相关巨噬细胞(TAM)的极化状态.结果 纳米微球的平均直径在260～95 nm,Zeta电位值在-19～-33 MV.Fe3O4的包封率在65％～75％.流式细胞术检测CD206单克隆抗体与PLGA微球偶联率为65％～70％,免疫荧光实验证实了PLGA微球与CD206高表达巨噬细胞的靶向结合能力.Western blot和qRT-PCR证实了偶联CD206抗体载Fe3O4的PLGA纳米微球(CD206-Fe3O4-PLGA)和载Fe3O4的PLGA纳米微球(Fe3O4-PLGA)促进TNF-α、iNOS和IL-1β的表达(P<0.05).小鼠肿瘤模型研究证实CD206-Fe3O4-PLGA纳米颗粒促进TAMs中CD86的表达(P<0.05).结论 PLGA纳米微球具有均匀的粒子的大小及Zeta电位,以及较好的抗体偶联效率及纳米铁包封率,同时偶联CD206的PLGA微球能够较好的靶向结M2型巨噬细胞,并通过释放包被的Fe3O4促进巨噬细胞的M1型极化.本研究为肿瘤的免疫治疗提供了一种潜在的方法.