目的 采用网络药理学及分子对接技术预测金缕半枫荷抗胰腺癌的关键靶点及信号通路,并通过胰腺癌细胞模型验证金缕半枫荷抗胰腺癌作用机制.方法 通过网络药理学数据库预测药物及疾病的靶点,构建蛋白互作网络图,分析通路、功能富集和分子对接.通过CCK-8法筛选金缕半枫荷对8种癌细胞的活性,并采用侵袭、迁徙、增殖、凋亡实验方法验证金缕半枫荷对胰腺癌的作用.采用Western blotting验证网络药理学的结果.结果 网络药理学共筛选得到金缕半枫荷活性成分18个,调控胰腺癌的潜在关键靶点21个.生物富集结果主要与蛋白质的磷酸化、信号传导、细胞凋亡等有关,通路主要与癌症信号通路、PI3K-Akt信号通路等有关.金缕半枫荷对胰腺癌细胞最敏感且显著抑制胰腺癌细胞Panc-1侵袭、迁徙和增殖,并且促进细胞凋亡(P<0.05).Western blotting结果表明金缕半枫荷可以显著抑制PI3K和AKT的磷酸化水平(P<0.001).结论 金缕半枫荷通过多成分、多靶点、多通路发挥抗胰腺癌作用,其中抑制PI3K-Akt通路是其机制之一.

目的 研究金缕半枫荷茎枝乙酸乙酯提取部位的化学成分.方法 采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱、高效液相色谱(HPLC)、高效液相制备色谱等将乙酸乙酯部位进行分离和纯化,波谱法鉴定化合物结构.对半枫荷总提、各提取部位和分离得到的14个化合物进行抗氧化活性测试.结果 鉴定出14个化合物,分别为:肉豆蔻酸(1)、硬脂酸(2)、芝麻素(3)、9-十八碳烯酸(4)、亚油酸(5)、邻苯二甲酸二丁酯(6)、豆甾醇(7)、β-谷甾醇(8)、羽扇豆醇(9)、齐墩果酸(10)、lup-20(29)-ene-3-[3-keto-hexadecanoate](11)、防葵素(12)、C-藜芦酰乙二醇(13)、2,3-二羟基-1-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-1-丙酮(14).结论 首次通过分离手段从该植物的茎枝中得到11个化合物,分别为1、3-7、9、11-14,并且体外抗氧化实验表明半枫荷乙酸乙酯部位、分离纯化得到的化合物13和14抗氧化活性较强.

为进一步开发和利用金缕半枫荷,该研究以超声时间、液料比、乙醇体积分数和超声温度为考察因素,用金缕半枫荷总多酚提取率作为评价指标,采用单因素和正交试验优化提取工艺确定最佳工艺,并以最佳工艺制备金缕半枫荷多酚;进一步采用DPPH·和羟自由基清除法评价金缕半枫荷多酚的抗氧化能力,以抑菌圈和最小抑菌浓度(MIC)为指标,采用牛津杯和肉汤稀释法考察其抗菌活性.结果表明:最佳提取工艺为乙醇浓度70％,料液比为1:16,提取时间为60 min,提取温度为60℃.金缕半枫荷多酚清除DPPH·自由基的IC50为5.22μg·mL-1,与阳性对照维生素C的IC50值4.31μg·mL-1无显著差异,羟自由基清除率IC50为105μg·mL-1,显著低于维生素C的IC50值(180μg·mL-1).对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有抑制作用,抑菌圈直径分别为(13.7±1.2)mm和(10.0±1.3)mm,MIC分别为0.393和0.785 mg·mL-1.这表明金缕半枫荷多酚具有抗菌和显著抗氧化能力,为开发利用金缕半枫荷资源提供了理论依据.

目的:研究金缕半枫荷叶的化学成分.方法:采用HPD100大孔吸附树脂、ODS、Sephadex LH-20、高效液相制备色谱等方法对金缕半枫荷叶的丙酮提取物进行化学成分的分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构.结果:从金缕半枫荷叶中共分离得到11个化合物,分别鉴定为:没食子酸(1)、槲皮素(2)、没食子儿茶素(3)、儿茶素(4)、山柰酚-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷(5)、异槲皮苷-6″-没食子酸酯(6)、catechin-[8,7-e]-4β-(3,4-di-hydroxy-phenyl)-dihydro-2(3H)-pyranone(7)、异杨梅树皮苷(8)、山柰酚-3-O-(2″-O-乙酰基)-β-D-吡喃半乳糖苷(9)、山柰酚-3-O-(2″-O-乙酰基)-β-D-葡萄糖苷(10)、山柰酚(11).结论:以上11个化合物均为首次从该植物中分离得到.

利用ArcGIS软件制作以县为单元的中国金缕梅科植物属的空间分布图,并从图中提取每个属的斑块个数、面积及周长,计算斑块的形状指数、最大斑块指数、Simpson均匀度指数和Shannon均匀度指数,定量分析中国金缕梅科植物各属的空间分布区特点,为金缕梅植物资源的保护、开发和利用提供依据.结果 表明:(1)山铜材属、银缕梅属、四药门花属、牛鼻栓属、金缕梅属、壳菜果属均为单种属,其中前三属总面积较小且分布狭窄,后三属的总面积与分布范围均大于前三属;双花木属、山白树属、红花荷属、秀柱花属、半枫荷属、马蹄荷属、蕈树属、水丝梨属、蚊母树属、檵木属、蜡瓣花属、枫香树属均为多种属,随着属的面积增加,其属的分布区范围基本呈递增的趋势,且多种属的数量是单种属的2倍.(2)枫香树属分布区的总面积和最大斑块面积均最大,它能够整体体现出中国金缕梅科植物的空间分布和特点.(3)中国金缕梅科植物属的空间分布类型全部为间断分布,山铜材属、蚊母树属、檵木属和枫香树属呈现主分布区,牛鼻栓属、金缕梅属、壳菜果属、山白树属、半枫荷属、马蹄荷属、蕈树属、水丝梨属和蜡瓣花属呈主次分布区,银缕梅属、四药门花属、双花木属、红花荷属和秀柱花属呈星散分布.

目的:对金缕半枫荷根甲醇部位的化学成分进行研究.方法:金缕半枫荷根用65％乙醇回流提取,提取液减压浓缩,经D101大孔吸附树脂富集,甲醇洗脱,得到浸膏.浸膏应用硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱色谱分离得到16个化合物,并根据其理化性质和波谱分析解析化合物结构.结果:从金缕半枫荷根甲醇洗脱部位中分离得到16个化合物,分别鉴定为:白桦酸(1)、moronic aldehyde(2)、2,6-二甲氧基-1,4-苯醌(3)、(-)-3,5-二甲氧基-4-羟基-苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、常春藤皂苷元-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯苷(5)、丁香酸-β-D吡喃葡萄糖酯(6)、橙皮苷(7)、羟异栀子苷(8)、(+)-lyoniresinol-3a-O-β-D-glucopyranoside(9)、lyoniside(10)、鞣花酸-3,3'-二甲醚-4-O-a-L-鼠李糖苷(11)、鞣花酸-3,3'-二甲醚-4-O-β-D-葡萄糖苷(12)、3,4,5-三甲醚-苯基-1-O-β-D-葡萄糖苷(13)、反式白藜芦醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(14)、3,4,5-trimethoxyphenyl-6-O-syringoyl-β-D-glucopyranoside(15)、3,4,5-trimethoxyphenyl-(6'-O-galloyl)-O-β-D-glucopyranoside(16).结论:化合物 1～16 均为首次从该属植物中分离得到.

目的 通过网络药理学及分子对接预测金缕半枫荷的关键靶点及信号通路等,并通过利血平诱导的抑郁大鼠模型验证金缕半枫荷对抑郁症炎症反应的作用机制.方法 通过网络药理学数据库预测药物及疾病的靶点,构建蛋白互作网络图,分析生物功能富集和通路,使用AGFR软件进行分子对接.基于利血平诱导的大鼠抑郁模型,通过行为学、分子生物学、病理学等手段验证金缕半枫荷对抑郁症炎症的作用.结果 共筛选得到活性成分13个,金缕半枫荷调控抑郁症的关键靶点11个,生物富集结果主要与认知、突触可塑性调节等有关,通路主要与Rap1信号通路、Toll样受体信号通路等有关.验证实验结果表明,金缕半枫荷提取物高、低剂量能明显缩短小鼠强迫游泳不动时间;明显减少大鼠圈内保留时间,升高血清中5-HT、DA的水平,降低血清中IL-6的水平,改善前额皮层炎性浸润情况,降低脑组织中IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA的表达,升高脑组织中AKT1 mRNA的表达.结论 该研究揭示了金缕半枫荷可通过多成分、多靶点、多通路发挥抗抑郁作用,实验验证结果表明,金缕半枫荷可通过TOLL样信号通路改善抑郁症炎症反应,从而改善抑郁样症状.